絨毛蛋白及核苷酸還原亞單位M1在不同胃黏膜病變組織中表達研究

趙 帥 華

(濮陽市安陽地區(qū)醫(yī)院病理科 濮陽 455000)

胃癌在消化道惡性腫瘤中最為常見，而胃癌主要由不同胃黏膜病變而逐步形成，這些病變包括慢性胃炎、萎縮性胃炎、腸上皮化生及胃黏膜上皮內瘤變等。有調查研究顯示，早期胃癌患者經過規(guī)范治療后，其5年生存率高于90%[1]，而早期胃癌診斷較為困難，因此提高早期胃癌的檢出率對于改善胃癌患者的預后有著重要的意義。絨毛蛋白屬于鈣離子調節(jié)性肌動蛋白的結合蛋白，在結腸、小腸及近端腎曲小管微絨毛刷狀緣的形成中有著重要作用，而在消化道腫瘤組織中也存在特異性表達，而核苷酸還原亞單位M1(RRM1)屬于一種抑癌基因，能夠對G2期檢測點功能產生激發(fā)作用，從而能夠對受損的DNA產生修復及凋亡作用，能夠對細胞的侵襲及轉移產生抑制效果，并能成為早期診斷部分腫瘤疾病的重要指標之一[2]。本文研究中，為進一步明確絨毛蛋白及RRM1在不同胃黏膜病變中的表達情況，選擇我院210例不同胃黏膜病變組織標本進行檢測，并對檢測結果進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2015年9月～2017年5月病例資料完整的210例胃黏膜活檢標本，其中慢性胃炎35例，腸上皮化生36例，低級別上皮內瘤變31例，高級別上皮內瘤變20例，胃癌88例。胃癌類型：印戒細胞癌28例，管狀腺癌27例，混合性癌33例。

1.2 方法

全部標本予以常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片及脫蠟后進行絨毛蛋白及RRM1檢測，采用SP法進行免疫組織化學染色，DAB顯色，采用蘇木精復染、脫水、透明及封片，具體操作參照試劑盒說明書，全部標本免疫組織化學染色中設立陽性及陰性對照。絨毛蛋白濃縮型鼠抗人單克隆抗體、實驗用兔抗人RRM1多克隆抗體及SP通用型免疫組織化學試劑盒均由福州邁新生物技術公司提供。絨毛蛋白及RRM1定位于細胞漿的黃棕色顆粒為陽性細胞，針對著色情況和陽性細胞進行積分，每例標本均隨機選擇5個高倍視野(×400)，確定其每個視野的陽性率，并計算出平均數。著色情況計分：0分：無染色；1分：黃色；2分：棕色；3分：深棕色。陽性細胞百分比計分：0分：無陽性細胞；1分：陽性細胞不高于30%；2分：陽性細胞高于30%，但不高于70%；3分：陽性細胞在70%以上。將上述兩項分數相加，陰性為0～2分，陽性為3～6分[3～4]。

1.3 統(tǒng)計學方法

全部數據采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行處理，其中計數資料采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 絨毛蛋白與RRM1在不同胃黏膜標本表達情況

由表1可見，腸上皮化生組、低級別上皮內瘤變組、高級別上皮內瘤變組、胃癌組標本的絨毛蛋白陽性率顯著高于慢性胃炎組(P<0.05)；低級別上皮內瘤變組、高級別上皮內瘤變組、胃癌組標本的絨毛蛋白陽性率顯著低于腸上皮化生組(P<0.05)；低級別上皮內瘤變組、高級別上皮內瘤變組、胃癌組標本的RRM1陽性率顯著高于慢性胃炎組及腸上皮化生組(P<0.05)；慢性胃炎組標本中的RRM1陽性率顯著高于腸上皮化生組(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計學意義。

表1 絨毛蛋白與RRM1在不同胃黏膜標本陽性表達情況[例(%)]

組別標本數絨毛蛋白陽性RRM1陽性慢性胃炎組3512(34.3)b23(65.7)b腸上皮化生組3632(88.9)a12(33.3)a低級別上皮內瘤變組3121(67.7)ab25(80.6)ab高級別上皮內瘤變組2014(70.0)ab17(85.0)ab胃癌組8858(65.9)ab79(89.8)ab

注：a與慢性胃炎組比較，P<0.05；b與腸上皮化生組比較，P<0.05。

2.2 絨毛蛋白、RRM1表達與胃癌臨床病理特征的關系

由表2可見，絨毛蛋白、RRM1在高中分化胃癌陽性表達顯著高于低分化胃癌，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而絨毛蛋白、RRM1的陽性表達情況與性別、年齡、腫瘤大小、浸潤程度、腫瘤分期及淋巴結是否發(fā)生轉移無顯著性差異(P>0.05)。

表2 絨毛蛋白、RRM1陽性表達與胃癌臨床病理特征的關系[例(%)]

病理特征例數絨毛蛋白陽性P值RRM1陽性P值性別男5333(62.3)女3525(71.4)>0.0549(92.5)30(85.7)>0.05年齡<60歲3020(66.7)≥60歲5838(65.5)>0.0527(90.0)52(89.7)>0.05腫瘤大小<4cm4932(65.3)≥4cm3926(66.7)>0.0543(87.8)36(92.3)>0.05浸潤程度T1^T22213(59.1)T3^T46845(66.2)>0.0518(81.8)61(89.7)>0.05分化程度高中分化4339(90.7)低分化4519(42.2)<0.0542(97.7)37(82.2)<0.05腫瘤分期Ⅰ^Ⅱ期3522(62.9)Ⅲ^Ⅳ期5336(67.9)>0.0530(85.7)49(92.5)>0.05淋巴結轉移是5032(64.0)否3826(68.4)>0.0545(90.0)34(89.5)>0.05

3 討論

目前，細胞骨架在細胞生物學及生物醫(yī)學領域中得到廣泛地應用，較多研究表明其與多種疾病存在重要聯(lián)系[4～5]。絨毛蛋白屬于單體形式的酸性多肽，由2.5萬個堿基構成，位于2號染色體中，分子質量為95kDa，主要在小腸絨毛細胞的刷狀緣及外分泌腺部分進行表達。絨毛蛋白不僅具有抗凋亡作用，同時作為重要的細胞結構蛋白，在對腸上皮表型的維持上具有一定的作用。本文研究結果顯示，腸上皮化生組、低級別上皮內瘤變組、高級別上皮內瘤變組、胃癌組標本的絨毛蛋白陽性率顯著高于慢性胃炎組(P<0.05)，說明絨毛蛋白在從腸上皮化生至癌變的過程中其基因出現了變化，從而表現為下調表達的形式，說明在癌變過程中，其上皮的異常增殖及分化狀態(tài)下降，從而使正常的絨毛蛋白表達受到抑制。且本文結果中，低級別上皮內瘤變組、高級別上皮內瘤變組、胃癌組標本的絨毛蛋白陽性率顯著低于腸上皮化生組(P<0.05)，說明隨著胃黏膜的變化，其上皮細胞的極性處于紊亂狀態(tài)，并減少了能夠維持微絲結構的成分表達下降，從而使病程加速。而RRM1分子量為85kDa，有19個外顯子，處于染色體11p15.5區(qū)域，有文獻報道，RRM1與惡性腫瘤的發(fā)生及轉移存在密切的關系[6]。本文研究結果顯示，低級別上皮內瘤變組、高級別上皮內瘤變組、胃癌組標本的RRM1陽性率顯著高于慢性胃炎組及腸上皮化生組(P<0.05)，慢性胃炎組標本中的RRM1陽性率顯著高于腸上皮化生組(P<0.05)，說明RRM1在胃黏膜癌變的發(fā)生發(fā)展中具有一定的作用。

同時，本文結果還顯示，絨毛蛋白、RRM1在高中分化胃癌陽性表達顯著高于低分化胃癌，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而絨毛蛋白、RRM1的陽性表達情況與性別、年齡、腫瘤大小、浸潤程度、腫瘤分期及淋巴結是否發(fā)生轉移無顯著性差異(P>0.05)。說明絨毛蛋白及RRM1是一種很好的區(qū)分腫瘤分化的標志物，能夠對腫瘤的分化進行有效的預測。

綜上所述，絨毛蛋白及RRM1的表達與胃癌的發(fā)病發(fā)展及預后存在一定關系，早期檢測能夠有效對胃癌進行診斷、病情評估及采取合理的治療方案，從而改善患者的預后。