邱良武 何建輝 保文莉 郭偉昌
(昆明醫科大學 1體育部,云南 昆明 650500;2公共衛生學院)
硒是一種與人及其他哺乳動物生理密切相關的微量元素,其主要功能是抗氧化、參與免疫反應、抗腫瘤作用、防治克山病和大骨節病。硒對人體健康的影響體現在缺硒會引起異常反應而高濃度硒又引起中毒,只有適宜劑量的硒對人體才具有營養作用〔1〕。臟器質量和臟器系數是實驗動物的重要基礎數據〔2〕。血常規、血液生化指標的測定是實驗動物標準化的重要內容,也是病理學、生理學、藥物毒理學和醫學診斷等的常用指標〔3,4〕。骨髓巨核細胞和有核細胞數量檢查是觀察骨髓造血功能的重要檢查項目之一。老年小鼠隨著生理功能下降,組織器官容易產生一些退行性病變。本文擬分析老年小鼠進行有氧運動并補充適宜劑量的硒對臟器系數、血生化和骨髓涂片的影響,為運動訓練和營養防治骨質疏松提供借鑒。
1.1實驗材料 昆明種雄性老年小鼠24只,4月齡,體重37~43 g,由昆明醫科大學實驗動物學部提供。鼠料由昆明醫科大學實驗動物學部提供。飲用水為自來水,硒來自美麗康保健品有限公司生產的澳天力牌富硒酵母片。
1.2有氧運動強度的確定 由預實驗確定。在預實驗中,小鼠在相近條件下平均游泳力竭時間為129 min,最短時間為94 min,因此將有氧運動強度定為每次80 min。
1.3實驗動物分組和實驗方案 全部小鼠進行10 min適應性游泳后,隨機分為有氧運動組(A組)、有氧運動+補硒組(B組)、對照組(C組),各8只。各組在18~24℃的常溫下飼養和實驗。C組:自然環境喂養,不施加任何處理因素。B組和A組:在長52 cm,寬37 cm,高22 cm的水箱里進行有氧游泳運動,5次/w,每次80 min。實驗水深18 cm,水溫22℃。B組在飲水中加入低劑量硒,濃度為2%。
1.4血液標本的采集 實驗8 w后,禁食12 h,眼眶采血1.0~1.5 ml,分別注入肝素鈉抗凝管和無抗凝管中,送昆明呈貢區人民醫院檢測。
1.5臟器采集及測定 采血后頸椎脫臼處死,稱重后解剖。分離出腦、心、肺、脾、左右腎、胸腺、頜下腺、左右睪丸、脂肪等主要器官組織,用吸水紙吸干表面水分,剔除臟器表面脂肪、筋膜后用電子天平精確稱重。
1.6取小鼠胸骨骨髓,制成涂片送檢 Wright-Giemsa復合染色,光鏡檢查,使用油鏡,放大1 000倍,進行骨髓涂片分類計數。在油鏡下,每個標本一共計數500個有核細胞,對每個細胞仔細觀察分類,然后計算出每組各種細胞所占的百分率。
1.7統計分析 應用SPSS17.0統計軟件進行方差分析及t檢驗。
2.13組主要臟器系數比較 A、B組脾臟系數、胸腺系數和腦系數與C組有顯著差異(P<0.05,P<0.01)。見表1。

表1 3組主要臟器系數比較
與C組比較:1)P<0.05,2)P<0.01;下表同
2.23組血生化比較 與C組比較,A、B組總蛋白(TP)、白球比(A/G)、肌酸激酶(CK)和尿素氮(BUN)/肌酐(CREA)(B/C)、CREA、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、BUN、堿性磷酸酶(ALP)和鉀(K)有顯著差異(P<0.05,P<0.01)。見表2。

表2 3組血生化指標比較
GLB.球蛋白;TBIL.總膽紅素;AST.谷草轉氨酶;ALT.谷丙轉氨酶;TC.總膽固醇;TG.三酰甘油
2.33組骨髓涂片統計結果 A、B組與C組粒系細胞、紅系細胞、粒紅比值、漿系細胞比例有顯著差異(P<0.05,P<0.01)。見表3。髓片總體特征:A組、B組、C組髓片有核細胞增生活躍。其中A組紅系細胞減少,B組和C組紅系細胞又有增加。各組淋巴系細胞及單核細胞比例也無明顯差別。成纖維細胞等非造血細胞無明顯改變,骨髓小粒造血細胞正常。

表3 3組骨髓涂片結果
脾和胸腺是重要的免疫器官,其中,胸腺屬于中樞免疫器官,產生的胸腺肽是一種蛋白質和多肽激素,能刺激T淋巴細胞的成熟,平衡和調節免疫功能,是一種與機體的細胞免疫有密切關系的激素;脾臟只是接受免疫細胞的組織,屬于外周免疫器官,其免疫功能要小于胸腺。個體成熟后,胸腺逐漸萎縮,胸腺素分泌急劇減少或缺失,可以理解為由于胸腺逐漸萎縮,為提高免疫功能,進而脾臟代償性增大,是免疫功能下降的現象。郭建軍等〔5〕發現硒營養狀態或長期訓練對小鼠脾細胞數有明顯影響,認為硒營養狀態或長期訓練對小鼠免疫功能影響不是通過脾細胞數的變化,而是通過影響其功能實現的。本研究和郭建軍等〔5〕的研究不完全一樣,提示硒營養狀態結合有氧運動也通過脾細胞數的變化影響小鼠免疫功能。
有氧運動對TP、ALB、A/G、CK、B/C、GLU、BUN和K等物質產生影響,但通過補硒,其作用有進一步加強。值得一提的是,ALP是骨形成標志物,是在成骨細胞分化增殖階段產生分泌的一種酶,是最常用的評價骨形成和骨轉換的指標〔6〕。日本厚生省針對學生近視和脊柱彎曲的狀況,明確規定中小學生配餐中必須有魔芋食品,魔芋也被聯合國衛生組織確定為十大保健食品之一〔7〕,因魔芋富含微量元素硒。此外,運動鍛煉促進骨密度增加已經得到證實。骨髓巨核細胞和有核細胞數量檢查是觀察骨髓造血功能的重要檢查項目之一,補硒結合有氧運動可以通過提升ALP含量和骨髓造血功能來改善骨骼新陳代謝,提高骨密度,對預防老年骨質疏松有一定的幫助。
不足之處是本研究沒有涉及單純補硒的作用,有可能有氧運動與補硒之間存在交互作用,即運動增加或減少硒的吸收,或者補硒增加或減少有氧運動的能力。