飼養密度對肉雞生長性能、抗氧化能力和免疫功能的影響

賀衛華，翟曉虎，汪春雪，姚大偉

現代家禽業越來越重視對環境的控制，飼養密度是最重要的環境因素之一。雖然前人對飼養密度的研究很多，但結果卻不盡相同。大多數研究只比較了2～3水平的飼養密度。Zhang等（2017）認為，提高飼養密度會對肉雞生長性能產生有害影響，且隨著飼養密度的增加，體重、采食量和飼料轉化率下降。但在家禽實際生產過程，盡管高飼養密度會導致肉雞生長性能下降，但由于每平方米肉雞重量增加，最終利潤也會增加。Martrenchar等（2000）指出，11只和 22只 /m2的飼養密度在體重上有輕微差異，在飼料轉化率和胴體性能上沒有顯著差異。同時，飼養密度高可能對肉雞健康有害，在亞臨床實驗模型中，高飼養密度可能損害肉雞福利和腸道健康，導致壞死性腸炎易感性增加（Tsiouris等，2015）。此外，飼養密度過高可能也會導致一些應激。近年來，肉用雞生產趨于專業化，稻殼作為墊料飼養黃羽肉雞是一種常見飼養方法。因此，本試驗旨在評價5種不同飼養密度對嶺南黃羽肉雞生長性能、抗氧化能力、應激和免疫狀況的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與處理 試驗選擇1日齡嶺南黃羽肉雞1440只，隨機分為5組，每組3個重復，每個重復96只。雞只被飼養在15個混凝土地板房間，地面鋪有6 cm厚度的稻殼。5個處理的飼養密度分別為 8、10、12、14和 16只 /m2。在試驗期間，肉雞自由采食和飲水，所有房間都在25℃環境控制下，相對濕度保持在（55±5）%并提供連續照明。各階段日糧組成及營養水平見表1。

1.2 樣品采集與處理 在50 d時，從每個處理中隨機選擇12只肉雞，屠宰前12 h禁食，立即翅下靜脈采血5 mL，置于凝血管中，3000/min，4℃離心10 min，分離血清。然后將雞只屠宰收集肝臟，所有樣品均直接冷凍于液氮中，并保存于-80℃進行進一步分析。

表1 各階段日糧組成及營養水平

1.3 指標分析 第21和50天稱量體重，每周統計飼料用量，以此來計算平均日增重、平均日采食量和飼料增重比。采用商品試劑盒測定肝臟和血清生化指標。肝臟用生理鹽水制備10%勻漿，測定血清和肝臟超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、過氧化氫酶（CAT）活性及脂質過氧化產物丙二醛（MDA）的含量。

應激參數測定試劑盒購自南京建城生物工程研究生，檢測血清肌酸激酶（CK）活性、皮質酮、熱休克蛋白70含量。同時用細胞因子試劑盒分析血清白細胞介素（IL）-4、10和-1β含量。

1.4 統計分析 本試驗采用SPSS軟件單因素方差分析（one-way ANOVA），用曲線擬合（二次曲線回歸）對數據進行統計分析。采用Ducan’s多量程檢驗比較處理間的顯著性差異，P＜0.05為顯著性差異，所有結果均用“均數±標準誤”表示。

2 結果與分析

2.1 飼養密度對肉雞生長性能的影響 由表2可知，飼養密度為8、10只/m2組肉雞的平均日采食量顯著高于飼養密度為12、14、16只/m2組（P＜0.05）。與此同時，不同飼養密度對肉雞的日增重和料重比影響無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 飼養密度對肉雞血清應激狀態和血清、肝臟抗氧化指標的影響 由表3可知，飼養密度為10只/m2組熱休克蛋白70水平顯著低于飼養密度為14只/m2組（P＜0.05），其中飼養密度為16只/m2組血清熱休克蛋白70水平最高（P＜0.05）。不同飼養密度組間肌酸激酶活性和皮質酮濃度無顯著差異（P＞0.05）。

在血清和肝臟中，總抗氧化力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化物酶（CAT）水平在不同的飼養密度之間存在顯著差異，其中飼養密度為16只/m2組血清T-AOC和SOD活力最低（P＜0.05），而飼養密度為10和12只/m2組的CAT活力顯著高于飼養密度為14和16只/m2（P＜0.05）。在肝臟中，飼養密度為8只/m2組T-AOC活力顯著高于飼養密度為12、14、16只/m2組（P＜0.05），飼養密度10只/m2組CAT活力顯著高于飼養密度為14、16只/m2組（P＜0.05）。飼養密度為10只/m2組肝臟SOD活性最高（P＜ 0.05）。

表2 飼養密度（只/m2）對肉雞生長性能的影響

2.3 飼養密度對肉雞血清免疫指標的影響 如表4所示，隨著飼養密度從8～10只/m2增加到16只/m2，白細胞介紹-4（IL-4）濃度顯著升高（P＜0.05），而IL-10濃度無顯著變化（P＞0.05）。與飼養密度為8、10和12只/m2組相比，飼養密度為16只/m2組IL-1β濃度顯著升高（P＜0.05）。

3 討論

3.1 生長性能 本試驗結果表明，隨著飼養密度的增加，肉雞平均日采食量呈下降趨勢，相反，Yin等（2017）研究表明，整個試驗期間，飼養密度對鵝平均日采食量無顯著影響，造成這種差異的原因可能是家禽種類或飼養條件不同。此外，不同的飼養密度對肉雞平均日增重和料重比無顯著影響，這與Rambau等（2016）的研究結果一致，其認為因為日增重在35～42 d無顯著變化，而本試驗結果顯示，無論飼養密度的高低，日增重和料重比在短期內都有相對穩定的值。

3.2 應激狀態 Soleimani等（2012）認為，生物體產生一組被稱為熱休克的高度保守的蛋白質，對熱應激和非熱應激做出反應。本試驗結果顯示，飼養密度為16只/m2組HSP70濃度最高。生理應激（飼料限量、熱應激和藥物注射）和心理應激（個體隔離）均顯著誘導HSP70在血清中的表達。較高的飼養密度作為應激源之一可能在HSP70的升高中發揮重要作用，提示機體處于高應激水平。同時，HSP70似乎參與保護細胞因子、缺血、細胞因子和能量消耗相關的細胞損傷（Soleimani等，2012），這意味著高飼養密度導致的高HSP70水平在一定程度上可以保護肉雞免受這種應激帶來的負面影響。

表3 飼養密度（只/m2）對肉雞血清應激狀態和血清、肝臟抗氧化指標的影響

表4 飼養密度（只/m2）對肉雞血清免疫指標的影響

3.3 抗氧化和免疫狀態 高飼養密度引起的應激也影響肉雞抗氧化能力，但對上述機理的研究很少。當飼養密度達到一定水平時，過度擁擠可能會導致T-AOC、SOD和CAT水平變化，如飼養密度為12只/m2以下肉雞肝臟中的T-AOC濃度降低。盡管如此，低放養密度為8或10只/m2并不是總能誘導最高的酶活性，正如本文SOD的結果所示。總的來說，這3個參數在8和10只/m2的飼養密度之間沒有顯著差異。MDA是脂質過氧化的主要產物，用于測定氧化損傷。本研究中，血清和肝臟中MDA含量和GSH- Px活性與飼養密度無顯著相關性，說明飼養環境過度擁擠并不影響血清中MDA含量和GSH-Px活性。Jang等（2014）在肝臟中發現，高飼養密度組SOD、CAT和GSH-Px mRNA表達顯著增加，結果顯示，肝臟健康與抗氧化狀態之間的關系，這與本研究結果一致。

眾所周知，免疫細胞會受到應激的影響，應激會導致細胞因子的持續產生。IL-1促進炎癥的發生，IL-4和IL-10抑制炎癥的發生。Appels等（2000）研究表明，IL-1在身體處于應激下時持續分泌。本研究中血清IL-1為主要成分，IL-1β和IL-4隨著飼養密度的增加而增加。與本研究結果相反，一些研究人員發現，應激不一定會導致細胞因子水平升高。Jang等（2014）發現，脾臟促炎細胞因子的表達不受飼養密度的影響。但分泌細胞因子是一個持續的過程，在多個組織中發生，因此血清IL-1β和IL-4濃度隨飼養密度的增加而增加。高密度飼養使肉雞處于亞健康狀態，并改變其免疫和抗氧化水平。但這并不一定導致器官指數的顯著變化。在火雞上的研究表明，飼養密度為18只/m2組異嗜細胞與淋巴細胞比值和緊張性靜止持續時間高于12只/m2（Uzum和Toplu，2013）。

4 結論

綜上所述，本研究結果表明，在有稻殼粉作為墊料的地板上飼養肉雞的密度應保持在8～10只/m2，以防止飼養密度過高帶來的負面影響。