超聲造影參數與甲狀腺癌患者腫瘤惡性程度的關系

沈紅梅 魏立爽 李璐

(延邊大學附屬醫院超聲科，吉林 延吉 133000)

甲狀腺結節是甲狀腺最常見的疾病之一，隨著我國居民生活水平不斷升高及飲食結構逐漸改變，甲狀腺結節的發病率呈逐年升高趨勢，已成為困擾我國居民健康的重要問題之一〔1〕。早期對甲狀腺結節的良惡性進行有效鑒別，有利于為臨床治療方案的制定提供指導，對改善患者預后具有極其重要的意義〔2〕。迄今為止，病理組織活檢是國內外公認的甲狀腺結節診斷“金標準”，但該診斷方式會對患者造成一定程度的創傷，患者依從性較低，存在一定的局限性。二維超聲是目前臨床上用以篩查甲狀腺結節的最常見方式，可較清晰地反映甲狀腺結節的數量、部位及其與周邊組織的關系等情況，然而在結節良惡性鑒別中敏感性較低，存在較高的漏診率與誤診率〔3〕。目前，超聲造影技術已被廣泛應用于腹腔實質性臟器疾病的鑒別及輔助診斷中，且效果顯著，可實時評估目標組織器官的血流情況，并以此反映組織器官的功能狀態及性質〔4〕。本研究擬分析超聲造影參數與甲狀腺癌患者惡性程度的關系，旨在為臨床甲狀腺結節良惡性的鑒別診斷提供一種有效的手段。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年2月至2018年2月遼寧大學附屬醫院收治的甲狀腺癌患者79例作為研究組。另取同期接受治療的甲狀腺腺瘤患者80例作為對照組。研究組男45例，女34例，年齡45～79歲，平均(57.23±5.62)歲。對照組男47例，女33例，年齡42～79歲，平均(57.29±5.64)歲。兩組上述各項指標對比差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。納入標準〔5〕：(1)所有患者經手術病理組織活檢確診；(2)入院前均未接受過相關抗腫瘤治療及甲狀腺超聲造影檢查；(3)臨床病歷資料完整。排除標準：(1)既往有甲狀腺手術史者；(2)伴有頸部局部或全身感染性疾病者；(3)合并心、肝、腎等臟器功能嚴重受損者；(4)合并其他惡性腫瘤疾病者；(5)存在交流溝通障礙或精神疾病者；(6)正參與其他研究者；(7)妊娠期或哺乳期女性。所有患者知情同意，且醫院倫理委員會予以批準。

1.2研究方法

1.2.1甲狀腺結節超聲造影檢查〔6〕首先采用灰階超聲對病灶進行常規檢查，然后切換為CPS噪音模式，聚焦在病灶以下水平。選擇肘靜脈，以21G套管針穿刺建立靜脈通路，注入2.5 ml的造影劑，隨后采用5 ml 0.9%的氯化鈉溶液沖管。選取病灶內強化最顯著的區域為感興趣區，定量分析并獲得相關參數水平，主要包括峰值強度(PI)、達峰時間(TIP)及平均通過時間(MTT)。

1.2.2采用PCR法檢測甲狀腺組織增殖基因、侵襲基因的表達水平 采集術中腫瘤組織標本，利用Trizol試劑對細胞進行裂解，加入0.2 ml氯仿高速離心，取上層澄清液進行檢測。首先加入相同體積的異丙醇沉淀RNA膠裝塊并予以清洗、干燥處理，明確RNA的純度與濃度，以反轉錄試劑盒合成獲取cDNA，最后以熒光定量PCR試劑盒對增殖基因、侵襲基因進行擴增。其中增殖基因主要包括程序性細胞死亡因子(PDCD)4，靶向Xklp2靶蛋白(TPX2)、蛋白磷酸酶4調節亞基(PP4R)1；侵襲基因包括解聚素金屬蛋白酶(ADAM)9，Bcl-6共抑制因子樣蛋白(BCORL)1，腫瘤抑癌基因(ST)7L，趨化因子受體(CXCR)4。獲取計算機軟件中的PCR擴增曲線，并計算上述目的基因的mRNA表達量。

1.3統計學方法 采用SPSS20.0軟件，計數數據行χ2檢驗。計量數據行t檢驗。超聲造影參數與甲狀腺癌患者增殖基因、侵襲基因的關系予以Pearson相關性分析。

2 結 果

2.1兩組超聲造影參數水平對比 研究組PI、TTP、MTT水平比對照組顯著降低(均P<0.05)，見表1。

表1 兩組超聲造影參數水平對比

2.2兩組增殖基因表達水平對比 研究組PDCD4、PP4R1基因表達水平比對照組顯著降低，而TPX2基因表達水平比對照組顯著升高(均P<0.001)，見表2。

2.3兩組侵襲基因表達水平對比 研究組ADAM9、BCORL1、CXCR4基因表達水平比對照組明顯升高，而ST7L基因表達水平比對照組顯著降低(均P<0.001)，見表2。

2.4甲狀腺癌患者超聲造影參數與增殖、侵襲基因的相關性分析 甲狀腺癌患者PI、TTP、MTT與PDCD4、PP4R1、ST7L基因表達水平均呈正相關關系，而與TPX2、ADAM9、BCORL1、CXCR4基因表達水平呈負相關關系(均P<0.001)，見表3。

表2 兩組增殖基因、侵襲基因表達水平對比

表3 甲狀腺癌患者超聲造影參數與增殖、侵襲基因的相關性分析

3 討 論

二維超聲是臨床上首選的篩查甲狀腺結節的影像學手段，但由于部分惡性結節的超聲表現較為復雜，往往存在一定的交叉、重疊等，從而導致假陽性或假陰性的發生〔7～9〕。超聲造影是繼二維超聲及彩色多普勒超聲后的飛躍，主要是通過觀察組織血流灌注情況等輔助評估疾病性質。有報道顯示〔10～12〕，惡性腫瘤內部的血供較為豐富，當造影劑流經此類血管后會導致參數水平出現異常，這為超聲造影用于甲狀腺良惡性結節的鑒別診斷提供了可能。

本研究結果表明，研究組PI、TTP、MTT水平較低，與汪彩英等〔13,14〕的研究結果類似，說明了超聲造影參數可有效鑒別診斷甲狀腺結節的良惡性。分析原因，筆者認為甲狀腺惡性結節具有新生血管較多、功能尚未成熟及呈非均勻性雜亂排列等特點，加之幼稚的新生血管難以滿足迅速生長的腫瘤細胞對氧氣和養分的需求，從而導致其出現缺氧、缺血狀態，進一步促使造影過程中病灶呈低增強或無增強特點，因此PI值降低，TTP與MTT縮短〔15〕。此外，甲狀腺癌組織中存在明顯的增殖基因表達失衡。究其原因，腫瘤細胞的惡性增殖主要來源于促增殖基因和抗增殖基因表達平衡被打破，而隨著腫瘤惡性程度的不斷增加，增殖基因失衡情況逐漸加重，最終導致相關基因表達水平明顯異常〔16～18〕。PDCD4屬于甲狀腺癌細胞的抗增殖基因，具有誘導癌細胞凋亡的作用；PP4R1則是抑癌基因之一，在惡性腫瘤組織中的表達水平明顯降低；TPX2則參與了紡錘體組裝、形成過程，因此隨著腫瘤細胞染色體基因的異常擴增，其表達水平顯著升高。另外，甲狀腺癌組織中也存在顯著的侵襲基因表達異常。其中主要原因可能在于侵襲基因異常表達在腫瘤細胞的遠處轉移過程中發揮著至關重要的作用，是腫瘤惡性進展的最主要原因。其中ADAM9主要通過降解基質、接觸細胞發揮促侵襲轉移的作用；BCORL1屬于轉錄共抑制因子之一，可通過和E-cadherin啟動子區域結合，發揮抑制轉錄的作用；CXCR4的表達升高可有效促進甲狀腺癌細胞的增殖、侵襲；ST7L則是抑癌基因之一，具有抑制腫瘤細胞克隆形成及侵襲轉移活性的作用〔19〕。Pearson相關性分析也再次證實了超聲造影參數水平可在一定程度上反映增殖基因、侵襲基因表達情況，從而可有效評估甲狀腺癌的惡性程度。

綜上所述，甲狀腺超聲造影參數應用于甲狀腺良惡性結節的鑒別診斷中具有一定的價值，且甲狀腺超聲造影參數可從客觀角度反映甲狀腺癌的增殖、侵襲活性，并有助于評估甲狀腺癌的惡性程度。