黃漢琮 陳乾華 楊曉蕊
(航空總醫院,北京 100012)
肺癌是目前臨床常見的惡性腫瘤之一,對人類健康危害極其嚴重〔1〕。相關報道顯示〔2〕,近年來各個國家的肺癌發病率平均增長了15%~65%。肺癌患者中大部分是非小細胞肺癌(NSCLC)患者預后通常較差,很大一部分原因是診斷出肺癌病變時已經是肺癌中晚期,錯過了最佳治療時間。穿膜絲氨酸蛋白酶(TMPRSS)4是穿膜絲氨酸蛋白酶中的主要成員,具有胰蛋白活性〔3〕。本研究探討TMPRSS4、糖鏈抗原(CA)199在早期NSCLC組織及癌旁組織的表達及與腫瘤血管形成中的作用。
1.1一般資料 選取2014年1~12月在中國醫科大學航空總醫院胸外科接受治療的原發性早期NSCLC患者85例,男56例,女29例,年齡40~73〔平均(61.52±10.93)〕歲,平均體重指數(21.7±2.1)kg/m2。所有患者經病理診斷證實為早期NSCLC。腺癌64例,鱗癌21例;高分化33例,中分化與低分化各26例。排除標準:①入院前已接受化療、放療以及其他抗癌治療;②合并糖尿病、高血壓等疾病;③有顱腦、肝臟等遠處轉移。
1.2研究方法
1.2.1采用免疫組化法檢測NSCLC患者體內癌組織及癌旁組織CA199、TMPRSS4及CD34的表達 手術取患者癌組織及癌旁組織制成切片并染色。將切片置于60℃的環境中保存1 h,采用二甲苯溶液脫蠟、酒精退水。分成3份分別加入TMPRSS4、CA199及CD34抗體進行單抗,培育后自來水沖洗,復染、氨水反藍、脫水干燥等操作,最后封片進行鏡檢。記錄CA199及TMPRSS4陽性檢出率。
1.2.2采用Real-time PCR檢測癌組織與癌旁組織中TMPRSS4 mRNA的表達量 提取14對NSCLC患者癌組織及癌旁組織的總RNA,根據D260/D280的比值來測定RNA的濃度。反應條件為95℃下預變性2 min,94℃下變性20 s,60℃退火20 s,72℃下延伸30 s,總共40個循環。……