鐵皮石斛漂浮育苗技術(shù)研究

張吉

摘 要 以成活率、單株鮮重、莖長、根數(shù)和葉片數(shù)為調(diào)查指標，采用正交試驗設(shè)計L8（4×23），研究營養(yǎng)液、基質(zhì)以及無菌組培苗的等級對鐵皮石斛漂浮育苗的影響。結(jié)果表明：通過對不同指標的比較，鐵皮石斛漂浮育苗的最佳方案為1/4MS（濃度18.75%）+鋸末基質(zhì)+三級苗，以達到壯苗生根，降低育苗成本，縮短育苗時間，提高育苗移栽成活率和改善生長狀態(tài)。

關(guān)鍵詞 鐵皮石斛；正交試驗；漂浮育苗

1 引言

鐵皮石斛，又名黑節(jié)草，為蘭科石斛屬多年生附生草本植物，主要分布于我國云南、貴州、廣西、臺灣等地，是我國傳統(tǒng)名貴藥材[1]。鐵皮石斛是一種生長在巖溶地區(qū)的珍貴中藥材料植物[2]，名列中華“九大仙草”之首，為石斛中的極品，含有石斛多糖、生物堿等化合物和多種微量元素，能顯著提高機體免疫功能，具有益胃生津、補腎益力、滋陰清熱、抗疲勞、增強免疫力、抗腫瘤等功效[3]。

野生鐵皮石斛對生鏡要求嚴格，受小環(huán)境相對濕度、溫度、光照等氣候因子影響較大，生長發(fā)育緩慢，自然繁殖率低，加之近年來生態(tài)破壞嚴重和過度采伐，野生資源日漸枯竭。因此需要人工栽培石斛以滿足市場需求，通過試驗研究，創(chuàng)新育苗方式，提高育苗水平，降低育苗成本，縮短育苗時間，提高育苗移栽成活率和改善生長狀態(tài)。為此本研究于2011年在云南省紅河州屏邊縣進行鐵皮石斛漂浮育苗試驗，探索其高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)育苗技術(shù)。本文通過正交試驗設(shè)計和方差分析的方法對鐵皮石斛漂浮育苗試驗做出分析和總結(jié)。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

供試材料選自云南省紅河州屏邊縣，鐵皮石斛紅鑫1號無菌組培苗。

2.2 試驗時間及地點

本試驗于2011年5月至8月在云南省紅河州屏邊縣群鑫石斛種植有限公司育苗大棚內(nèi)進行。

2.3 試驗設(shè)計

采用3因素混合水平正交試驗L8（4×23），營養(yǎng)液A，育苗基質(zhì)B，使用苗的等級C，3因素試驗中，營養(yǎng)液有4個水平，育苗基質(zhì)和使用苗的等級各有2個水平（詳見表1）。根據(jù)正交設(shè)計，共設(shè)8 個處理，重復(fù)3次，共24個試驗小區(qū)，每個小區(qū)移栽81株苗。

因素A中A1：1/2MS培養(yǎng)液，濃度37.5%（1L水配375mlMS母液）；A2：1/4MS培養(yǎng)液，濃度 18.75%（1L水配187.5mlMS母液）；A3：煙草專用復(fù)合肥，濃度0.083%（1.2L水配1g復(fù)合肥）；A4（對照（CK））：常規(guī)育苗，不使用營養(yǎng)液，直接把組培苗栽到聚氯乙烯細孔育苗盤內(nèi)。

2.4 試驗方法

采用聚氯乙烯泡沫育苗漂盤（162穴，46×30×6cm），將8個處理的12個漂盤分為填充鋸末和填充煙草專用基質(zhì)兩部分，然后分別選用清水洗凈并晾干的鐵皮石斛無菌組培二級苗和三級苗（各972株），按照試驗設(shè)計栽入裝有基質(zhì)的漂盤和育苗盤中。將營養(yǎng)液按30L水的量配置好，然后把栽有石斛苗的漂盤分別放入漂盆內(nèi)，并將漂盆全部放置到育苗大棚內(nèi)的苗床上，對照的3個育苗盤也單獨放置到大棚內(nèi)的苗床上。每月添加適當?shù)臓I養(yǎng)液，以保持漂盆內(nèi)的營養(yǎng)液濃度。

選擇避風(fēng)向陽、地下水位低、地勢平坦、田間衛(wèi)生、管理方便、小氣候好的地域作為育苗環(huán)境，本次試驗選擇在溫室大棚，溫度：23-28℃。

組培苗移栽時記錄栽入漂盤前每個試驗區(qū)組（81株苗）的鮮重和隨機抽取10株苗的莖長、根數(shù)、葉片數(shù)的平均數(shù)，作為計算育苗期間苗木生長狀況的初始觀察數(shù)據(jù)。然后，移栽后每月對每個試驗區(qū)組隨機抽取10株苗進行性狀調(diào)查，連續(xù)調(diào)查3個月，直至育苗移栽。性狀調(diào)查內(nèi)容為，單株鮮重、葉片數(shù)、根數(shù)、莖長和成活率5項指標，以每次調(diào)查10株苗的算術(shù)平均值為依據(jù)來觀察育苗期間植株生長狀況的數(shù)據(jù)變化，以了解和掌握育苗期間植株的生長情況，并進行統(tǒng)計分析，得出試驗結(jié)論。

3 結(jié)果與分析

3.1 試驗結(jié)果

通過正交設(shè)計L8（4×23）試驗，調(diào)查成活率、單株鮮重、葉片數(shù)、根數(shù)和莖長5項指標，以上指標以數(shù)值最大為優(yōu)選，觀察各處理組對鐵皮石斛漂浮育苗的影響。性狀調(diào)查結(jié)果見表2。

結(jié)果表明，4號處理的平均單株鮮重1.23g、平均葉片數(shù)5.8片、平均根數(shù)6.3條、平均莖長3.26cm、平均成活率91.77%，5項指標均為8個處理中的最高值，顯著優(yōu)于其他處理。對照處理中除8號處理的平均根數(shù)6.3條處最高值外，其余4項指標和7號處理的5項指標調(diào)查值均處于最低值。通過方差分析和多重比較結(jié)果表示，鐵皮石斛漂浮育苗中壯苗生根的最優(yōu)方案為A2B2C2，即1/4MS營養(yǎng)液 + 鋸末基質(zhì) + 三級苗。

3.2 試驗結(jié)果的方差分析

用SAS分析系統(tǒng)軟件對試驗結(jié)果進行方差分析（詳見表3）結(jié)果表明，對成活率、單株鮮重和葉片數(shù)，因素A、因素B和處理間差異極顯著（P<0.01）；對莖長，因素A和處理間差異極顯著（P<0.01）；對根數(shù)，因素B和處理間差異顯著（P<0.05）。因此可以認為營養(yǎng)液、基質(zhì)對鐵皮石斛苗生長狀態(tài)的影響具有極顯著差異，組培苗的等級對鐵皮石斛苗生長狀態(tài)的影響差異不顯著，但三級苗的平均值高于二級苗。在生產(chǎn)中可以在嚴格選用營養(yǎng)液和基質(zhì)的同時選擇三級苗，以達到最優(yōu)生產(chǎn)效果。

綜合考慮，從試驗結(jié)果來看，必須通過方差分析各因素間差異的顯著性，漂浮育苗的方法對壯苗生根具有顯著效果，在使用鋸末基質(zhì)時漂浮育苗與常規(guī)育苗相比對生根數(shù)的影響不顯著，但是對其它指標的影響顯著。

經(jīng)過多重比較表明，鐵皮石斛漂浮育苗與常規(guī)育苗（對照）產(chǎn)量的影響達到了極顯著水平差異（詳見表4）。A4（對照）產(chǎn)量極顯著低于漂浮育苗產(chǎn)量，表明本試驗成功的表現(xiàn)出了漂浮育苗的優(yōu)選性，同時，B1（煙草專用基質(zhì)）產(chǎn)量極顯著低于鋸末基質(zhì)的產(chǎn)量，表明優(yōu)選為B2。據(jù)多重比較得出A3為因素A的最優(yōu)水平，但是考慮到各水平間存在交互作用，據(jù)表2的單株鮮重表明，4號處理的單株鮮重處于最高值，同時表4中A2和A3的平均產(chǎn)量相差并不大，綜合考慮，因素A的最優(yōu)水平為A2。

注：* 表示差異顯著，** 表示差異極顯著

對各因素各水平間單株鮮重進行多重比較（表4），得出營養(yǎng)液育苗（A1、A2、 A3）極顯著優(yōu)于常規(guī)育苗（對照）（A4），鋸末基質(zhì)（B2）極限顯著優(yōu)于煙草專用基質(zhì)（B1），苗的等級對生根壯苗影響不顯著，但是三級苗（C2）的單株鮮重平均值高于二級苗（C1），所以，鐵皮石斛漂浮育苗中壯苗的最優(yōu)方案為A2B2C2，即1/4MS營養(yǎng)液 +鋸末基質(zhì) + 三級苗。

4 討論

本試驗通過3因素混合水平正交試驗設(shè)計，得出了有利于鐵皮石斛5項生長指標的各種優(yōu)化方案，通過方差分析和多重比較，使得試驗數(shù)據(jù)更加具有指向性。依據(jù)不同的育苗需求和生產(chǎn)需求得出提高產(chǎn)量的最優(yōu)組合為A2B2C2；提高成活率的最優(yōu)組合為A3B2C2；增加莖長的最優(yōu)組合為A1B2C2；增加葉片數(shù)的最優(yōu)組合為A2B2C2；增加根數(shù)的最優(yōu)組合為A3B2C2。所以本試驗采用正交設(shè)計為尋找最佳的組合方案指明方向，可以減少試驗次數(shù)和試驗分析方法的繁雜，克服在水平組合設(shè)計上的盲目性，從而提高了工作效率和試驗的準確性。漂浮育苗生長速度和生長狀況明顯優(yōu)于常規(guī)育苗，達到了降低育苗成本、縮短育苗時間、提高育苗移栽成活率和改善生長狀態(tài)的試驗?zāi)康摹?/p>

5 結(jié)論

通過3因素混合水平正交試驗L8（4×23）和方差分析結(jié)果顯示鐵皮石斛漂浮育苗中壯苗生根的最優(yōu)方案為A2B2C2，即1/4MS營養(yǎng)液+鋸末基質(zhì)+三級苗。

參考文獻

[1]黃民權(quán)，蔡體育.鐵皮石斛多糖對小白鼠白細胞數(shù)和淋巴細胞移動抑制因子的影響[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1996，8（3）：39-411.

[2]蕭鳳回，等.云南主要藥用石斛種植區(qū)域調(diào)查及適宜性初步評價[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，23（4）.

[3]黃明權(quán)，阮金月.六種石斛屬植物水溶性多糖組組分分析[J].中國中藥雜志，1997，22（2）：74.