高效液相色譜法在畜產品檢測中的應用微探

秦 娜 寇秋霜 馬超越 關婷婷

(1.焦作市畜產品質量安全監測中心,河南焦作 454003;2.焦作市動物衛生監督所,河南焦作 454003)

1 高效液相色譜法概述

高效液相色譜法作為畜產品安全檢測的重要分析方法，需要在高壓條件下進行樣品檢測，使樣品組分在固定相和流動相間多次連續分配，從而利用兩相的不同分配系數和吸附力實現樣品分離。作為化學分離分析方法的一種，高效液相色譜法具有較高分析速度，能夠實現自動化操作，結果的靈敏度較高。

2 高效液相色譜法在畜產品檢測中的應用

2.1 在獸藥殘留檢測中的應用

未能科學飼養畜禽，將導致獸藥使用量超出需求量，不僅無法改善畜產品品質和預防動物疾病，還將造成畜產品中殘留過多未能代謝的藥物及其代謝中間產物，經人體食用后將給消費者身體健康帶來較大危害。按照國家標準SN/T 1751.3-2011，需要采用高效液相色譜法完成動物源性食品中喹諾酮類藥物殘留檢測[1]。在四環素類獸藥檢測上，可以聯合采用高效液相色譜法與質譜法。目前在豬肉、雞肉、雞蛋等畜產品獸藥殘留檢測中，都可以采用高效液相色譜法，如在雞肉中四環素類抗生素檢測上，可以采用乙腈和磷酸二氫鈉溶液作為流動相，利用前超聲波脫氣，能夠快速完成獸藥殘留檢測，并且檢測結果可靠、準確性高。在家禽寄生蟲病防治上，常采用伊維菌素，屬于廣譜抗寄生蟲藥。對動物血清中的伊維菌素進行測定，可以采用245nm紫外檢測波長，配合采用甲醇一水流動相，方法檢出限最低能夠達到0.01mg/L，樣品回收率在94%-100%之間。

2.2 在違禁物檢測中的應用

為謀取暴利，畜產品中也會被加入“瘦肉精”、“蘇丹紅”等違禁物。而食用大量殘留在畜產品中的“瘦肉精”，將導致人出現惡心、心慌等癥狀，患有甲亢、高血壓等疾病的人甚至會引發疾病，嚴重時將導致人死亡。“瘦肉精”實際為羥甲叔丁腎上腺素，在飼料中添加能夠加速動物生長，促使動物肌體瘦肉率得到提高，在動物內臟和組織中會發生蓄積性殘留，帶有嚴重毒副作用。應用高效液相色譜法進行豬肉中“瘦肉精”的檢測，可以采用磷酸二氫鈉和甲醇作為流動相，并且使用紫外線檢測器進行檢測，只需較短時間就能完成樣品檢測[2]。在可食用性動物產品進出口方面，將呋喃唑酮列為禁用藥，因為該種物質具有較強致癌性。在雞蛋中呋喃唑酮檢測上，應用基體固相擴散和固相萃取技術完成呋喃唑酮提取和凈化后，可以利用高效液相色譜法實現分離檢測，回收率能夠達到80%-91%，結果具有良好重現性。

2.3 在農藥殘留檢測中的應用

在畜禽養殖期間，殘留農藥將通過植物果實、水等途徑到達畜禽體內，超出一定量后將在畜產品中蓄積，被人食用后容易誘發糖尿病、心腦血管疾病等各種疾病。從畜產品檢測情況來看，可能殘留的農藥包含擬除蟲菊酯、有機磷等多種，可以采用高效液相色譜法進行檢測。在有機磷農藥檢測上，相較于傳統的氣相色譜法，高效液相色譜法能夠使樣品熱不穩定問題得到解決，檢測結果精密度高，并且擁有較好重復性。在擬除蟲菊酯農藥殘留檢測上，常用靈敏度較高的氣相色譜-質譜法，但衍生試劑擁有較大毒性，并且過程繁瑣。采用高效液相色譜法，可以利用固相萃取技術完成樣品萃取，然后利用Zorbox SB C18色譜柱進行分離檢測，方法檢出限能夠達到0.78μg/ml，在畜產品農藥殘留檢測中應用可以降低技術成本。但從總體來看，高效液相色譜法多與氣相色譜法及質譜法聯合使用，能夠一次完成數百種殘留農藥的檢測。

2.4 在有害物質檢測中的應用

在畜產品加工期間，可能引入有害的外源性物質，并且產品本身可能存在生物毒素，如黃曲霉毒素等，從而給產品安全帶來威脅。針對外源性物質進行檢測，采用高效液相色譜法能夠完成肉鴨加工表皮殘留松香的檢測，先利用固相萃取法完成樣品純化和富集，然后將縱酸當成是標記物，利用薄層色譜法完成松香殘留物檢測，處理過程相對復雜。在黃曲霉毒素檢測中，可以利用流動相實現甲醇一水提取液凈化處理，樣品回收率能夠達到80%以上，因此相較于商業檢測方法費用更低。在霉菌霉素檢測中，可以采用高效液相色譜法與質譜聯用方式，具有較高的檢測靈敏度。實際在方法應用過程中，需要結合生物毒素樣品特征進行適合前處理方法的選擇，聯合采用高效液相色譜法和質譜法能夠使基質復雜、存在污染物干擾等問題得到解決，因此更能在畜產品毒素檢測中適用。

3 結論

綜上所述，在畜產品安全檢測方面，高效液相色譜法能夠在獸藥殘留檢測、違禁物檢測等多個領域得到應用。但在實際應用過程中，還應結合樣品前處理需求進行方法的科學應用，必要時聯合采用其他檢測技術，以便高效、科學的開展畜產品檢測工作。