多種血清腫瘤標志物聯合檢測在肺癌診斷中的應用研究

杜漢芳,許海軍,林 麗

(十堰市太和醫院：1.檢驗科；2.心內科Ⅱ病區，湖北十堰 442000)

肺癌是臨床常見惡性腫瘤之一，且具有較高的發病率和病死率[1]。另外，近年來，肺癌發病率逐年升高，給患者家庭帶來了極其沉重的負擔[2]。目前，臨床常用的肺癌診斷方法是依靠影像學和病理學檢查，但由于肺癌具有起病隱匿的特點，發病早、中期并無明顯特異性癥狀，所以，患者在確診時往往已到了晚期，甚至已發生轉移，大大降低了療效及患者的生活質量[3-4]。因此，肺癌的早發現、早診斷、早治療顯得尤為重要。本研究通過檢測肺癌患者、良性肺部疾病患者與健康體檢者血清癌胚抗原(CEA)、細胞角蛋白-19片斷抗原(CYFRA21-1)、鱗狀上皮細胞癌抗原(SCC-Ag)、胃泌素釋放肽前體(Pro-GRP)和神經元特異性烯醇化酶(NSE)水平，進而尋找一組能對肺癌早期診斷及療效作出準確判斷的分子學指標，從而為臨床診斷早期肺癌提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年12月至2017年10月本院肺科、腫瘤科收治的肺癌患者120例(肺癌組)、肺部良性病變患者40例(良性肺疾病組)和來本院體檢中心體檢健康者40例(健康對照組)作為研究對象。納入標準：(1)在本院經影像學和病理學檢測確診為肺癌、肺炎、炎性假瘤、肺結核及肺部血管瘤且無心臟、肝臟、腎臟等功能障礙患者；(2)健康對照組研究對象是在本院體檢中心體檢且結果正常無任何部位腫瘤且家族成員無癌癥病史者。肺癌組患者中男69例，女51例；平均(52.3±11.8)歲；鱗癌57例，腺癌39例，小細胞癌24例。良性肺疾病組患者中男23例，女17例；平均(55.1±8.9)歲； 肺炎11例，炎性假瘤9例，肺結核14例，肺部血管瘤6例。健康對照組研究對象中男24例，女16例；平均(52.7±10.2)歲。3組研究對象性別、年齡等一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。本研究經本院倫理委員會同意，患者及家屬自愿簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑 儀器為電化學發光分析儀(羅氏儀器Cobas E601)，試劑為ANAG診斷試劑盒(美國R&De公司)。

1.3檢測方法 采集3組研究對象清晨空腹狀態下靜脈血5 mL，2 500 r/min離心常規分離，分離的血清于-20 ℃冰箱保存待測。CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE采用電化學發光分析法檢測，操作步驟嚴格按試劑盒說明書進行。陽性判定界值：CEA>5.8 ng/mL,CYFRA21-1>3.3 ng/mL,SCC-Ag>1.5 ng/mL,Pro-GRP>78 ng/mL,NSE>16 ng/mL。檢測靈敏度=檢測指標陽性例數/本組研究對象總例數。

2 結 果

2.13組研究對象血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平比較 肺癌組患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平均顯著高于良性肺疾病組和健康對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。良性肺疾病組患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平高于健康對照組，但差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.23組患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE檢測靈敏度比較 肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE檢測靈敏度均顯著高于良性肺疾病組和健康對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。肺癌組患者5種指標聯合檢測的靈敏度顯著高于5種指標的單一檢測。見表2。

表1 3組研究對象血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平比較

注：與肺癌組比較，*P<0.05；與健康對照組比較，#P>0.05

表2 3組患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE檢測靈敏度比較[n(%)]

注：良性肺疾病組與肺癌組比較，#P<0.05；健康對照組與肺癌組比較,△P<0.05

3 討 論

肺癌因其發病率高和病死率增長快等特點已成為威脅人類健康，甚至生命安全的惡性腫瘤之一，近50年來，許多國家肺癌的發病率和病死率均在逐年升高，隨著我國工業化的發展，肺癌發病率在我國男性腫瘤中已高居首位。但由于其發病隱匿、早期發病無癥狀，因此，臨床確診時已到了晚期，錯過了手術及放、化療的最佳時期，嚴重影響了患者的生活質量，且患者的5年生存率不到5.0%[5]。傳統的影像學檢查靈敏度較低，不足以滿足篩查的需求。近年來，血清腫瘤標志物檢測因其快速、方便、靈敏度高且結果穩定等特點在肺癌的早期診斷和治療中受到了重視。有研究顯示，腫瘤標志物的聯合檢測有助于提高肺癌診斷的靈敏度和特異度[6-7]。本研究探討了CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE單一檢測及聯合檢測在肺癌早期診斷和治療中的臨床應用價值。

CEA是一種大腸癌組織產生的單體糖蛋白，廣泛存在于多種腫瘤中，是消化系統癌、乳腺癌及肺癌療效判定和預后估計的一個較好的腫瘤標志物。CEA是一種黏附分子，作用機制是在癌細胞與癌細胞或癌細胞與基質膠原間發揮效應，進而在腫瘤的生長和轉移中具有重要作用[8]。CEA的基因包括2個亞組，其中一個亞組包含CEA及非特異性抗原；另一個亞組包含妊娠特異性抗原，其基因的表達受胚胎細胞有關基因調控。在細胞基因調控障礙導致癌變時CEA的表達量增加[9]。本研究結果顯示，肺癌患者血清CEA水平顯著高于良性肺部疾病患者和健康對照組。

細胞角蛋白19的可溶性片斷CYFRA21-1，是一種酸性蛋白，相對分子質量為30×103，廣泛分布于層狀或鱗狀上皮等正常組織表面，但在惡性的癌組織中CYFRA21-1表達量豐富。CYFRA21-1目前被認為是一種可用于檢測肺癌的腫瘤標記物，尤其在非小細胞肺癌的早期診治中具有重要意義。CYFRA21-1還與腫瘤的臨床分期有關，也可作為肺癌術后或放、化療后早期復發的指標[10]。當影像學檢測肺部有不清晰陰影，且血清CYFRA21-1水平高于正常值時患支氣管肺癌的可能性較高。血清CYFRA21-1水平高可能提示疾病處于進展期或預后不良。但CYFRA21-1陰性也不能排除患肺癌的可能。本研究結果顯示，檢測CYFRA21-1診斷肺癌的靈敏度為74.2%，良性肺疾病組陽性檢出率為12.5%，表明檢測血清CYFRA21-1是臨床診斷的重要輔助手段，而不能作為唯一指標[11-12]。

SCC-Ag是一種糖蛋白，是腫瘤相關抗原TA-4的一個亞型，存在于子宮、子宮頸、肺等鱗狀上皮細胞癌的細胞質中，尤其是在非角化癌的細胞中，表達量更多。有研究表明，SCC-Ag是一種腫瘤標志物，患者病情越嚴重，血清SCC-Ag水平越高[13]。與本研究結果一致。本研究結果顯示，肺癌組患者血清SCC-Ag水平遠高于良性肺疾病組和健康對照組。

Pro-GRP是胃泌素釋放肽的前體，是一種神經肽類激素，其主要存在于腦、胃及嬰兒肺的神經內分泌組織中。GRP是一種胃腸道激素的促分泌素和調節肽。有研究表明，GRP是小細胞肺癌的重要標志物。而Pro-GRP是GRP的前體，血清Pro-GRP水平可間接代表GRP的水平。本研究通過采用電化學發光法檢測肺癌患者血清Pro-GRP水平及陽性檢出率，結果顯示，肺癌組患者血清Pro-GRP水平顯著高于良性肺疾病組和健康對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。

NSE是一種神經元和神經內分泌細胞特有的酸性蛋白酶，高濃度存在于這些細胞及其所引發的腫瘤細胞中。NSE是神經內分泌腫瘤的標志物，可用于鑒別診斷疾病及評價療效[4，14]。本研究結果顯示，肺癌組患者體內NSE高度表達，其血清水平及陽性檢出率均顯著高于良性肺疾病組和健康對照組。

4 結 論

肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平均顯著高于良性肺疾病組及健康對照組。另一方面，5種標志物聯合檢測的靈敏度遠高于單一標志物檢測的靈敏度。CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE 5種標志物的聯合檢測在早期肺癌的臨床診斷中具有重要意義。該聯合檢測方案值得在臨床檢測肺癌中推廣應用。