德都紅花-7味散各味藥活性成分及現(xiàn)代藥理作用的研究

曹瑞珍，白靚，徐雅楠，于麗麗，張春蘭

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)，內(nèi)蒙古 通遼 028043)

蒙藥德都紅花-7味散具有清熱、解毒功能[1]。臨床主要用于肝瘀血熱，肝部不適隱痛，鞏膜、皮膚黃染，尿色深黃。該藥方主要由紅花、天竺黃、藍(lán)盆花、川木通、紫花地丁、訶子、麻黃等7 味蒙藥組成，每味藥作用各有異同。這7味藥通過互相配伍，使活血祛瘀、清熱解毒等功效得以加強(qiáng)。本文對德都紅花-7味散各組方的共同的活性化學(xué)成分及現(xiàn)代藥理作用研究進(jìn)展綜述如下。

1 活性化學(xué)成分

1.1 黃酮類化合物 黃酮類化合物以2個具有酚羥基的苯環(huán)通過中央三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的。黃酮苷元結(jié)構(gòu)特點決定了它的理化性質(zhì)，較難溶于水，而易溶于有機(jī)溶劑。當(dāng)黃酮類化合物的羥基與糖結(jié)合，即糖苷化后，糖本身有較多親水基團(tuán)，使水溶性變大，這時脂溶劑中的溶解度相應(yīng)減少。不同中藥黃酮類化合物結(jié)構(gòu)稍有不同，根據(jù)結(jié)構(gòu)選擇提取溶劑[2]。黃酮類化合物在生物體內(nèi)有預(yù)防心血管疾病、防癌抗癌、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、防衰老、殺菌抗病毒、消炎抗過敏、調(diào)脂等功效[3]。

紅花中分離得到多種有效成分，其中黃酮類化合物是最主要的有效成分。黃酮類化合物中紅花黃色素為紅花目前最主要的有效成分，色度值可用來反映紅花中黃酮類成分的含量，與 紅花黃色素A呈顯著正相關(guān)。還有紅花紅色素是紅花中第一個被發(fā)現(xiàn)的查耳酮[4-5]。從蒙藥藍(lán)盆花中共分離鑒定了十幾個黃酮類化合物，分別是芹菜素、木犀草素、胡蘿卜苷、山柰酚-吡喃葡萄糖苷、芹菜素--葡萄糖苷、木犀草素-葡萄糖苷、芹菜素-蘆丁糖苷、華北藍(lán)盆花素等[6-7]。從草麻黃根的醇提物的醋酸乙酯部分分離得到13個黃酮類化合物，分別鑒定為:麻黃根素A、麻黃寧A、麻黃寧B、麻黃寧D、芹菜素、山柰酚、槲皮素、二氫槲皮素、四羥基二氫黃酮、兒茶素、表兒茶素、阿夫兒茶精、表阿夫兒茶精[8]。川木通的黃酮類化合物有黃酮苷；紫花地丁含黃酮及其苷類；訶子也含黃酮類化合物[9]。寶貴榮等[10]對德都紅花-7味散中黃酮類化合物槲皮素等進(jìn)行含量測定，結(jié)果含槲皮素4.37 μg·mg-1，總黃酚61.80 μg·mg-1，并且具有很強(qiáng)的抗氧化活性。

1.2 多糖 由多個單糖分子之間經(jīng)過脫水縮合通過糖苷鍵連接而成多糖。生物活性多糖具有多種生物學(xué)功能，有調(diào)脂降糖、調(diào)節(jié)免疫、抑菌消炎、防癌抗輻射、保護(hù)內(nèi)臟等功能[11]。德都紅花-7 味散各組方紅花、竹黃、紫花地丁、訶子、麻黃中都有提取到多糖并發(fā)揮各自的生物學(xué)作用[9,11-13]。

1.3 生物堿 生物堿存在于自然界(主要為植物)中的一類含氮環(huán)狀有機(jī)化合物，有堿的性質(zhì)，氮素包含在環(huán)內(nèi)。理化性質(zhì)：味苦，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，但麻黃堿(ephedrine)二者均能溶，且麻黃堿在常壓下就表現(xiàn)有揮發(fā)性，其他中藥提取的生物堿則沒有。生物堿有保護(hù)心腦血管、防癌、抗菌消炎、解痙及保肝等功能[14]。

德都紅花-7味散各味藥中提取到的生物堿有：紅花生物堿、天竺黃生物堿、藍(lán)盆花生物堿、紫花地丁總生物堿、麻黃生物堿。麻黃生物堿(以麻黃堿和偽麻黃堿為主，其次是甲基麻黃堿、甲基偽麻黃堿和去甲基麻黃堿、去甲基偽麻黃堿等)[14]。

1.4 皂苷 皂苷按其皂苷配基的結(jié)構(gòu)分為三萜皂苷和甾族皂苷，其中的糖常見的有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖等。由于苷元和糖鏈，一個易溶于脂，一個易溶于水。不同來源的皂苷其苷元和糖鏈比例不同，溶解性也就不同。皂苷一般可溶于水及低級醇溶劑即甲醇和稀乙醇。一些皂苷對細(xì)胞膜具有破壞作用，表現(xiàn)出溶血、殺精及細(xì)胞毒等活性。皂苷能溶血是因為大部分皂苷能與紅細(xì)胞膜膽固醇結(jié)合成不溶性的復(fù)合物，紅細(xì)胞的滲透壓改變而發(fā)生崩解導(dǎo)致溶血[15]。皂苷具有保護(hù)心腦血管、抗癌抗突變、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗病毒等功效[15]。

紅花、藍(lán)盆花、川木通(三萜皂苷類)、紫花地丁、訶子等都含皂苷。各組方所含的皂苷，其皂苷元種類、糖鏈長短如何，決定其皂苷的類型，發(fā)揮的作用也會有差異。木通屬植物富含三萜皂苷，為其專屬性化學(xué)成分，而川木通中皂苷水解后有2 種皂苷元，其中有研究較多的齊墩果酸[16]。

總之，黃酮類化合物、生物活性多糖、生物堿及皂苷等中藥活性成分既有相同作用，如都有抗氧化防衰老、抗腫瘤、保護(hù)心腦神經(jīng)組織、提高免疫力、抗菌消炎等功能。又有各自獨特的藥理作用，7味藥形成復(fù)方后這些作用得以加強(qiáng)[17]。

2 德都紅花-7味散藥理作用

2.1 保肝利膽作用 韓志強(qiáng)等[18]在研究中發(fā)現(xiàn)，肝損傷后線粒體功能最先開始出現(xiàn)障礙，Na+-K+-ATP 酶活性下降，鈉泵功能不能正常發(fā)揮作用，線粒體膜水腫，流動性下降，內(nèi)膜呼吸鏈氧化磷酸化功能障礙，ATP 合成受阻，反過來又降低Na+-K+-ATP酶的活力，構(gòu)成惡性循環(huán)。而德都紅花-7味散藥物組與模型組比較，肝線粒體鈉鉀ATP 酶活性明顯升高，同時肝組織SOD明顯升高，MDA含量明顯降低，表明德都紅花-7味散具有抗CCl4引起的脂質(zhì)過氧化作用。

包玉華等[19]的研究顯示，德都紅花-7味散作用于D-半乳糖胺所致肝損傷模型小鼠，結(jié)果灌胃該藥1周后，小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶活性明顯降低，同時病理變化明顯改善，大小劑量均有效；又將該藥作用于摘除膽囊的小鼠，收集其膽汁分泌量，結(jié)果與對照組比較，膽汁分泌量明顯增加。由此可見，德都紅花-7味散通過增加膽汁分泌量，來增加肝臟對代謝終產(chǎn)物的排泄、有毒物質(zhì)的排泄而解毒、多余膽固醇的排泄及轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼岫笛懝檀肌Ｍ跤澜艿萚20]用德都紅花-7 味丸治療乙型肝炎取得很好的臨床療效。

2.2 抗肝纖維化作用 巴圖德力根等[21-22]研究德都紅花-7味散對CCl4及豬血清所致實驗性肝纖維化模型大鼠影響，結(jié)果與模型組比較，用藥組血清和肝組織纖維化4項指標(biāo)：透明質(zhì)酸酶(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(ⅣC)含量顯著降低，炎癥活動度及纖維化程度半定量值及血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)含量均明顯降低。這些外周血中促炎細(xì)胞因子水平與肝纖維化成正相關(guān)，在損傷-修復(fù)不斷的循環(huán)中，肝細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成增加，肝組織細(xì)胞逐漸增生、纖維化[23]。德都紅花-7 味散通過抑制肝細(xì)胞變性壞死，抑制促炎因子IL-1、IL-6、TNF-α分泌，進(jìn)而抑制肝致纖維化物質(zhì)HA、LN、Ⅲ型、Ⅳ型膠原的合成或沉積，而起到抗肝纖維化作用[24]。

巴圖德力根等[25]研究發(fā)現(xiàn)，德都紅花-7味散對CCl4所致實驗性肝纖維化模型大鼠肝組織基質(zhì)金屬蛋白酶-1和基質(zhì)金屬蛋白-13(MMP-1、MMP-13)表達(dá)較對照組顯著下調(diào)(P<0.05)，相反顯著上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)的表達(dá)(P<0.05)。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的活性受基因轉(zhuǎn)錄水平、無活性前體激活以及TIMP的作用。MMPs在急性和慢性炎癥中發(fā)揮重要作用，因此維持MMPs /TIMPs 兩者功能的穩(wěn)態(tài)，降解過剩的Ⅰ型、Ⅲ型膠原，阻斷TGF-β表達(dá)，可延緩甚至阻斷肝纖維化進(jìn)程[26]。

Smads家族是轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的一個重要基因家族[27]。徐艷華等[28]在研究中發(fā)現(xiàn)，德都紅花-7味散通過上調(diào)抑制型smad，即smad6、smad7 蛋白，使其直接與TGF-β1 型受體結(jié)合，抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)；同時，下調(diào)激動型smad，即smad2、smad3 蛋白的基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，使TGF-β1 信號從細(xì)胞表面無法轉(zhuǎn)到細(xì)胞核，TGF-β1調(diào)控的靶基因也就無法表達(dá)，細(xì)胞外基質(zhì)就不至于過量沉積，從而達(dá)到抑制纖維化發(fā)生發(fā)展的目的。

2.3 防治脂肪肝 洪金鳳等[29]的研究顯示，德都紅花-7味散對大鼠酒精性脂肪肝有明顯的保護(hù)作用，與模型組比較，血脂四項指標(biāo)顯示出明顯差異，血LDL-C、TG、CHO等水平明顯降低，HDL-C 水平升高，肝損害的病理改變也得到明顯改善。酒精在肝內(nèi)乙醇脫氫酶和微粒體乙醇氧化酶系的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰笠环磻?yīng)需加氧，消耗肝細(xì)胞的氧；乙醛再氧化為乙酸，使輔酶Ⅰ(NAD)轉(zhuǎn)變?yōu)檫€原型輔酶Ⅰ(NADH)，因而NADH/NAD比值增高，NADH升高抑制三羧酸循環(huán)，脂肪酸氧化的最后一步就不能進(jìn)行，脂肪在肝內(nèi)堆積；同時三羧酸循環(huán)的障礙，使乙酰輔酶A堆積，可以合成脂肪酸進(jìn)而合成脂肪，導(dǎo)致脂肪肝的形成；再者NADH增多進(jìn)入呼吸鏈氧化進(jìn)一步耗氧，肝細(xì)胞因缺氧而變性壞死、纖維化，再加乙醛的毒性損害、自由基的產(chǎn)生、炎性因子的釋放進(jìn)一步影響肝細(xì)胞的功能[30]。

另有研究顯示[31]，德都紅花-7味散還影響TLR4/NF-κB信號通路，預(yù)防和治療酒精性脂肪肝的作用。TLR4 與內(nèi)毒素發(fā)生反應(yīng)，使細(xì)胞因子釋放，引起肝細(xì)胞損害及炎癥反應(yīng)，這些因子可以激活庫普弗細(xì)胞上的NF-κB， NF-κB作為一個轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控靶基因的表達(dá)影響肝細(xì)胞正常功能。德都紅花-7味散抑制TLR4、NF-κB的表達(dá)，達(dá)到保護(hù)肝細(xì)胞的目的。

2.4 提高免疫力 包玉華等[19]在研究時發(fā)現(xiàn)，德都紅花-7味散能夠顯著增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的功能，巨噬細(xì)胞吞噬異物后，形成的吞噬泡與溶酶體融合，最終將異物消化分解，發(fā)揮非特異性免疫作用。還可使T、B等淋巴細(xì)胞激活，發(fā)揮其特異性免疫作用。對刀豆蛋白A(ConA)誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用。

德都紅花-7味散對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖有顯著增強(qiáng)作用[19]。認(rèn)為，該藥通過促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖來合成和分泌多種細(xì)胞因子，間接起到進(jìn)一步調(diào)節(jié)免疫、造血和直接殺傷靶細(xì)胞的作用。德都紅花-7 味散治療肝病抗纖維化是通過減少炎性介質(zhì)和增強(qiáng)巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞功能，而發(fā)揮治療作用的[22]。而德都紅花-7味散所含的4種主要有效成分均有殺菌抗病毒、消炎抗過敏、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)脂等功能，而纖維化是炎癥反復(fù)作用的結(jié)果，抗炎抗氧化進(jìn)而抗纖維化。通過組成方劑，這些作用得以加強(qiáng)。

3 結(jié)論

德都紅花-7味散能夠?qū)笴Cl4引起的脂質(zhì)過氧化作用，提高肝組織 SOD活性，降低其MDA含量，而組方中的紅花、藍(lán)盆花、紫花地丁、訶子、麻黃均具有清除自由基、抗氧化活性，這與它們各自所含的黃酮類化合物、多糖及皂苷等成分密切相關(guān)[32]；該7味散能有效治療乙肝，這與其組分中天竺黃、藍(lán)盆花、川木通、紫花地丁、訶子等的抗菌、抗病毒及解熱消炎作用，這是組分中的4種有效成分作用的結(jié)果；同時該7味散還有降低血LDL-C、TG、CHO等水平，升高血液HDL-C 水平，防治脂肪肝，而這與其組分紅花能調(diào)節(jié)血脂、利膽降膽固醇，藍(lán)盆花抑制胰脂肪酶活性，這與黃酮類化合物[33]、多糖等活性成分功能相關(guān)；該7味散能夠提高機(jī)體免疫力，可使T、B 等淋巴細(xì)胞激活，提高巨噬細(xì)胞吞噬功能，紅花、藍(lán)盆花、紫花地丁、麻黃均有此作用，這與它們所含的黃酮類化合物、多糖及皂苷等成分的相應(yīng)作用有關(guān)。

通過以上作用可知，徳都紅花-7 味散的每味組方，有相同或不同的活性成分，這些活性成分即化學(xué)成分群作用于機(jī)體，產(chǎn)生相同或相似的效果，它們組合使某一種作用加強(qiáng)，或相輔相成、君臣輔佐達(dá)到相應(yīng)的治療效果,特別在保肝利膽抗纖維化、降脂和調(diào)節(jié)免疫方面有顯著的作用。