三種尿液干化學分析儀檢測一致性的比較*

王剛強，程 翔，楊麗華，何 娟，盧 佩，汪 沛，李程華，楊若凡，鄭善鑾，郝曉柯

(空軍軍醫大學第一附屬醫院全軍臨床檢驗醫學中心，西安 710032)

尿常規檢查是臨床篩查疾病最簡單、有效的檢查之一，尿液干化學分析儀是最常用的篩查儀器。隨著各大醫院病員量的持續增加，檢驗科常會有多臺尿干化學分析儀，這些儀器有同一廠家不同型號或不同廠家不同型號，儀器之間的可比性就顯得尤為重要。西京醫院檢驗科共有三種型號尿液干化學分析儀，分別為羅氏Urisys2400，愛科來AX4030和美僑Mejer60，本實驗就三種型號尿液和干化學分析儀檢測結果的一致性進行研究，包括酸堿度(pH)、比重(SG)、紅細胞(ERY)、白細胞(LEU)、蛋白(PRO)、葡萄糖(GLU)、膽紅素(BIL)、酮體(KET)、亞硝酸鹽(NIT)和尿膽原(BUG)，同時通過確證實驗，對所有尿液標本的ERY，LEU和PRO進行確認，分別計算三臺儀器各自符合率和假陰性率，現匯報如下。

1 材料和方法

1.1 標本來源 匯總西京醫院檢驗科2017年1月～2018年6月期間3次三種干化學分析儀的比對結果(每半年比對一次)，每次選擇門診新鮮尿液標本100份，共計300份標本，2 h內完成。

1.2 儀器和試劑 Urisys2400，AX4030，Mejer600及其配套試紙條，Urisys 2400 Cassette，Aution Sticks 10EA，Mejer-11SL，伯樂尿液干化學質控品，奧林巴斯CX-41顯微鏡，湖南賽特湘儀TD5M-WS離心機，萬華普曼潛血(OB)試紙條，酒精燈，5 ml/dl冰醋酸。

1.3 方法 Urisys2400為西京醫院檢驗科參加衛生部室間質評的儀器，近3年室間質評回饋結果100%通過，故選擇Urisys2400為靶機。AX4030，Mejer600分別與Urisys2400進行比對，計算結果的陽性檢出率和符合率。通過確證實驗[1，2]，對所有尿液標本的ERY，LEU和PRO進行確認，分別計算三臺儀器各自符合率和假陰性率，其中ERY確證實驗為免疫膠體金法，使用萬華普曼潛血(OB)試紙條，評判標準為質控線和反應線均為陽性；LEU確證實驗為離心鏡檢法(因檢測原理限制，此確證實驗實為替代確證實驗，用來評價干化學法LEU亦有局限性，但目前尚無更好的方法替代)，10 ml尿液1 500 r/min離心5 min，留0.2 ml混勻后制片，>5個/HP為陽性；PRO確證實驗為醋酸加熱法，評判標準為呈明顯白霧狀。

1.4 統計學分析

1.4．2 其余項目統計方法：數據采用SPSS24.0軟件統計，分別計算Urisys2400，AX4030和Mejer600的陽性檢出率，其中各儀器等級設置均遵循儀器說明書設置，再以Urisys2400為靶機，分別計算AX4030，Mejer600的χ2值，P<0.05為差異具有統計學意義。同時以Urisys2400為靶機分別判斷AX4030，Mejer600 的一致性，以一般符合率(檢測結果陰陽性不能跨級，陽性結果不超過一個數量等級，樣本數占總樣本數的比率)、完全符合率(檢測結果完全相同樣本數占總樣本數的比率)來表示，用加權Kappa判斷[4]，其中Kappa≥0.4時表示一致性良好，Kappa≥0.75時表示高度一致，Kappa=1時表示完全一致；計算三種儀器與確證實驗的符合率及假陰性率。

2 結果

項 目儀器 x d(%)結果(%)pH SG Urisys2400AX4030Mejer600Urisys2400AX4030Mejer6005.976.136.431.019 91.020 31.022 9-2.687.67-0.0380.295-<10<10-<1<1

圖1 AX4030，Mejer600 pH成對差異百分率均值分布情況 圖2 AX4030，Mejer600 SG成對差異百分率均值分布情況

2.2 三種儀器部分項目陽性檢出率 見表2。AX4030與Urisys2400相比，ERY，PRO陽性檢出率差異有統計學意義(χ2=5.114，5.921，均P<0.05)；Mejer600與Urisys2400 相比，ERY陽性檢出率差異有統計學意義(χ2=5.692，P<0.05)；其他項目陽性檢出率AX4030與Urisys2400，Mejer600比較差異均無統計學意義。

表2 三種儀器部分項目陽性檢出率(%)

注：*與靶機Urisys2400比較。

2.3 以Urisys 2400為靶機，AX4030，Mejer600部分項目一般符合率及完全符合率結果 見表3。除SG，pH外其它項目一般符合率均>80%，Kappa>0.4，結果一致性良好。

表3 AX4030，Mejer600部分項目一般符合率及完全符合率(%)

2.4 Urisys2400，AX4030，Mejer600部分項目確證實驗結果 見表4。

表4 三種儀器部分項目確證實驗結果(%)

3 討論

尿液干化學分析儀作為尿液初篩的常規儀器，不僅操作方便、檢測迅速、結果準確度高，而且隨著技術的不斷發展，目前大多數廠家干化學分析儀自動化程度都很高，易于普及使用。不同廠家的分析儀器均有各自配套的專用試紙條，但基本反應原理大致相同，僅在儀器靈敏度、檢測范圍、等級對應濃度上略有差別，詳見各廠家試紙條說明書，本次實驗，三種型號儀器部分項目結果不盡完全一致，與此相關。

三種儀器pH檢測范圍均在5.0～9.0之間，Urisys 2400除外6.0～6.5以0.5為一個等級，其余均以1.0為一個等級，AX4030，Mejer600以0.5為一個等級。依據表1結果，AX4030，Mejer600與靶機Urisys 2400 pH均值差異百分率<10%，一致性符合要求，從圖1我們可以得出AX4030 pH均值差異百分率離散程度較Mejer600小，說明AX4030 pH結果更接近靶機Urisys 2400。SG檢測范圍均在1.000～1.030之間，Urisys 2400及AX4030以0.001為一個反應級別，Mejer600以0.005為一個反應級別，從反應靈敏度來說Urisys 2400，AX4030優于Mejer600，依據表1結果AX4030，Mejer600與靶機Urisys 2400 SG均值差異百分率<1%，一致性符合要求，同樣從圖2我們可以得出AX4030 SG均值差異百分率離散程度較Mejer600小，說明AX4030 SG結果更接近靶機Urisys 2400。

表2顯示三種儀器ERY，LEU，PRO，GLU，BIL，KET，NIT和UBG陽性檢出率及AX4030，Mejer600與靶機Urisys 2400的比較結果，ERY AX4030，Mejer600P<0.05%，存在顯著差異，分析主要原因為儀器靈敏度，Urisys 2400靈敏度為7個ERY/μl，AX4030，Mejer600靈敏度為10個ERY/ μl，因此Urisys 2400 ERY檢測更靈敏些。PRO AX4030，存在顯著差異(P<0.05)，同樣也是因為AX4030靈敏度為0.15 g/L，較Urisys 2400靈敏度0.18 g/L為高所致。在臨床工作中，不同儀器同一項目不僅靈敏度存在差異，等級濃度也常不對應。表3顯示以Urisys 2400為靶機AX4030，Mejer600 ERY，LEU，PRO，GLU，BIL，KET，NIT，UBG一般符合率均>80%，Kappa均>0.4，結果顯示AX4030，Mejer600與Urisys 2400一致性良好。對于ERY，LEU，PRO干化學分析儀檢測影響因素較多[5]，故對實驗標本做確證實驗，結果如表4。ERY符合率為69.8%～79.3%，這可能與尿液中的干擾因素如對熱不穩定酶、肌紅蛋白、氧化劑、產過氧化物酶的細菌等造成的假陽性相關。假陰性率為7.2%～12.4%，可能為尿液中含大量Vit C，甲醛等還原性物質相關。LEU符合率為70.1%～76.2%，這可能與尿液中含有非那吡啶、呋喃妥因等泌尿系統治療類藥物及高BIL，高GLU，高PRO標本較多相關。假陰性率為17.4%～29.6%，除了化學干擾因素之外，可能與LEU的確證實驗替代實驗為離心鏡檢法相關，干化學法LEU是檢測白細胞中性脂酶，而淋巴細胞、單核細胞等胞內不含中性酯酶，因此鏡檢可看到完整的淋巴細胞、單核細胞而干化學法無法檢測，常見于腎移植排斥、泌尿系統結核的疾病，且對于溶解的中性粒細胞，干化學法仍可檢測中性酯酶，但鏡檢無法計數溶解的細胞成分，這也是導致LEU干化學法假陰性率偏高的原因。PRO符合率為63.3%～88.3%，假陰性率為4.2%～15.9%，這與干化學法PRO的靈敏度和特異度相關，試紙條對清蛋白敏感，而對球蛋白的靈敏度為清蛋白的1/100～1/50，可漏檢本周蛋白等球蛋白，也可能與尿液中含有季銨鹽、洗必泰等消毒藥水及服用奎寧、奎寧丁、大劑量青霉素等藥物相關。通過比較確證實驗結果，Urisys 2400 ERY符合率79.3%，AX4030 PRO 符合率88.3%，較其余兩臺儀器高，三種儀器LEU假陰性率均較高。因為干化學法檢測原理限制、干擾因素較多等原因，在臨床工作中需通過尿干化學分析儀、尿液沉渣分析儀組成流水線，交叉互檢，并制定相應的顯微鏡復檢規則，降低假陰性率。

綜上所述，雖然AX4030，Mejer600與靶機Urisys 2400部分項目因為儀器靈敏度原因存在差異，但作為疾病初篩工具，其所達到的效果基本一致，均可滿足臨床需要，但對部分可疑標本，仍需結合其他沉渣儀器及確證實驗綜合分析。