腫瘤標記物對原發性及繼發性肝癌患者的診療價值

徐海煜 魚 軍 葛 鵬

常見腫瘤標記物為AFP、CEA、CA19-9和CA125。臨床上腫瘤標記物被用于發現腫瘤患者、篩選腫瘤高危人群、判斷腫瘤發展程度、鑒別腫瘤的良惡性和對術后腫瘤復發的檢測[1]。既往研究表明各腫瘤標記物單獨檢測效果遠不及聯合檢測敏感度高，特異性強，且存在難以消除的局限性[2-4]。本研究通過回顧分析542例肝臟和膽道系統惡性腫瘤患者資料，在考慮到患者年齡、性別和有無乙肝病史的情況下，探討發現四種腫瘤標記物(AFP、CEA、CA19-9和CA-125)單獨和結合檢測惡性腫瘤的差距，從而為臨床提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2014年3月至2016年3月入我院接受肝臟良性腫瘤(肝細胞腺瘤、肝管細胞腺瘤)，原發性及繼發性肝癌，肝內結石，化膿性膽管炎，膽總管結石治療的患者和接受常規體檢者共542例，非小細胞癌(鱗狀細胞癌198例、腺癌107例、未分化的大細胞癌121例)和小細胞癌116例，根據臨床診斷病情的良惡性共分為三組：①良性腫瘤組(肝臟良性腫瘤，膽道系統良性腫瘤)患者182例，男性92例，女性90例，性別比1.02/1，其中15例有乙肝病史；②原發性及繼發性肝癌組患者251例，男性142例，女性109例，性別比1.30/1，其中45例有乙肝病史；③正常組組患者109例，其中男性55例，女性54例，僅12例有乙肝病史。本研究獲我院倫理委員會批準，患者或近親屬對研究方案簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標準

納入標準[5]：①不限男女，年齡18～90歲；②有肝臟和膽道系統疾病病癥者；③手術檢測發現有肝癌或膽道系統癌細胞。排除標準：①患者狀況極差，無法接受手術治療者；②患有肝硬化、糖尿病、胰腺炎等。

1.3 研究方法

對所有患者(空腹狀態)抽血，血液樣本抗凝劑，低溫冷藏。通過樣品濃度和對應的軟件配置所需的標本濃度。抗原抗體特異性識別原理檢測腫瘤標記物(AFP、CEA、CA19-9和CA-125)，通過將各標本血樣和放光物質標記的生物抗體控溫培育[6-8]，反應充分后除去標記抗體，用特定的生物測光儀測結合物的發光值，記錄數據。具體操作如下：將各血液樣本從冷藏箱取出后置于室溫10 min后加入9倍的蒸餾水稀釋待用。待測樣本，標準樣品分別置于不同的微型反應器中，分別加入標記不同腫瘤標記物(AFP、CEA、CA19-9和CA-125)的發光性生物抗體40 μl，混合均勻。37 ℃恒溫箱反應1 h。洗液：除去微型反應器的多余液體，分別加入200 μl洗液除去未反應完全的發光性生物抗體，靜止1 min；重復操作3次，使多余抗體洗凈。測定：將發光底物液置于測光儀測量發光底物發光值RLU，將數據傳入連接測光儀控制計算機中。

判斷標準：腫瘤標記物AFP、CEA、CA19-9和CA-125的臨界值分別為25 U/ml、4.8 U/ml、38 U/ml、34 U/ml，若測量值大于臨界值，結果顯示為陽性；多腫瘤標記物結合檢測時，以正常者的RLU值判斷是否為陽性率，若高于，則呈陽性。

1.4 儀器及試劑

儀器：生物芯片檢測儀、電熱恒溫水溫箱、光化學分析儀等；試劑：羅氏2010型電化學發光免疫分析儀及測定AFP、CEA、CA-125及CA19-9化學發光免疫試劑盒。

1.5 統計學處理

2 結果

2.1 腫瘤標記物AFP、CEA、CA19-9和CA-125檢測結果

良性腫瘤組和原發性及繼發性肝癌組AFP、CEA、CA19-9和CA-125檢測值均明顯高于正常組，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 良惡性腫瘤組及正常組中腫瘤標記物AFP、CEA、CA19-9和CA-125檢測結果

2.2 腫瘤指標的診斷價值

在AFP、CEA、CA19-9和CA-125聯合檢測中，原發性及繼發性肝癌組敏感度達64.5%，良性腫瘤組敏感度為61.1%，正常組的敏感度為40.9%，見表2。

表2 腫瘤指標的診斷結果的敏感度和特異性/%

2.3 乙肝病史對腫瘤指標的影響

65例有乙肝患者的AFP值為(400.0±100.1)U/ml，無乙肝患者的AFP值為(324.6±154.9)U/ml，前者顯著更高，差異具有統計學意義(P=0.008)；而CEA、CA19-9和CA-125檢測值未見明顯差異(P>0.05)，見表3。

表3 乙肝與各腫瘤標記物指標的關系

3 討論

腫瘤標記物是腫瘤細胞侵染宿主細胞后分泌的1種物質，多為抗原，酶，激素等，一般來說，宿主細胞出現過激反應而分泌的物質也屬于標記物，這一類物質是腫瘤細胞良惡性病變或轉變過程細胞特征、腫瘤擴散速率和發展的反映[9-11]。據世界衛生組織在《全球癌癥報告》的報道顯示，原發性及繼發性肝癌在中國新增病例已居世界第一，治療此類癌癥刻不容緩[12]。由于致癌因子的累積作用，原發性及繼發性肝癌發病年齡一般在40歲后，因此如何提前檢測和診斷肝癌是治療最好方法之一[13]。影像學技術定位肝癌患者早期發現率極低，即使中晚期發現肝癌，治療也會對患者及其家人造成身心上的巨大壓力。腫瘤標記物成為早期發現和診斷消化系統癌性疾病首選，本研究探討的腫瘤標記物聯合檢測針對于肝臟腫瘤的診斷，極大降低漏檢率[14-15]。

本研究表明，各組患者單一腫瘤標記物指標不具有代表性，單獨檢測時指標會出現陰性，所以單獨檢測帶有一定局限性。各腫瘤標記物單獨檢測時意義差別不大，雖然AFP致力于肝癌早期發現，而CA-125和CA19-9則更傾向檢測膽道系統惡性腫瘤，但是多種惡性腫瘤均會有各腫瘤標記物的變化。本研究進行了腫瘤標記物單獨檢測，兩兩聯合檢測和多種聯合實驗，實驗發現聯合多種腫瘤標記物(AFP、CEA、CA19-9和CA-125)檢測有效提高了檢測敏感度，這對原發性及繼發性肝癌早期診斷意義重大，能有效降低漏診率。研究發現同一種腫瘤標記物可由多種腫瘤細胞或同種腫瘤細胞不同組織和器官分泌，而不同標記物又可以僅有1種腫瘤細胞分泌，因此結合多種腫瘤標記物檢測更具全面性，能彌補單一的不足，并且聯合檢測能提高各腫瘤標記物的敏感度。臨床資料分析表示，乙肝患者體內肝功能異常，體內AFP較非乙肝患者高，會干擾對肝臟惡性腫瘤檢測，檢測時應考慮這一因素。同時，實驗發現患有乙肝的患者患上肝癌的幾率大于無乙肝患者的，也就是說乙肝與肝癌的發生有一定聯系，在肝癌患者中乙肝病毒攜帶者和乙肝患者的AFP較無乙肝病史的高，因此也要考慮乙肝對聯合檢測的影響。

綜上所述，臨床檢測原發性及繼發性肝癌要結合多種腫瘤標記物，可提高檢測準確率，同時要將患者有無乙肝病史情況加以考慮，進一步提高檢測準確率。