血清VEGF、SAA、hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)對(duì)急性腦梗死的診斷價(jià)值

秦 爽，霍 豆，邢瑞青，張小寧，吳永昌，陳慧昱，彭道榮

(空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究所，陜西西安 710032)

急性腦梗死(ACI)是臨床上一種發(fā)病率和致殘率均較高的疾病之一[1]，且近年來隨著人們生活和飲食習(xí)慣的不規(guī)律性，該病的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)[2]。目前認(rèn)為，ACI的常見病因是動(dòng)脈粥樣硬化，炎性反應(yīng)在其發(fā)生、發(fā)展過程中也起重要作用[3]。早期的炎性反應(yīng)及損傷作用已引起了許多學(xué)者的關(guān)注[4]。血清淀粉樣蛋白A(SAA)主要由肝細(xì)胞合成，是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，研究發(fā)現(xiàn)SAA在腦梗死中有一定的作用，許多腦梗死患者SSA明顯上升[5]。超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)與ACI的密切關(guān)聯(lián)主要體現(xiàn)在發(fā)生炎性反應(yīng)時(shí),hs-CRP通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng),損傷血管內(nèi)膜,導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化,形成腦梗死的危險(xiǎn)因素。因此,hs-CRP不僅是一種炎癥標(biāo)記物,而且在缺血事件的發(fā)生、發(fā)展中,可作為獨(dú)立評(píng)價(jià)指標(biāo)[6]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)也稱血管通透性因子(VPF)或促血管素,它能增加微血管與小靜脈血管的通透性。VEGF能特異的作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞,并促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖[7]。新近研究發(fā)現(xiàn)VEGF與ACI發(fā)生關(guān)系密切[8]。本研究旨在探討ACI 患者血清中VEGF、血清SAA及hs-CRP水平與ACI的關(guān)系及在ACI診斷中的臨床價(jià)值，為本地區(qū)ACI的診治提供新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年8月至2017年10月本院收治的76例ACI患者(ACI組)，男56例，女20例，年齡15～87歲，平均(59.99±15.42)歲。所有患者的臨床診斷均符合全國(guó)第四次腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]，且經(jīng)頭部CT或MRI證實(shí)。另選擇同期在本院進(jìn)行體檢的健康者32例作為對(duì)照組(NC組)，其中男22例，女10例，年齡11～94歲，平均(60.41±17.50)歲。兩組年齡、性別構(gòu)成等比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 采集患者入院第2天清晨空腹肘靜脈血3～5 mL，室溫下待血液自然凝固10 min，3 000 r/min離心20 min，吸取上層血清，凍存于-20 ℃冰箱內(nèi)待測(cè)，保存時(shí)間不超過1個(gè)月。

1.2.2血清SAA、hs-CRP檢測(cè) 應(yīng)用西門子BNⅡ特定蛋白全自動(dòng)免疫分析儀及其配套SAA及hs-CRP檢測(cè)試劑盒，采用散射比濁法進(jìn)行SAA和hs-CRP的檢測(cè)，具體操作嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行。

1.2.3血清VEGF檢測(cè) 應(yīng)用帝肯全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀(Freedom EVOlyzer)及北京建平金星生物科技的VEGF測(cè)定試劑盒，采用雙抗夾心ELISA法進(jìn)行VEGF測(cè)定。VEGF測(cè)定嚴(yán)格按照試劑的操作說明書及儀器的操作規(guī)程進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1ACI組與NC組VEGF、SAA、hs-CRP水平的比較 ACI組VEGF、SAA、hs-CRP水平均高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 ACI組和NC組VEGF、SAA、hs-CRP水平比較±s)

2.2血清VEGF與SAA、hs-CRP水平的相關(guān)性 ACI患者的血清中，VEGF與SAA、hs-CRP水平呈正相關(guān)(r=0.434、0.631，P=0.000、0.000)。

圖1 VEGF的ROC曲線

2.3VEGF、SAA、hs-CRP檢測(cè)對(duì)ACI的診斷價(jià)值評(píng)價(jià) ROC曲線分析結(jié)果顯示，VEGF的AUC明顯大于hs-CRP，更有診斷價(jià)值；VEGF的靈敏度最高，但在特異度方面，與VEGF、SAA均比hs-CRP略差。見圖1～3。VEGF、SAA、hs-CRP的診斷截?cái)帱c(diǎn)和正確診斷指數(shù)見表2。

圖2 SAA的ROC曲線

圖3 hs-CRP的ROC曲線

指標(biāo)AUC95%CI最佳診斷臨界點(diǎn)PVEGF0.8050.722～0.888161.930.000SAA0.6770.576～0.7793.810.004hs-CRP0.6510.549～0.7544.630.013

表4 VEGF、SAA、hs-CRP檢測(cè)對(duì)ACI的診斷價(jià)值

2.4VEGF、SAA、hs-CRP單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)ACI的診斷價(jià)值 單項(xiàng)檢測(cè)中，VEGF的靈敏度最高為93.55%；SAA的特異度最高為93.75%；VEGF、SAA、hs-CRP 3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)靈敏度為100.00%，而特異度僅為62.22%，準(zhǔn)確度為0.62；在2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)中，hs-CRP+VEGF的靈敏度為96.67%，特異度為95.65%，約登指數(shù)達(dá)到0.92，優(yōu)于其他2項(xiàng)及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)。見表4。

3 討 論

VEGF是一種特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的多功能細(xì)胞因子，與腦血管病發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[10-12]。VEGF與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的特異性受體F1t-1和Flk-1結(jié)合，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生類似于凝血酶、組織胺等激發(fā)劑的作用，可增加血管的通透性，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)多種活性物質(zhì)及細(xì)胞因子、組織因子等的釋放，改變細(xì)胞外基質(zhì)，有利于血內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)刺激和趨化作用，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的分裂、增殖、遷移和細(xì)胞間的相互粘連，有利于新血管特別是微血管的生成和側(cè)支循環(huán)的建立，使血流迅速恢復(fù)，阻止組織的缺血和壞死，并縮小缺血區(qū)域[13]。本研究結(jié)果顯示，ACI組患者血清 VEGF水平均較NC組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表明在腦組織中,VEGF由神經(jīng)元和血管細(xì)胞產(chǎn)生并作用于自身,介導(dǎo)神經(jīng)修復(fù)和血管再生[14-16]。

SAA是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在預(yù)防機(jī)體或組織氧化損傷方面發(fā)揮著一定的功效[17]。近年來有學(xué)者在對(duì)腦梗死患者進(jìn)行血清SAA的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，缺血性卒中組患者SAA水平較對(duì)照組高，且高水平風(fēng)險(xiǎn)明顯比低水平風(fēng)險(xiǎn)高，提示SAA能夠獨(dú)立預(yù)測(cè)缺血性卒中的發(fā)生[18]。本研究結(jié)果顯示，ACI組患者的SAA水平顯著高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，與上述研究相符，證實(shí)SAA具有預(yù)測(cè)腦梗死發(fā)生的作用。另有學(xué)者在對(duì)進(jìn)展ACI患者進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，SAA水平與患者病情的輕重及治療療效相關(guān)[19]。

hs-CRP可與脂蛋白結(jié)合,由經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng),產(chǎn)生大量的終末攻擊復(fù)合物和終末蛋白C5b-9,造成血管內(nèi)膜損傷,使氧自由基大量釋放,引起血管痙攣、脂質(zhì)代謝異常,導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)一步加重。有研究表明，動(dòng)脈粥樣硬化的早期斑塊中沉積了大量的hs-CRP[20]，而hs-CRP為作為一種重要的炎癥因子多用于診斷急性炎癥，這提示炎癥介質(zhì)在動(dòng)脈粥樣硬化形成中的重要地位。本研究結(jié)果顯示，ACI組患者的hs-CRP水平顯著高于NC組，且VEGF與hs-CRP呈高度正相關(guān)。因此，推斷二者之間可能存在某種相互促進(jìn)的機(jī)制，是ACI發(fā)生、發(fā)展的重要因素。

本研究中，VEGF的Pearson單因素分析結(jié)果顯示，VEGF與hs-CRP呈高度正相關(guān)，與SAA呈中度正相關(guān)。ROC曲線分析結(jié)果顯示，VEGF曲線AUC在三者中最大，最具診斷意義，靈敏度較SAA和hs-CRP高，特異度低于二者。本研究還發(fā)現(xiàn)，單一的指標(biāo)檢測(cè)都有其一定缺陷，靈敏度高的特異度差(VEGF)，特異度高的靈敏度低(SAA、hs-CRP)，而約登指數(shù)均低于0.65，容易造成漏診和誤診，一旦延誤病情，對(duì)患者造成的危害巨大。通過聯(lián)合檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，VEGF、SAA、hs-CRP在診斷ACI中的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值，除SAA+hs-CRP靈敏度較單一指標(biāo)略降，VEGF靈敏度單一指標(biāo)略優(yōu)于SAA+VEGF外，其他聯(lián)合均較單一指標(biāo)有所提高，彌補(bǔ)了單一指標(biāo)檢測(cè)的不足。但聯(lián)合檢測(cè)有利、有弊，并非檢測(cè)的指標(biāo)越多越好，指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的最大意義在于增加了ACI的檢出線索，為進(jìn)一步明確診斷提供參考方向或?yàn)橹委熖峁┯行侄?，但在提高陽性率的同時(shí)也增加了假陽性的概率，因此，需要尋找最佳組合來提高檢出率和降低患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。為了更好地評(píng)價(jià)聯(lián)合檢測(cè)的準(zhǔn)確度，本研究使用約登指數(shù)進(jìn)行評(píng)判。SAA+hs-CRP+VEGF 3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)雖然提高了靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值，但是特異度和陽性預(yù)測(cè)值都大幅降低，約登指數(shù)較SAA+VEGF和VEGF+CRP聯(lián)合降低了0.26和0.30。因此，聯(lián)合檢測(cè)的項(xiàng)目并不是越多越好。hs-CRP+VEGF是所有聯(lián)合檢測(cè)中最優(yōu)的，hs-CRP+VEGF聯(lián)合檢測(cè)可為ACI的診斷提供重要的參考價(jià)值，具有重要的實(shí)用意義。

4 結(jié) 論

VEGF、SAA、hs-CRP在ACI血清中升高，其表達(dá)對(duì)于ACI 的診斷具有重要的價(jià)值。VEGF與SAA、hs-CRP呈正相關(guān)。三者均參與了ACI的病理過程，在ACI的發(fā)生、發(fā)展及療效觀察中具有重要作用。ACI患者血清VEGF和hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)有著很好的臨床應(yīng)用價(jià)值和效果，可以作為臨床中診斷ACI的一個(gè)重要方案。