朱砂安神丸拮抗大鼠條件性恐懼及其睡眠障礙作用的研究

趙航 李廷利

(黑龍江省中醫藥大學藥學院，哈爾濱，150040)

本項實驗研究主要探究朱砂安神丸拮抗大鼠條件性恐懼及其睡眠障礙的作用。現將方法及結果介紹如下。

1 研究方法

1.1 條件性恐懼大鼠的覺醒-睡眠時間及睡眠時相的變化

1.1.1 大鼠條件性恐懼習得記憶的模型復制 選取雄性SD大鼠20只，適應7 d后，隨機分成空白組及模型組，每組10只。模型組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。然后于模型復制次日，再次將2組實驗動物放入條件性恐懼刺激箱中，只給予聲信號而不給予足底電刺激，進行條件性恐懼習得測試，以70 s為周期，連續記錄5個周期內2組實驗動物的僵直反應時間。

1.1.2 大鼠條件性恐懼記憶消退模型的復制 選取雄性SD大鼠20只，適應7 d后，隨機分成空白組及模型組，每組10只。隨后模型組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。于模型復制次日，再次將2組實驗動物依次放入條件性恐懼刺激箱中，進行條件性恐懼消退，1次/d，連續6 d。記錄2組實驗動物的僵直反應時間。

1.1.3 大鼠條件性恐懼習得過程中覺醒-睡眠時間及睡眠時相的變化 選取雄性SD大鼠20只，適應7 d后，隨機分成空白組及模型組，每組10只。2組實驗動物分別在麻醉和腦立體定位儀的條件下，進行皮層腦電與肌電電極的埋置，術后恢復7 d。隨后模型組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。模型復制后，將2組實驗動物分別置于腦電描記室中，連續24 h記錄皮層腦電。以4 h為1個周期進行統計分析。

1.1.4 大鼠條件性恐懼消退過程中覺醒-睡眠時間及睡眠時相的變化 選取雄性SD大鼠20只，適應7 d后，隨機分成空白組及模型組，每組10只。2組實驗動物分別在麻醉和腦立體定位儀的條件下，進行皮層腦電與肌電電極的埋置，術后恢復7 d。隨后模型組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。于模型復制次日再次將2組實驗動物放入條件性恐懼刺激箱中，進行條件性恐懼消退，1次/d，連續6 d。每次消退結束后，將2組實驗動物分別置于腦電描記室中，連續12 h記錄皮層腦電。以4 h為1個周期進行統計分析。

2 朱砂安神丸拮抗大鼠條件性恐懼及其睡眠障礙作用的研究

2.1 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼習得記憶的影響 選取雄性SD大鼠30只，適應7 d后，隨機分成空白組、模型組和給藥組，每組10只。給藥組實驗動物給予朱砂安神丸混懸液(經灌胃給予，0.81 g/kg)。空白組、模型組實驗動物給予等體積的1%CMC，1次/d，連續7 d。末次給藥后，模型組、給藥組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。于模型復制次日進行恐懼習得測試。以70 s為1個周期，連續記錄5個周期內2組實驗動物的僵直反應時間。

2.2 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼記憶消退的影響 選取雄性SD大鼠30只，適應7 d后，隨機分成空白組、模型組及給藥組，每組10只。隨后模型組、給藥組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。于模型復制次日，進行實驗動物給藥。給藥組實驗動物給予朱砂安神丸混懸液(經灌胃給予，0.81 g/kg)。空白組、模型組實驗動物給予等體積的1%CMC，1次/d，連續6 d。每次給藥后，將各組實驗動物進行條件性恐懼消退。記錄各組實驗動物的僵直反應時間。

2.3 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼習得過程覺醒-睡眠時間及睡眠時相的影響 選取雄性SD大鼠30只，適應7 d后，隨機分成空白組、模型組與給藥組。每組10只。3組實驗動物分別在麻醉和腦立體定位儀的條件下，進行皮層腦電與肌電電極的埋置，術后恢復7 d。隨后進行實驗動物給藥，給藥方法如上述“朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼習得記憶的影響”。末次給藥后，模型組、給藥組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。模型復制后，將2組實驗動物分別置于腦電描記室中，連續24 h記錄皮層腦電。以4 h為1個周期進行統計分析。

2.4 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼記憶消退過程中覺醒-睡眠時間及睡眠時相的影響 選取雄性SD大鼠30只，適應7 d后隨機分成空白組、模型組及給藥組，每組10只。各組實驗動物分別在麻醉和腦立體定位儀的條件下，進行皮層腦電與肌電電極的埋置，術后恢復7 d。隨后模型組、給藥組進行條件性恐懼模型的復制，空白組只給予聲信號。模型復制次日進行實驗動物給藥，給藥方法如上述“朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼消退記憶的影響”。每次給藥結束后將各組實驗動物依次放入條件性恐懼刺激箱中，重復恐懼習得測試操作。每次恐懼消退結束后將各組實驗動物分別置于腦電描記室中，連續12 h記錄皮層腦電。

3 結果

3.1 條件性恐懼大鼠的覺醒-睡眠時間及睡眠時相的變化

3.1.1 大鼠條件性恐懼習得記憶的模型復制 實驗結果表明：與空白組實驗動物比較，模型組實驗動物在條件性恐懼習得過程中，第1～5個周期內僵直反應時間明顯增加，差異有統計學意義(P<0.01)。

3.1.2 大鼠條件性恐懼記憶消退模型的復制 實驗結果表明：在條件性恐懼消退階段，各組實驗動物僵直反應時間隨消退時間增加而逐漸減少；與空白組實驗動物比較，模型組實驗動物在第2～5天的僵直反應時間增加，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。

3.1.3 大鼠條件性恐懼習得過程中覺醒-睡眠時間及睡眠時相的變化 實驗結果表明：與空白組實驗動物比較，模型組實驗動物在條件性恐懼刺激結束后第1～3個周期內，Wake時間延長，百分比增加比較，差異有統計學意義(P<0.05)；睡眠總時間延長，百分比降低，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS和NREM時間縮短，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS與NREM的睡眠時間百分比無明顯變化。

3.1.4 大鼠條件性恐懼消退過程中覺醒-睡眠時間及睡眠時相的變化 實驗結果表明：與空白組比較，模型組實驗動物在第2～5天，Wake時間延長，百分比增加，差異有統計學意義(P<0.05)；睡眠總時間縮短，百分比降低比較，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS時間縮短，差異有統計學意義(P<0.05)；NREM時間縮短，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS與NREM的睡眠時間百分比無明顯變化。

3.2 朱砂安神丸拮抗大鼠條件性恐懼及其睡眠障礙作用的研究

3.2.1 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼習得記憶的影響 實驗結果表明：與空白組比較，模型組及給藥組實驗動物在條件性恐懼習得的過程中，第1～5個周期內僵直反應時間明顯高于空白組(P<0.01)；與模型組比較，給藥組實驗動物在第1～5個周期內的僵直反應時間無差異。

3.2.2 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼記憶消退的影響 實驗結果表明：在條件性恐懼消退階段，各組實驗動物僵直反應時間隨消退時間增加而逐漸減少；與空白組比較，模型組實驗動物在消退第2～5天的僵直反應時間增加，差異有統計學意義(P<0.05)；與模型組比較，給藥組實驗動物在第4天和第5天的僵直反應時間降低，差異有統計學意義(P<0.05)。

3.2.3 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼習得過程覺醒-睡眠時間及睡眠時相的影響 實驗結果表明：與空白組比較，模型組實驗動物在第1～3個周期，Wake時間延長，百分比增加，差異有統計學意義(P<0.05)；睡眠總時間縮短，百分比降低，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS時間縮短，差異有統計學意義(P<0.05)；NREM時間縮短，差異有統計學意義(P<0.05)，REMS與NREM的睡眠時間百分比無明顯變化。與模型組實驗動物比較，給藥組實驗動物在第1個周期和第2個周期Wake時間縮短，百分比降低，差異有統計學意義(P<0.05)；第1～3個周期內睡眠總時間延長，百分比增加，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS時間延長，差異有統計學意義(P<0.05)；NREM時間延長，差異無統計學意義；REMS與NREM的睡眠時間百分比無明顯變化。

3.2.4 朱砂安神丸對大鼠條件性恐懼記憶消退過程中覺醒-睡眠時間及睡眠時相的影響 實驗結果表明：與空白組比較，模型組實驗動物在第2～5天，Wake時間延長，百分比增加，差異有統計學意義(P<0.05)；睡眠總時間延長，百分比降低，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS時間縮短，差異有統計學意義(P<0.05)；NREM時間縮短，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS與NREM的睡眠時間百分比無明顯變化。與模型組比較，給藥組實驗動物在第4天和第5天Wake時間縮短，百分比降低，差異有統計學意義(P<0.05)；睡眠總時間延長，百分比增加，差異有統計學意義(P<0.05)；NREM時間增加，差異有統計學意義(P<0.05)。第4天REM時間增加，差異有統計學意義(P<0.05)；REMS與NREM的睡眠時間百分比無明顯變化。

4 結論

條件性恐懼能夠引起覺醒時間延長，睡眠時間縮短而對REM及NREM的睡眠比例無影響；朱砂安神丸能夠促進條件性恐懼消退；朱砂安神丸能夠拮抗由條件性恐懼引起的睡眠障礙。