不同治療方案對豬自然感染豬流行性腹瀉的療效觀察

王艷豐，張丁華，朱金鳳，趙秀敏

（河南農業職業學院牧業工程學院，河南 中牟 451450）

豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起豬的一種急性、高度傳染性、高致死性腸道傳染病，臨床特征為嘔吐、腹瀉和脫水[1]。不同年齡的豬均易感，但對仔豬危害最大，病死率最高。即使豬耐過存活，但康復后生長緩慢，飼料報酬降低，飼養成本增加，經濟效益下降[2]。自2010年10月以來，由于PEDV變異株的出現，PED在我國一直大面積暴發。2013年以后，PED暴發導致美國豬場每年損失9億至18億美元，韓國40%的豬場受到影響，給生產者造成巨大經濟損失。

目前，對PED尚無有效治療藥物，但采取抗病毒、防止細菌繼發感染、補液、止嘔及修復腸黏膜等措施，可有效減少該病引起的經濟損失。本試驗對自然感染PED的患豬采用不同治療方案進行對比試驗，并對治療效果進行比較分析，以期篩選出有效治療PED的方案。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

2017年11 月至2018年3月，安陽市（AY）、開封市(KF)、周口市（ZK）、新鄉市（XX）4個豬場的339頭2～28日齡患病哺乳仔豬，臨床表現為水樣腹瀉、嘔吐和脫水等。

1.2 試驗藥物

1）豬白細胞干擾素；2）中藥復方口服液（由白頭翁、黃連、黃柏、秦皮、葛根、黃芩、白術、黨參、茯苓等組成，按一定比例混合、煎煮3次，取上清液過濾后，制成生藥規格為1.0 g/mL）；3）復方乙酰甲喹（5%乙酰甲喹、慶大霉素、0.5%阿托品）。

1.3 疾病診斷

1.3.1 病理學診斷

尸體消瘦，嚴重脫水，眼窩凹陷，皮膚干燥，彈性降低。小腸壁菲薄，透明，內有大量黃色液體，腸黏膜脫落，腸系膜淋巴結腫大或出血。胃內含有灰白色凝乳塊，胃黏膜充血或出血。有的病例腎臟有少量針尖狀出血點，肝臟有灰白色壞死點。不同發病豬場病變存在一定差異。

1.3.2 實驗室診斷

1）PEDV抗原檢測：采用韓國某公司生產的PEDV抗原檢測卡，按使用說明書進行檢測，5～10 min內判定結果。結果發現，AY、KF、ZK和XX豬場在對照線區（C）和檢測線區（T）各出現1條紫紅色線，故判定有PEDV感染。2）核酸檢測：經PCR檢測除4個豬場均為PEDV陽性外，AY、ZK豬場PCV2陽性，KF豬場PRV為陽性。3）細菌分離鑒定：無菌取病死豬的肝臟、脾臟、腸系膜淋巴結等組織，劃線接種于普通營養瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、綿羊血瓊脂平板，37 ℃培養24～48 h，觀察菌落在各培養基的生長情況，挑取培養物涂片，革蘭染色鏡檢，結果發現，AY、ZK豬場有大腸桿菌混合感染。

經病理學診斷和實驗室診斷，AY、ZK豬場為PEDV與PCV2、大腸桿菌混合感染，XX豬場為PEDV感染，KF豬場為PEDV與PRV混合感染。

1.4 試驗設計

每個豬場選取典型病例隨機分成3組，分別是干擾素組（Ⅰ組）、中藥組（Ⅱ組）、抗生素組（Ⅲ組）。同一豬場各組飼養管理條件一致，各試驗組隔離飼養，用藥及處理情況見表1。

1.5 療效評價指標

1）治愈：用藥物治療后臨床癥狀完全消失，精神及飲食恢復正常為治愈，統計治愈數計算治愈率。2）顯效：用藥物治療后臨床癥狀明顯減輕，精神及飲食恢復好轉的為治療顯效，統計顯效數計算顯效率。3)有效：為治愈率與顯效率之和。

1.6 統計學分析

應用SPSS 16.0統計軟件對試驗數據進行顯著性檢驗，用Duncan’s法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 4個地區豬場3種治療方案對PED療效對比

停藥3 d內觀察臨床癥狀，統計死亡數、治愈數、有效數等指標并計算，結果見表2。

從表2可以看出，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組的治愈率分別為50.0%～66.7%、56.0%～ 82.1%、40.0%～ 50.0%，有效率分別為66.7%～80.0%、72.0%～92.9%、52.0%～70.0%，以Ⅱ組治愈率和有效率最高，其次是Ⅰ組，最后是Ⅲ組。不同治療方案在同一豬場治愈率和有效率不同，如AY豬場3組治愈率分別為66.7%、80.0%和50.0%；同一治療方案在不同地區的治愈率和有效率也不同，如Ⅱ組在4個地區的治愈率分別為80.0%、56.0%、73.3%和82.1%，說明治療效果會受諸多因素的影響。

2.2 3種治療方案對PED總體療效對比結果見表3

從表3可以看出，3種治療方案對PED有著不同的治療效果，其中以Ⅱ組治愈率和有效率最高，分別為72.9%和85.4%，死亡率最低，說明中藥復方口服液對PED具有良好的治療效果。從治愈率來看，Ⅰ組與Ⅲ組相比差異顯著（P＜0.05），Ⅱ組與Ⅲ組相比差異極顯著（P＜0.01），Ⅰ組、Ⅱ組之間差異不顯著（P＞0.05）；從有效率來看，Ⅰ組、Ⅱ組與Ⅲ組相比差異顯著（P＜0.05），Ⅰ組、Ⅱ組之間差異不顯著（P＞0.05），說明中藥復方治療PED效果最好，顯著優于抗生素組，同時表明干擾素也可用于PED的治療。

表1 試驗動物分組與處理

表2 4個地區豬場3種治療方案對PED療效對比

表3 3種治療方案對PED總體療效對比（）

表3 3種治療方案對PED總體療效對比（）

注：同列數據肩標字母相同或無字母表示差異不顯著（P＞0.05），不同小寫字母表示差異顯著（P＜0.05），不同大寫字母表示差異極顯著（P＜0.01)。

Ⅰ組 60.3a 14.4 74.6a 25.4Ⅲ組 44.9Bb 17.5 62.4b 37.6

3 小結與討論

自2010年10月以來，我國10多個省市暴發PED，對養豬業造成了嚴重的經濟損失。特別是PEDV變異株的出現，與傳統毒株(2012年前)的基因相比存在較大變異，使得現有的疫苗毒株CV777保護力不佳。目前用于治療PED的主要有生物制劑、藥物、植物提取物、小分子制劑和抑制劑等[3]，其中以中藥、干擾素臨床試驗應用報道較多。

干擾素（IFN）是受體細胞分泌的一種廣譜抗病毒糖蛋白，通過激活細胞中多種功能基因的轉錄，調節各信號傳導通路的協同作用，從而發揮抗病毒、抗細菌、抗寄生蟲、免疫調節等生物學功能，具有明顯的種屬特異性[4]。本次試驗顯示IFN對PED的治愈率為50.0%～66.7%（平均為60.3%），與趙永旭等[5]報道的治愈率50%～70%接近，且在不同豬場使用效果差異較大，治愈率為37.5%～70.0%，但低于韓國英等[6]報道的治愈率92%，分析原因可能是與其人工感染后用藥較早，而自然病例存在感染程度、混合感染、感染日齡及繼發感染等影響因素有關。IFN對嚴重病例治療效果不佳，原因可能是仔豬PED感染嚴重時，腸道損傷較為嚴重，大量腹瀉導致機體脫水和酸中毒，僅用IFN不能緩解脫水和酸中毒癥狀。同時，IFN必須在病毒感染早期(此時體內病毒尚未廣泛散布和引起嚴重病變)使用才能奏效，且需要反復多次使用。

中獸醫辨證認為PED屬于濕熱毒邪內蘊所致。濕熱上蒸，故精神沉郁；胃失和降，故嘔吐；濕熱犯脾，故食欲減退；濕熱下迫，水濕不能分利，腸道傳導失職，故瀉如注，糞便腥臭，尿短少。治宜芳香化濁、健胃醒脾、除濕止瀉、補中益氣和清熱解毒[7]。中藥復方口服液由白頭翁散加味（葛根、黃芩、白術、黨參、茯苓等）而成。朱買勛等[8]研究發現由白術、茯苓、黃芪、黃芩等組成的復方，能明顯抑制PEDV的致病變作用，直接滅活作用和復制抑制試驗效果比較明顯，細胞保護率均超50%。本次試驗中藥口服液對PED治愈率為56.0%～82.1%（平均為72.9%），高于劉衍芬等[9]、尹寶英[10]報道的治愈率為50%和52%～54%，分析原因可能是與其未采取止嘔、補液等對癥治療措施有關，但低于楊云喬等[11]報道的治愈率86.7%。作用機制可能與中藥可以加速組織修復、減輕炎癥反應和調節免疫，以及保護線粒體、穩定細胞結構、穩定膜結構、調整酶活性和抗繼發感染有關[12]。

試驗結果表明，IFN和中藥復方口服液均可作為治療PED的方法，其中以中藥復方效果較好。但兩者在治療時都必須配合止嘔、補液、減緩腸蠕動及修復腸黏膜等治療措施，且治療時間越早，療效越好。但同一種治療方案在不同地區的不同豬場治療效果存在差異，主要與發病日齡、感染程度、治療時間、混合感染、療程，以及是否采取對癥治療措施等因素有關。

4 結論

中藥復方口服液由白頭翁、黃連、黃柏、秦皮、葛根、黃芩、白術、黨參、茯苓、石榴皮等組成，具有清熱解毒、涼血止痢、除濕止瀉等功效，對PED具有一定的治療效果。根據試驗結果，推薦中藥復方口服液按3～5 mL/頭或0.75 mL/kg體重，灌服，2次/d，連用5 d，對PED有良好的治療效果。同時，IFN作為具有廣譜抗病毒和免疫調節作用的細胞因子，在感染早期治療亦有一定的效果。