黃永彬 張財(cái)文 焦?jié)櫧?周海燕 王 松
(安徽科技學(xué)院生命與健康科學(xué)學(xué)院 鳳陽 233100)
魚類在動物進(jìn)化史中占有十分重要的地位,且具有脊椎動物最復(fù)雜的骨骼系統(tǒng),由于魚類的骨骼埋藏在肌肉之中,其形態(tài)與性狀受環(huán)境影響變化較小。因此,在研究魚類的形態(tài)特征、分類及演化等方面具有重要的意義,其骨骼標(biāo)本也為專業(yè)課程教學(xué)中提供了真實(shí)、直觀的形態(tài)學(xué)素材[1]。
大圓顎針魚(Tylosurusgiganteus)屬于顎針魚目顎針魚科,系海洋暖水性上層魚類,分布于西太平洋及印度洋,以及我國的南海和臺灣海峽地區(qū),是世界上目前已知唯一的一類頭骨與脊柱具有翠綠色骨骼的魚類[2]。傳統(tǒng)的骨骼標(biāo)本制作方法,在脫脂和漂白的過程中,其骨骼會褪去翠綠色而變成白色,使標(biāo)本不能真實(shí)地反映該科魚類骨骼的情況。目前對顎針魚科骨骼標(biāo)本的制作尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過對大圓頷針魚骨骼標(biāo)本的制作,使其全部骨骼在不受損傷的情況下清楚地展現(xiàn)出來,特別是其翠綠色的骨骼顏色得以保留。為研究該科魚類的骨骼形態(tài)特征,也為動物學(xué)及魚類學(xué)等教學(xué)提供第一手資料。
1.1 實(shí)驗(yàn)動物 實(shí)驗(yàn)用大圓顎針魚采自福建廈門沿海,體長95~105cm。
1.2 試劑與用品 解剖盤、解剖刀、解剖剪、解剖針、鑷子、標(biāo)本缸、細(xì)線、熱熔膠、銅線、NaOH、 H2O2、二甲苯、丙烯染料。
2.1 魚的挑選 選擇成熟、新鮮完整的大圓顎針魚,冰凍保存。
2.2 剝皮去內(nèi)臟 將實(shí)驗(yàn)用大圓顎針魚取出,流水浸泡至軟化,解剖,去除內(nèi)臟,將眼睛挖出,剝?nèi)テつw,用清水洗凈魚體。
2.3 剔除肌肉 ①將胸鰭、腹鰭、背鰭、臀鰭、尾鰭連同肩帶、腰帶和支鰭骨等分別取下,剔除大塊肌肉;②盡量去除軀干部和尾部的肌肉,并從第2~3節(jié)椎骨處分離頭部與軀干部,用小鑷子深入枕骨大孔將腦髓清除;③大塊肌肉基本剔除干凈后,再用手術(shù)刀和小鑷子仔細(xì)地剔除附在骨骼上的小塊肌肉,細(xì)小的部位可用牙刷,在水中輕輕地刷去肌肉;④沿脊椎方向?qū)⒓怪c肋骨分開,分離每根肋骨,按順序用玻璃板進(jìn)行固定;⑤剔除頭部肌肉時(shí)要格外小心,動作要輕,可配合牙刷輕輕洗刷,因?yàn)轸~類口的部位和眼眶部位的骨骼細(xì)小,以免損傷骨骼,不容易去除的肌肉可以保留,待下一步再進(jìn)行處理。
2.4 脫脂與腐蝕 ①將質(zhì)量濃度為5g/L的洗衣粉水溶液加熱至沸騰,浸入魚頭骨和已經(jīng)剔除大塊肌肉的脊柱骨約1min左右(此過程也有脫脂的作用),當(dāng)觀察到肌肉變軟時(shí)取出,用鑷子和牙刷繼續(xù)去除殘留的肌肉。魚的肋骨和鰭由于骨骼較為柔軟,容易變形,因此不能進(jìn)行水煮;②將頭部,軀干部的骨骼放入盛有1% NaOH溶液的標(biāo)本缸中進(jìn)行腐蝕,處理過程中應(yīng)經(jīng)常觀察標(biāo)本的變化情況,待到殘留肉質(zhì)變成透明狀即可取出,用清水浸洗,再用毛刷刷去殘存的肌肉;魚鰭可單獨(dú)放置于1% NaOH溶液的標(biāo)本缸中腐蝕,肋骨上的肌肉很容易剔除,因此不需要進(jìn)行腐蝕;③腐蝕后的骨骼轉(zhuǎn)入盛有二甲苯溶劑的帶蓋容器中進(jìn)行脫脂,約4~5d后取出,洗凈。
2.5 漂白 ①將脫脂和腐蝕后的骨骼(頭骨、脊柱和鰭等)分別放置于3% H2O2溶液的帶蓋容器中浸泡漂白,約1~2d后取出,清水沖洗干凈,晾干;②由于肋骨數(shù)量較多,細(xì)長而柔軟,為了防止變形和順序混亂,要采用玻璃板固定后再進(jìn)行漂白。取出后洗凈晾干,在植物標(biāo)本夾中墊上幾層吸水紙,將肋骨按順序放入其中夾緊,以固定肋骨的形狀。
2.6 復(fù)色 大圓顎針魚的頭骨與脊柱具有天然的翠綠色,通過以上步驟,顏色基本已經(jīng)褪去,因此還必須進(jìn)行復(fù)色處理。先用丙烯染料進(jìn)行調(diào)色,調(diào)配至與頭骨與脊柱顏色一致的翠綠色,配成1%的溶液。再將頭骨與脊柱骨放入染色約2h后取出,即可恢復(fù)其天然的翠綠色。
2.7 整形裝架 處理后的骨骼經(jīng)過晾干處理后,即可整形裝架。先用銅絲穿過各個(gè)脊椎骨的椎管,固定脊柱。再穿入頭骨,整理好每塊骨骼的形態(tài),用熱熔膠將脫離的骨骼互相連接牢固,把整體連接整形裝架。最后將帶骨和鰭骨擺好位置,進(jìn)行粘貼和固定。等到標(biāo)本完全干燥后,再用白乳膠將骨骼固定一次,標(biāo)本的定型就完成了。
2.8 保色保存 大圓顎針魚脊柱及頭骨大部具有翠綠色,經(jīng)過丙烯染料復(fù)色后極易氧化,因此需等標(biāo)本完全干燥后,立即噴涂多層清漆,以保證骨骼與空氣完全隔絕,達(dá)到長久保存和保色的作用。
魚類骨骼數(shù)量多,容易脫落(特別是肋骨),因此傳統(tǒng)制作骨骼標(biāo)本的方法很容易造成骨骼的散架,脫落和變形,不利于后期的拼接和裝架,而且在脫脂和漂白的過程中,其骨骼會褪去翠綠色而變成白色。本實(shí)驗(yàn)通過以下幾種方法來保持大圓顎針魚骨骼標(biāo)本的完整性和真實(shí)性: ①采用降低濃度和延長時(shí)間對魚體進(jìn)行腐蝕,脫脂和漂白,雖然加長了標(biāo)本制作時(shí)間,但完整地保護(hù)了標(biāo)本的形態(tài)特征;②大圓顎針魚肋骨數(shù)量多,細(xì)長且較為柔軟,很容易變形,因此不能進(jìn)行高溫腐蝕和脫脂,采取2塊玻璃板按順序?qū)⒗吖枪潭ê笤龠M(jìn)行漂白,取出晾干后,立即放入墊有吸水紙的植物標(biāo)本夾中夾緊,以固定肋骨的形狀和順序;③鰭骨也很容易變形,因此也不能進(jìn)行高溫腐蝕和脫脂,只能通過冷剔的方法盡可能剔除肌肉;④頭骨和脊柱采用1%丙烯染料染色的方法,來恢復(fù)大圓顎針魚骨骼的天然翠綠色,復(fù)色后噴上清漆可防止氧化(圖1)。

圖1 大圓顎針魚骨骼標(biāo)本