多西他賽聯合表柔比星序貫化療對三陰性乳腺癌相關指標的影響

張立芳，張曉林，孔令新

（河北省邢臺市寧晉縣婦幼保健院，河北 邢臺 055550）

乳腺癌患者如癌組織中孕激素受體（PR）、雌激素受體（ER）、原癌基因人類表皮生長因子受體2（Her-2）基因均為陰性，則診斷為三陰性乳腺癌（TNBC），占所有類型乳腺癌的10%～20%[1]。TNBC侵襲性強，內臟、骨及腦轉移早，對細胞毒藥物敏感性高，但緩解期短，預后較其他類型乳腺癌差。目前臨床對該病多采取紫杉醇類聯合蒽環類藥物化學治療(簡稱化療)，取得了一定療效，但該聯合化療方案存在耐受性差、不良反應較嚴重等弊端。有學者發現，序貫化療對降低化療并發癥發生率有一定幫助[2]。本研究中采用多西他賽（TXT）聯合表柔比星（EPI）序貫治療 TNBC，觀察其對患者相關指標的影響?，F報道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料

納入標準：符合《中國進展期乳腺癌共識指南》[3]中TNBC診斷標準；預計生存期不短于6個月；年齡18～60歲；浸潤性癌，有明確病灶，需行手術；無其他惡性腫瘤病史；本研究經醫院醫學倫理委員會批準，患者及其家屬對本研究內容知情并簽署知情同意書。

排除標準：合并其他部位原發腫瘤病灶；對本研究藥物過敏；有放、化療史；美國東部腫瘤協作組體能狀況評分低于2分。

病例選擇與分組：選取醫院2015年1月至2017年9月收治的TNBC患者74例，均為女性，按隨機數字表法分成序貫化療組（研究組）和TXT＋EPI聯合化療組（對照組），各37例。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P ＞0．05），具有可比性。詳見表 1。

表1 兩組患者一般資料比較（n＝37）

1．2 方法

患者術后均給予規律化療，期間常規監測肝、腎功能。研究組化療方案：3周為1個周期，前4個周期第1～2天予注射用鹽酸表柔比星（北京協和藥廠，國藥準字 H20143165，規格為每支含 10 mg）75 mg ／m2靜脈滴注；后4個周期第1天給予多西他賽注射液（江蘇奧賽康藥業股份有限公司，國藥準字H20123404，規格為每支 1 mL∶20 mg）100 mg／m2靜脈滴注；共治療 8個周期。對照組化療方案：3周為1個周期，每個周期第1～2天予注射用鹽酸表柔比星75 mg／m2靜脈滴注，第3天予多西他賽注射液75 mg／m2靜脈滴注；共6個周期。

1．3 觀察指標

血清標志物：于化療前（T1）、化療后（T2）采集患者清晨空腹靜脈血5 mL，離心分離血清，采用C12型多腫瘤標志物蛋白質芯片檢測系統（上海數康生物科技有限公司）檢測癌胚抗原（CEA）、糖類抗原 199（CA199）。

細胞因子：取上述血清，采用酶聯免疫吸附（ELISA）法檢測白細胞介素 8（IL-8）、白細胞介素 6（IL-6）、人生長分化因子 3（GDF3）水平，試劑盒均購自上海依科賽生物制品有限公司。

腫瘤耐藥相關指標：于T1和T2時經手術、穿刺取得乳腺癌組織，用 D-Hanker液沖洗后過200目篩，常規離心5 min；配置DMEM／F12培養基，進行乳腺癌干細胞（BCSCs）微球體分離培養；將培養所得懸液低速離心，取上清液，加入苯甲基磺酰氟和RIPA裂解液，0℃下靜置10 min；轉移上清液，蛋白電泳電轉至膜，加入5%脫脂牛奶，室溫下封閉2 h，加入一抗于4℃下過夜；TBST洗膜3次，加入HBP標記的鼠抗兔抗體，37℃孵育1．5 h，TBST洗膜3次；ECL試劑盒（上海酶聯試劑盒公司）顯影，以 β-actin為內參計算乳腺癌耐藥蛋白（ABCG2）、P- 糖蛋白（P-gp）表達水平。

不良反應：觀察治療過程中胃腸道反應，紅細胞、血小板、白細胞、中性粒細胞減少等不良反應發生情況。

1．4 統計學處理

采用SPSS 20．0統計學軟件分析。計數資料以百分比（%）表示，行 χ2檢驗；計量資料以s表示，行t檢驗。P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

結果見表2至表5。

表2 兩組患者血清CEA和CA199水平比較（s，n＝37）

表2 兩組患者血清CEA和CA199水平比較（s，n＝37）

注：與本組 T1相比，P ＜0．05。表 3、表 5 同。

組別CEA（ng ／mL） CA199（U ／mL）T1T2T1T2研究組對照組t值P值7．98 ± 1．54 8．12 ± 1．62 0．381 0．704 3．18 ± 0．54 3．26 ± 0．57 0．620 0．537 35．51 ± 6．47 35．48 ± 6．41 0．020 0．984 11．71 ± 2．16 12．08 ± 2．21 0．728 0．469

表3 兩組患者癌細胞ABCG和 P-gp水平比較（s，n＝37）

表3 兩組患者癌細胞ABCG和 P-gp水平比較（s，n＝37）

組別ABCG2 P-gp T1T2T1T2研究組對照組t值P值0．56 ± 0．11 0．55 ± 0．09 0．428 0．670 0．72 ± 0．14 0．89 ± 0．16 4．864 0．000 0．21 ± 0．03 0．20 ± 0．02 1．687 0．096 0．35 ± 0．06 0．47 ± 0．08 7．299 0．000

表4 兩組患者不良反應發生情況比較[例（%），n＝37]

表 5 兩組患者血清 IL-8，IL-6，GDF3 水平比較（X ± s，pg／mL，n＝37）

3 討論

相較于其他類型乳腺癌，TNBC初診時分期偏晚，侵襲性較強。目前多采用蒽環-紫杉類藥物聯合治療TNBC，客觀緩解率可達70%～90%[4]。EPI是常用蒽環類藥物，為拓撲異構酶Ⅱ抑制劑，可嵌入DNA雙鏈堿基間形成穩定復合物，并可對DNA超螺旋轉化造成影響，從而阻礙DNA復制與轉錄，抑制癌細胞分裂[5]。同時，其還可通過螯合鐵離子后產生自由基，破壞細胞膜、蛋白質及DNA結構，發揮細胞毒作用。王?，|等[6]研究顯示，EPI對 MDA-MB-231、MDA-MB-468 等激素受體陰性細胞系的化療敏感性明顯高于MCF-7等激素受體陽性細胞系，且 EPI作用 24 h后，MDA-MB-231、MDA-MB-468中鈣網蛋白、HSP70表達量均顯著高于MCF-7，提示EPI在發揮較強細胞毒性作用的同時對激素受體陰性乳腺癌細胞還有潛在免疫原性死亡作用，對TNBC治療有重要意義。作為紫杉烷類抗腫瘤藥物，TXT以其良好的廣譜抗癌作用和水溶性得到廣泛應用，其可促進微管裝配，機制與紫杉醇類藥物相似，但其微管解聚抑制作用是后者的2倍，療效更顯著[7]。相關研究顯示，TXT對于乳腺癌轉移患者，單藥化療緩解率約為47%，聯合蒽環類藥物可顯著提升療效[8]。

蒽環-紫杉類藥物聯合化療方案治療TNBC雖可通過劑量密集給藥發揮更強抗癌作用，但可能增加毒副反應風險。序貫化療方案調整用藥時機和周期時不改變化療藥物總量，為治療TNBC提供了新思路。本研究結果顯示，2種方案改善患者血清腫瘤標志物、細胞因子水平方面作用相當。存在于癌細胞表面的CEA是引起癌細胞之間及癌細胞與基質膠原之間黏附反應的糖蛋白，其為廣譜性腫瘤標志物，用于乳腺癌、肺癌等惡性腫瘤的療效判斷、病情監測和預后判斷效果較好[9]。CA199為黏蛋白型糖類蛋白腫瘤標志物。湯繼英等[10]研究發現，血清CEA和CA199水平與乳腺癌化療后總體生存時間、無進展生存時間相關，有助于準確評估乳腺癌患者臨床預后狀態。惡性腫瘤的病情進展與血清IL-8和IL-6水平密切相關，GDF3則為重要的腫瘤釋放細胞因子，在腫瘤的發生中發揮重要作用。楊明德等[11]研究發現，化療可通過降低乳腺癌患者血清IL-8和IL-6水平而抑制腫瘤浸潤和轉移。

ABCG2參與癌細胞的生長、分化和侵襲轉移等多個過程[12]。P-gp則可將藥物泵出癌細胞，減少進入癌細胞的藥物量，并可降低癌細胞靶點的藥物濃度，導致多藥耐藥的發生[13]。本研究結果顯示，相對于聯合化療方案，TXT＋EPI序貫化療對于減輕TNBC耐藥程度有一定幫助。此外，研究組患者各類不良反應發生率均明顯低于對照組（P ＜0．05），表明 TXT＋EPI序貫化療對減輕化療毒副作用有一定意義。王薇等[14]的研究也發現，TXT聯合EPI序貫化療對減輕TNBC患者腎功能損害、血液系統及胃腸道不良反應均有一定幫助，與本研究結果基本一致。

綜上所述，TXT＋EPI序貫化療改善TNBC患者血清腫瘤標志物、細胞因子水平作用與TXT＋EPI聯合化療相當，但減輕患者耐藥程度和不良反應效果更好。