關(guān)于氨基酸分離的創(chuàng)新層析實(shí)驗(yàn)的探究

朱彩瑜 趙雨彤 劉先俊 朱勇 汪長東

摘要：通過對(duì)創(chuàng)新層析實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析，對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的異常現(xiàn)象的討論，給出了對(duì)該創(chuàng)新層析實(shí)驗(yàn)合理性的評(píng)價(jià)以及提高實(shí)驗(yàn)可行性的相關(guān)建議，可為其他物質(zhì)的分離提供參考。

關(guān)鍵詞：氨基酸；層析；異常現(xiàn)象

中圖分類號(hào)：Q52 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2019）01-0274-05

一、引言

物質(zhì)的分離常用到色譜分析的方法，而以往色譜分析的固定相往往是固定不動(dòng)的，只有流動(dòng)相才會(huì)運(yùn)動(dòng)，如薄層色譜以硅膠、氧化鋁等為固定相，離子交換色譜以離子交換填料為固定相[1-4]。本實(shí)驗(yàn)利用水相與流動(dòng)相流動(dòng)速度的差異作為結(jié)果判斷依據(jù)，采取以流動(dòng)物質(zhì)水為固定相的紙層析法來分離氨基酸。由于濾紙中纖維素分子含大量羥基，因而纖維素也具有硅膠的部分性質(zhì)，其親水性強(qiáng)，能吸收約22%的水分[5]形成流動(dòng)固定相。

運(yùn)用紙層析法分離物質(zhì)，試樣無需經(jīng)過預(yù)處理，方法簡便，儀器廉價(jià)，可用于染料、農(nóng)藥、醫(yī)藥、中草藥等的有效成分的分離分析[5，6]，對(duì)日常生產(chǎn)生活具有深刻的意義。

二、實(shí)驗(yàn)過程

（一）實(shí)驗(yàn)原理

轉(zhuǎn)氨基是氨基酸代謝過程中的一個(gè)重要反應(yīng)。每種轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)均由專一的轉(zhuǎn)氨酶催化，轉(zhuǎn)氨酶廣泛分布于機(jī)體各組織、器官。在轉(zhuǎn)氨酶的催化下，氨基酸的α氨基與α酮酸的α酮基的互換反應(yīng)稱為轉(zhuǎn)氨基作用。

本實(shí)驗(yàn)用紙層析法觀察-酮戊二酸與丙氨酸在肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）催化下的轉(zhuǎn)氨基作用。

實(shí)驗(yàn)分為測(cè)定組與對(duì)照組。測(cè)定組發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，在最后的體系中存在有兩種氨基酸；……