p-AKT和PI3K與星形細胞瘤患者的臨床病理學特征及預后的關系

付強 ，陳培培，李紹山，劉波，周慶九

(1.新疆醫科大學第一附屬醫院神經外科；2.新疆醫科大學第一附屬醫院臨床營養科，新疆 烏魯木齊 830054)

星形細胞瘤是中樞神經系統最常見的腫瘤，約占神經上皮組織腫瘤的61.4%，此類腫瘤起源于神經上皮組織，屬于膠質瘤的一種，是由星形細胞轉化而來的具有特定形態的腫瘤，多發于大腦半球、小腦、腦干等部位[1]。臨床研究指出，星形細胞瘤具有高侵襲性和浸潤性，手術切除難以根治，復發率較高，其中的膠質母細胞瘤患者生存期均為14個月[2]，因而早期確診及治療對該病具有重要意義。星形細胞瘤傳統病理診斷方式包括影像學、組織病理診斷等，其中影像學難以準確區分低級與高級病變，病理學診斷屬于有創操作，且診斷時間較長，隨著近些年分子生物學的發展，使星形細胞瘤的診斷與預后判斷出現了新的變革[3-4]。磷酸化絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶(p-AKT)在人體腦組織、心臟及肺組織中表達較多，肌酸肌醇3激酶(PI3K)能夠通過激活AKT來達到誘發腫瘤細胞增殖、抑制其凋亡[5]。本文作者通過研究發現，p-AKT、PI3K的高表達與星形細胞瘤患者浸潤深度、TNM分期、腫瘤分化程度、是否出現淋巴轉移及患者生存期間存在相關性，可以通過對p-AKT、PI3K表達的檢測來判斷星形細胞瘤患者預后，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2017年1月于本院進行治療的76例星形細胞瘤患者為研究對象，其中男性35例，女性41例，年齡26～72歲，平均年齡(41.06±1.59)歲，吸煙者36例，不吸煙者40例，TNM分期中I期患者31例，II期22例，III期23例，淋巴結轉移49例，未轉移27例。同時選擇同期來本院體檢的76例健康者的癌旁組織作為對照組，其中男性34例，女性42例，年齡27～74歲，平均年齡(42.12±1.23)歲。納入標準：(1)納入對象均經病理學診斷為星形細胞瘤；(2)病歷資料齊全；(3)未接受放化療治療者；(4)未接受根治術者；(5)經院內委員會批準實施調研；(6)患者及其家屬對本次調研過程、方法、原理清楚明白并簽署知情同意書。

排除標準：(1)合并精神疾患者；(2)合并意識障礙者；(3)合并其他器質性疾病如冠心病、肺炎者；(4)合并凝血功能障礙者；(5)依從性較差者。

1.2 方法

取納入對象星形細胞瘤部位及癌旁組織(距離癌變部位距離>5 cm)樣本，使用10%的甲醛進行固定，而后石蠟包埋制作病理蠟塊，使用蘇木精-伊紅進行染色處理，讀取制作的樣本蠟片，判斷樣本腫瘤類型、分化程度、浸潤深度、是否出現淋巴結轉移等；對制作的癌變部位及癌旁組織的切片進行免疫組化染色，使用光學顯微鏡對染色結果進行觀察，結果由2名經驗豐富的病理科醫生進行讀取，高倍視

野(×400)下隨機選取5個視野，計算染色陽性細胞所占比例：≤10%為0分，11%～25%為1分，25%～50%為2分，>50%為3分；根據其染色強度進行評分：無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，褐色為3分；將兩種分數相乘可以得到最終染色得分，其中p-AKT評分中位數為4分，PI3K評分中位數為6分，得分高于中位數記為高表達，低于中位數記為低表達[6]。

1.3 觀察指標及評測標準

對癌變組織與癌旁組織p-AKT及PI3K表達陽性率進行比對，每次選取5個視野，得分進行平均計算，計算組織表達陽性程度；對癌變組織p-AKT及PI3K表達與癌組織浸潤深度、TNM分期、腫瘤分化程度及是否出現淋巴轉移相關性進行分析；對p-AKT及PI3K表達相關性進行分析；對p-AKT及PI3K表達與患者生存期關系進行分析。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 不同組織p-AKT及PI3K表達差異

經觀察比較，癌旁組織p-AKT及PI3K表達陽性率明顯低于癌變組織，對比差異有統計學意義(P<0.05)，具體數據見表1。

表1 不同組織p-AKT及PI3K表達差異[n(%)]

2.2 癌變組織p-AKT及PI3K表達與其臨床病理關系

經分析對比，發現p-AKT及PI3K表達與患者癌變組織浸潤深度、TNM分期、腫瘤分化程度及是否出現淋巴轉移存在相關性(P<0.05)，具體數據見表2。

2.3 p-AKT及PI3K表達相關性分析

經相關性分析，p-AKT及PI3K的表達存在一定相關性(r=0.694，P=0.015)。

表2 癌變組織p-AKT及PI3K表達與其臨床病理關系

2.4 不同p-AKT及PI3K表達與患者生存期比較

經評估對比，p-AKT高表達組患者的中位生存期為25.39個月，低表達組為33.68個月，兩組比較差異有統計學意義(χ2=3.068，P=0.021)；PI3K高表達組患者的中位生存期為25.33個月，而低表達組中位生存期為26.43個月，兩組比較差異有統計學意義(χ2=2.986，P=0.022)，具體數據見圖1。

3 討論

星形細胞瘤是最常見的神經上皮腫瘤，報道顯示星形細胞瘤的發生率約占顱內腫瘤的13%～26%，占膠質瘤的21.2%～51.6%，星形細胞瘤具有高度的侵襲性，在機體內與正常腦組織的邊界不清，因而手術治療無法完全切除病灶，復發率較高，雖然近些年該病放射治療、化學治療取得了一定進展，但星形細胞瘤患者的中位生存期仍較短[7]。罹患星形細胞瘤的患者多因腫瘤對正常腦組織的擠壓而出現頭痛、嘔吐、運動性肌無力、記憶力減退、意識混亂等癥狀，會嚴重降低患者的生活質量。近些年隨著分子生物學的發展，有研究指出參與正常細胞分裂的一些中心體蛋白在腫瘤細胞中呈現高表達，多數學者分析認為這些蛋白與腫瘤細胞的增殖、侵襲、凋亡等事件具有一定相關性[8-9]，認為可以通過對這些分子的研究來對解釋星形細胞瘤的發生、轉移等過程。

p-AKT及PI3K均屬于PI3K/AKT信號傳導通路中的蛋白因子，該通路近些年是腫瘤研究的熱門通路，已被證實在多種腫瘤組織中存在蛋白表達失調現象。Iuchi等[10]的研究指出，PI3K在星形細胞瘤中存在兩種激活方式，一是與具有磷酸化酪氨酸殘基的生長因子受體或連接蛋白相互作用，進而引發二聚體結構改變，二是直接活化自身，產生PIP3，PIP3與細胞內的AKT和PDK1相結合，進而促使AKT蛋白磷酸化，該機制已被Lastwika等[11]證實與非小細胞癌的發生具有重要關聯，能夠加快多種肺癌細胞的增殖、遷移和血管形成。而Neri Gómez等[12]的研究也指出，AKT是PI3K形成途徑中的重要因子，活化的AKT能夠磷酸化多種細胞激酶，從而起到調節細胞凋亡及蛋白質形成等過程的作用。于震男[13]通過研究指出，p-AKT及PI3K在人腦星形細胞瘤中均呈現過表達狀態，同時與患者的預后存在較為密切的相關性，高表達患者生存時間要顯著低于低表達患者，該學者認為p-AKT及PI3K與星形細胞瘤分化程度具有密切相關性，同時上述因子的高表達也是星形細胞瘤高侵襲性生長的機制之一。馬建功[14]的研究也指出，AKT在星形細胞瘤中呈現高表達狀態，非腦瘤組織中的陽性表達率僅為16.7%，而癌變組織中的表達陽性率高達53.2%，同時星形細胞瘤不同腫瘤分級間的AKT表達陽性率也存在差異，提示AKT與星形細胞瘤TNM分期相關。

本文作者通過設立實驗組與對照組的方式，就p-AKT、PI3K與星形細胞瘤患者的臨床病理學特征及預后的關系進行了探究，結果顯示，星形細胞瘤癌組織中p-AKT及PI3K表達明顯高于癌旁組織，p-AKT及PI3K表達與患者癌組織浸潤深度、TNM分期、腫瘤分化程度及是否出現淋巴轉移存在相關性。本文作者分析認為，其原因為p-AKT及PI3K屬于介導癌細胞增殖、轉移的重要因子，已有多項研究指出，p-AKT及PI3K與諸如肺癌、人支氣管上皮細胞惡變等病理改變相關；此外，AKT還能夠通過磷酸化p53蛋白來抑制細胞凋亡，促進細胞從G1期進展到S期，促進細胞增殖，從而加快癌細胞的轉移[6]。趙軍等[15]的研究也指出，AKT/PI3K轉導通路能夠參與腫瘤血管的形成，增加微血管的形成，因而對腫瘤的增殖也具有促進作用。

總而言之，p-AKT、PI3K的高表達與星形細胞瘤患者浸潤深度、TNM分期、腫瘤分化程度、是否出現淋巴轉移及患者生存期間存在相關性，可以通過對p-AKT、PI3K表達的檢測來判斷星形細胞瘤患者預后。