何氏養腎顆粒的初步穩定性研究※

唐運洪,張 莉,莫美紅,陳繼英

(廣東省東莞市中醫院,廣東 東莞523000)

何氏養腎顆粒為東莞市中醫院慢性腎臟病治療的院內制劑,由黃芪、地黃、山茱萸、蒲黃等藥物組成,是廣東省名中醫何世東從醫40余載,經過對治療慢性腎臟病的理論、經驗的總結和臨床實踐創制,遵守“脾腎虧虛,腎絡瘀滯”的病機,提出“調補脾腎,化瘀通絡”的治法,及早干預治療[1],在保護腎臟功能、延緩進入腎臟替代的時間、緩解患者臨床癥狀、提高患者生活質量等方面有顯著的療效[2-3]。筆者參照2015年版《中華人民共和國藥典》(簡稱《中國藥典》)四部指導原則“9001原料藥與藥物制劑穩定性試驗”[4],在溫度(25±2)℃、相對濕度(60±10)%的條件下放置12個月,進行長期試驗,同時根據試驗結果初步建立制劑的有效期。

1 性狀

本品為棕褐色顆粒,味微甜、酸、微苦。根據2015年版《中國藥典》四部通則0104,顆粒劑應干燥,顆粒均勻,色澤一致,無吸潮、軟化、結塊、潮解等現象。

1.1 材料 何氏養腎顆粒(本院制劑室提供,批號分別為：201601、201602、201603)。

1.2 方法 取上述3批制劑,拆開最小包裝袋,分別置白色底色的干凈玻璃上觀察。

1.3 結果 201601批號0、3、6、9、12個月性狀考察結果均符合規定。201602批號0、3、6、9、12個月性狀考察結果均符合規定。201603批號0、3、6、9、12個月性狀考察結果均符合規定。

2 鑒別

供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,日光下顯現相同的棕褐色斑點；紫外光燈下(365 n m)顯現相同的橙黃色熒光斑點。

2.1 材料和試劑 何氏養腎顆粒(本院制劑室提供,批號分別為：201601、201602、201603)；黃芪甲苷對照品(批號：110781-201616),購自中國藥品生物制品檢定所；硅膠G薄層板、聚酰胺薄膜購于中國藥品生物制品檢定所；所用試劑均為分析純。

2.2 儀器 電子分析天平(日本島津,型號：AU W120D)；超聲儀(東莞康士潔超聲波科技有限公司,型號：PL-S30T)。

2.3 方法 取3批供試品各5 g,分別研細,加甲醇50 mL,加熱回流1 h,放冷,濾過；濾液蒸干,殘渣加水30 mL使其溶解,用水飽和的正丁醇提取2次,每次30 mL,合并正丁醇液,用氫氧化鈉溶液洗滌2次,每次20 mL；再用以正丁醇飽和的水洗至中性,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇l mL使其溶解,制成3份供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品,加甲醇制成每l mL含l mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(2015年版《中國藥典》四部通則0502)試驗,吸取上述4種溶液各5μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。3份供試品色譜中,應與對照品色譜相應的位置上,日光下顯現相同的棕褐色斑點；紫外光燈下(365 nm)顯現相同的橙黃色熒光斑點。

2.4 結果 201601批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。201602批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。201603批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。

3 檢查

3.1 水分 參照2015年版《中國藥典》四部通則0832的水分測定法測定,供試品的水分不超過8.0%。

(1)材料 何氏養腎顆粒(本院制劑室提供,批號分別為：201601、201602、201603)。

(2)儀器 電子分析天平(日本島津,型號：AU W120D)；電熱恒溫干燥箱(上海一恒科學儀器有限公司,型號：DHG-9140A)。

(3)方法 取3批供試品各5 g,分別平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中,厚度不超過10 mm,精密稱定；開啟瓶蓋在100～105℃干燥5 h,將瓶蓋蓋好,移置干燥器中,放冷30 min,精密稱定。再在上述溫度干燥1 h,放冷,稱重,至連續兩次稱重的差異不超過5 mg為止。根據減失的重量,計算供試品中含水量(%)。

(4)結果 201601批號,0個月考察結果為4.2%,3個月為4.3%,6個月為4.5%,9個月為4.7%,12個月為4.9%。201602批號,0個月考察結果為4.5%,3個月為4.6%,6個月為4.9%,9個月為4.9%,12個月為5.1%。201603批號,0個月考察結果為4.2%,3個月為4.6%,6個月為4.8%,9個月為5.1%,12個月為5.3%。

3.2 溶化性 參照2015年版《中國藥典》四部通則0104的溶化性測定,供試品應呈棕褐色輕微渾濁的液體[4]。

(1)材料 何氏養腎顆粒(本院制劑室提供,批號分別為：201601、201602、201603)。

(2)方法 取3批供試品各1袋,分別加熱水200 mL,攪拌5 min后立即觀察。

(3)結果 201601批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。201602批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。201603批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。

3.3 微生物限度 參照2015年版《中國藥典》四部通則1105、1106“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法、控制菌檢查法”。需氧菌總數不得超過104 cfu/g,霉菌和酵母菌總數不得超過102 cf u/g,不得檢出大腸埃希菌(1 g),不得檢出沙門菌(10 g)。

(1)材料和試劑 何氏養腎顆粒(本院制劑室提供,批號分別為：201601、201602、201603)；需氧菌計數：胰酪大豆胨瓊脂培養基(批號：3104855)；霉菌、酵母菌計數：沙氏葡萄糖瓊脂培養基(批號：3106004)；大腸桿菌檢查：膽鹽乳糖培養基(批號：1307172),MUG培養基(批號：130827)；沙門菌檢查：營養肉湯培養基(批號130711),TBB培養基(批號：130221)。上述培養基均購于廣東環凱生物科技有限公司。

(2)儀器 菌落計數器(無錫市金城儀器廠,型號：JLQ-S1)；細菌計數、大腸桿菌檢查、沙門菌檢查培養箱(上海躍進醫療器械廠,型號：H HBII-420)；霉菌、酵母菌計數培養箱型號(韶關市泰宏醫療器械有限公司,型號：LRH-150B)。

(3)方法 取3批供試品各10 g,分別按2015年版《中國藥典》四部通則1105、1106的相關規定檢查。

(4)結果 201601批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。201602批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。201603批號0、3、6、9、12個月考察結果符合規定。

4 結論

上述3批何氏養腎顆粒樣本在溫度(25±2)℃、相對濕度(60±10)%的條件下放置12個月,分別于0、3、6、9、12個月對其進行性狀、鑒別、檢查等項目進行考察。上述項目在12個月的觀察期內,均能符合我院自定的何氏養腎顆粒的制劑質量標準草案要求,穩定性較好。結果表明,何氏養腎顆粒在現有的最小包裝條件下,穩定性好,擬暫定其有效期為12個月,12個月后需進行進一步研究。