三七總皂苷對心肌缺血模型大鼠血清生化學和血液流變學指標的影響

王瑞峰，姜克悅

（河南南陽市油田總醫院心血管內科，河南 南陽 473132）

心肌缺血為冠狀動脈血流不全而導致的冠狀動脈供血不足，進而導致心臟供氧減少和能量代謝不正常，不能支持心臟正常工作的一種病理狀態，見于多種臨床常見缺血性心臟疾病，目前尚無特效藥物，致殘率及病死率高[1]。三七總皂苷可抗血小板凝集，防止心肌缺血-再灌注損傷的發生，改善缺血性模型動物的心腦損傷程度[2]。本研究中建立了大鼠以心肌缺血模型，探討三七總皂苷對其血清生化學和血液流變學指標的影響，為三七總皂苷的臨床應用提供參考。

1 材料與方法

1．1 動物、儀器與試藥

動物：清潔級SD大鼠(北京維通利華動物實驗中心提供，許可證號為 SCXK＜京＞2012-0001)60只，雄性，5～6周齡，體質量 180～220 g。適應性喂養 7 d，實驗期間自由飲水進食。

儀器：Multiskan FC型酶標儀(美國Thermo公司)；SHZ-Ⅲ型循環水真空泵(常州市金壇友聯儀器研究所)；TGL-18C型高速臺式離心機(上海安亭科學儀器廠)；GX 964型血小板黏附兩用儀(上海第三分析儀器廠)；ZX-6020型全自動生化分析儀(西化儀＜北京＞科技有限公司)；LS-20ECG型大鼠心電圖記錄儀（北京拜安吉科學儀器有限公司）。

試藥：三七總皂苷（成都普瑞法科技開發有限公司，批號為20150609）；苦碟子注射液（通化華夏藥業有限責任公司，批號為20150912，規格為每支20 mL）；丙二醛（MDA）檢測試劑盒（批號為 20150217）、一氧化氮(NO)檢測試劑盒（批號為 20150326）、游離脂肪酸(FFA)檢測試劑盒（批號為20141108），均購自南京建成生物工程研究所有限公司；水合氯醛及其余試劑均為藥用級，水為蒸餾水。

1．2 方法

分組與給藥：將60只SD雄性大鼠隨機分為假手術組（A組，生理鹽水）、模型組（B組，生理鹽水）、苦碟子注射液組（C 組，100 mg／kg）和三七總皂苷高、中、低劑量組（D1組，D2組，D3組，200，100，50 mg／kg），每組10只。各組大鼠灌胃相應藥物，每天1次，連續7d。

造模：于末次給藥后，參照文獻[3]建立大鼠心肌缺血模型，給予大鼠腹腔注射水合氯醛（300mg／kg），并在大鼠右上肢和左下肢皮下置入心電圖電極針記錄Ⅱ導聯形態。在距離大鼠左冠脈前降支起始處3～4 mm穿線，結扎，觀察心電圖變化，顯示ST段明顯抬高視為造模成功。假手術組手術過程與上述相同，只穿線不結扎冠狀動脈。

血清生化學指標檢測：造模成功后24 h，腹腔注射10%水合氯醛（300 mg／kg）麻醉大鼠，腹主動脈取血5～6 mL，靜置 10～20 min后 3 200 r／min離心 10 min，取上清液，采用酶聯免疫吸附法檢測。采用酶標儀分別在100，200，300 nm 波長處檢測 MDA，NO，FFA 的吸光度，以說明書相應公式得上述指標含量。

血液流變學指標檢測：取上述血清適量，以3．8%枸櫞酸鈉進行抗凝，采用血小板黏附兩用儀檢測血小板黏附情況，按下列公式計算血小板黏附率：血小板黏附率＝（黏附前血小板數-黏附后血小板數）／黏附前血小板數×100%。采用全自動生化分析儀檢測纖維蛋白原含量和紅細胞比容水平。

1．3 統計學處理

2 結果

2．1 大鼠血清中MDA，NO，FFA含量

與假手術組比較，A組大鼠血清中MDA，NO，FFA含量均顯著增加（P＜0．05）；與 B 組比較，C 組、D1組、D2組、D3組大鼠血清中MDA，NO，FFA含量均顯著減少（P＜0．05）。詳見表 1。

表1 各組大鼠血清中MDA，NO，FFA含量比較（s，n＝10）

表1 各組大鼠血清中MDA，NO，FFA含量比較（s，n＝10）

注：與 A 組比較，P ＜0．05；與 B 組比較，＃P ＜0．05。下表同。

組別A組B組C組D1組D2組D3組劑量(mg／kg)100 200 100 50 MDA(nmol／mL)7．43 ± 1．35 9．06 ± 1．68 7．75 ± 1．62＃7．74 ± 1．05＃7．61 ± 0．92＃8．76 ± 1．97 NO( mol／mL)17．33 ± 0．82 31．45 ± 2．82 23．25 ± 1．11＃25．82 ± 1．08＃27．45 ± 2．82＃32．68 ±164 FFA(mmol／mL)389．62 ± 9．12 468．92 ± 9．47 395．62 ± 9．36＃393．73 ± 9．82＃416．28 ± 8．82＃432．81 ± 9．22

2．2 大鼠血小板黏附率、纖維蛋白原和紅細胞比容水平

與A組比較，B組大鼠血小板黏附率和紅細胞比容水平顯著升高，纖維蛋白原含量顯著增加（P＜0．05）；與A組比較，C組、D1組、D2組、D3組大鼠血小板黏附率和紅細胞比容水平顯著降低，纖維蛋白原含量顯著減少（P ＜0．05）。詳見表 2。

表2 各組大鼠血液中血小板黏附率、纖維蛋白原和紅細胞比容水平比較（X ± s，n＝10）

3 討論

缺血性心臟病多發于中老年人群，主要是因患者心臟血液灌注減少，心臟供氧量下降，心肌能量代謝異常，從而導致心臟不能正常工作[4]。臨床治療本病以降低患者心肌梗死頻率，縮短心肌梗死的持續時間為主，以改善患者的生活質量，降低死亡率[5]。臨床多給予患者鈣拮抗劑、抗氧化劑、腺苷受體激動劑、β-受體阻滯藥等進行干預，但并未取得理想效果[6]。丹參、紅花、三七具有活血化瘀、通絡活絡之功效；三七為五加科植物的干燥根和莖[7]，其主要活性成分為三七總皂苷，包括三七皂苷R1、人參皂苷Re1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rd和人參皂苷Rb1[8]。藥理學研究表明，三七總皂苷可有效抑制血栓形成，還能改善血壓水平，擴張外周血管，保護受損的缺血性心肌細胞[9-10]。

血液流變學主要是針對血液黏滯性、凝固性的研究，是評估患者疾病發展程度的重要參數，該指標如果發生異常會加重細胞組織缺氧缺血，導致紅細胞膜功能障礙進一步加重，從而損傷組織細胞。心肌細胞缺血缺氧可抑制NO釋放，同時使冠狀動脈進一步痙攣，加重心肌受損。因此，NO含量可一定程度反映心肌受損程度。MDA是大量的氧自由基造成脂質過氧化損傷的產物，可抑制前列環素合成酶活性，使血管收縮，加重心肌損傷。血清中FFA的含量與脂代謝、糖代謝、內分泌功能有關，心肌缺血使FFA含量異常增加，會進一步加重其缺血程度。本研究結果表明，三七總皂苷可顯著減少心肌缺血模型大鼠血清中MDA，FFA，NO含量，顯著降低血小板黏附率和紅細胞比容水平，減少血液中纖維蛋白原的含量。但本研究由于樣本量較少，且僅限于血清生化學和血液流變學指標，結果可能存在一定片面性，后期還需增大樣本量，同時在基因和蛋白水平層面進行深入研究，為三七總皂苷的臨床應用提供更有力的依據。

綜上所述，三七總皂苷對心肌缺血模型大鼠的血清生化學和血液流變學指標有一定改善作用，其機制可能與抗氧化和改善血液質量有關。