肝細(xì)胞生長因子受體在食管癌中的研究進(jìn)展△

閆茂慧，陳靜，俞偉，馬娜綜述，曲寶林，馮林春審校

解放軍總醫(yī)院放射治療科，北京1008530

食管癌是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，每年全世界范圍內(nèi)新發(fā)食管癌患者57.2萬人，約有50.9萬人死于食管癌[1-2]。目前，食管癌的發(fā)病機(jī)制尚不明確，有效地實現(xiàn)早期預(yù)防仍是研究的難點；大部分食管癌患者在就診時已為中晚期，傳統(tǒng)的手術(shù)治療及放化療療效較差，所以，提高食管癌患者的治療效果，延長患者的生存期并緩解患者痛苦，是臨床上亟待解決的難題之一[3]。近年來，惡性腫瘤基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)以及代謝組學(xué)等生物學(xué)研究的快速發(fā)展，為食管癌的早期診斷、早期治療及預(yù)后監(jiān)測提供了新的線索和依據(jù)。肝細(xì)胞生長因子受體（hepatocyte growth factor receptor，HGFR，也稱c-met）是一種具有自主磷酸化活性的蛋白，可調(diào)節(jié)酪氨酸激酶活性，主要表達(dá)于各種上皮細(xì)胞內(nèi)，與肝細(xì)胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）結(jié)合可激活下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子（signal transducer and activator of transcription，STAT）、磷酸肌醇3-激酶（phosphatidylinosiol 3-kinase，PI3K）、絲裂原激活蛋白激酶（mitogen-activation protein kinase，MAPK）等一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移[4]。研究表明，c-met與食管癌的發(fā)生發(fā)展、臨床分期、放化療敏感性及預(yù)后具有一定的關(guān)系[5]。本文就c-met在食管癌中的研究進(jìn)展作一綜述。

1 c-met與食管癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系

食管癌的發(fā)生發(fā)展過程極其復(fù)雜，多項研究表明其與c-met的關(guān)系密切。楊鋒等[6]采用免疫組織化學(xué)法（immunohistochemistry，IHC）檢測88例食管癌組織中c-met的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，c-met在食管癌組織中的陽性表達(dá)率為75.00%，c-met高表達(dá)與食管癌臨床分級、分期顯著相關(guān)，提示c-met的高表達(dá)與食管癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。鄭緒斌等[7]采用IHC檢測69例食管癌組織及30例癌旁組織中的c-met表達(dá)情況，結(jié)果顯示c-met在食管癌組織及癌旁組織中的陽性表達(dá)率分別為75.36%、23.33%，c-met的陽性表達(dá)率與食管癌的分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，表明c-met與食管癌的發(fā)生、發(fā)展具有一定的關(guān)系。徐志彬等[8]采用IHC檢測HGF、c-met及血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白在20例正常食管組織、30例低級別上皮內(nèi)瘤變組織、50例高級別上皮內(nèi)瘤變組織、25例早期食管癌組織、25例進(jìn)展期食管癌組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示在食管上皮組織中c-met陽性表達(dá)率依次為0（0/20）、10%（3/30）、30%（15/50）、36%（9/25）、56%（14/25），5種組織中HGF、c-met、VEGF蛋白的表達(dá)及微血管密度（microvascular density，MVD）值比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），表明隨著食管癌變進(jìn)展，食管上皮組織中HGF、c-met及間質(zhì)中VEGF蛋白表達(dá)水平均升高，HGF/c-met蛋白通路可刺激間質(zhì)成纖維細(xì)胞分泌VEGF蛋白，促進(jìn)間質(zhì)微血管形成，加速腫瘤進(jìn)展。楊紹廣[9]采用IHC檢測86例食管癌組織及對應(yīng)癌旁組織中c-met的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，食管癌組織中c-met陽性表達(dá)率明顯高于癌旁組織，c-met高表達(dá)與食管癌臨床分級、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示可以通過檢測c-met的表達(dá)情況進(jìn)行食管癌的早期診斷，評估腫瘤惡性程度。Jiang等[10]采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）檢測到微小RNA-1（microRNA-1，miRNA-1）在食管鱗癌組織中的表達(dá)水平低于癌旁正常組織，使用裸鼠異種移植模型，證實miRNA-1能顯著抑制食管鱗癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)miRNA-1是HGF/c-met信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中c-met、細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）和周期蛋白依賴性激酶 4（cyclin dependent kinase 4，CDK4）的作用靶點，miRNA-1直接靶向c-met、cyclin D1和CDK4，抑制食管鱗癌細(xì)胞生長，c-met能促進(jìn)食管鱗癌細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展。綜上所述，c-met在食管癌組織中高表達(dá)，參與了HGF/c-met信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，與食管癌的發(fā)生、發(fā)展過程關(guān)系密切。

2 c-met與食管癌臨床分期的關(guān)系

在中國，大部分食管癌患者就診時臨床分期已為中晚期，治療難度較大且療效欠佳，因此尋找能夠?qū)崿F(xiàn)早期診斷的生物標(biāo)志物具有重要意義。多項研究證實，c-met與胃癌[11]、肺癌[12]、喉癌[13]的臨床分期關(guān)系密切，但關(guān)于c-met與食管癌臨床分期關(guān)系的研究報道較少。周子浩等[14]研究納入了100例食管鱗癌患者，采用IHC檢測食管癌組織中cmet的表達(dá)情況，根據(jù)c-met的平均表達(dá)水平將食管癌患者分為c-met陰性組（c-met不表達(dá)）和c-met陽性組（c-met有表達(dá)），并對兩組患者的臨床特征、總生存期進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，c-met陰性組及cmet陽性組患者分別為51例、49例，c-met陽性組患者較c-met陰性組患者臨床分期更高，分化程度更低。趙楊等[15]采用IHC檢測30例食管正常黏膜組織、70例食管癌組織中HGF及c-met的表達(dá)情況，并分析其與微淋巴管密度（lymphatic microvessel density，LMVD）及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間的關(guān)系，結(jié)果顯示，食管癌組織中HGF、c-met表達(dá)水平及LMVD均明顯高于食管正常黏膜組織，并且HGF及c-met表達(dá)與食管癌LMVD及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)，提示HGF及c-met在食管癌中的過表達(dá)可促進(jìn)食管癌微淋巴管形成及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，與食管癌N分期具有一定關(guān)系。陳焱等[16]采用IHC檢測80例食管癌組織及癌旁組織中的c-met表達(dá)情況，結(jié)果顯示食管癌組織和癌旁組織中c-met陽性表達(dá)率分別為80.00%、6.25%，TNM分期為Ⅲ+Ⅳ期、浸潤深度為T3～4期、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌患者的c-met陽性表達(dá)率分別高于TNM分期為Ⅰ+Ⅱ期、浸潤深度為T1～2期、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌患者。綜上所述，c-met陽性表達(dá)率高低與食管癌臨床分期有關(guān)。

3 c-met與食管癌放化療敏感性的關(guān)系

食管癌的治療手段主要包括手術(shù)治療、放療、化療等，但臨床上常出現(xiàn)不同患者采用同樣的治療方案的現(xiàn)象，治療效果存在明顯差異。c-met高表達(dá)是食管癌轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的重要因素，是放化療失敗的主要原因之一。c-met已被證實是細(xì)胞存活、增殖和遷移的關(guān)鍵因子，但是關(guān)于其對食管癌放化療敏感性影響的研究較少。Chen等[17]報道了c-met抑制劑foretinib對ECA-109和TE-13細(xì)胞的放射增敏作用，結(jié)果顯示foretinib以劑量依賴的方式阻滯食管癌細(xì)胞c-met信號通路，導(dǎo)致ECA-109和TE-13細(xì)胞活力下降，維甲酸預(yù)處理可協(xié)同促進(jìn)輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡并使細(xì)胞阻滯在G2/M期且降低食管癌細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)能力；體內(nèi)研究證實，foretinib聯(lián)合放射治療與單獨使用兩種方法相比，可明顯減輕腫瘤負(fù)荷；提示c-met在食管癌放射增敏調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用，并且foretinib主要通過c-met信號途徑提高ECA-109和TE-13細(xì)胞的放射增敏作用，foretinib可作為食管癌的潛在放射增敏劑。Goltsov等[18]采用了蛋白質(zhì)印跡法檢測c-met和人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）在食管癌細(xì)胞中的表達(dá)水平和磷酸化狀態(tài)，通過轉(zhuǎn)染具有特異性siRNA或表達(dá)HER2的質(zhì)粒來調(diào)控c-met和HER2的表達(dá)水平，以c-met和人表皮生長因子受體1（epidermal growth factor receptor 1，EGFR1）或EGFR2的小分子抑制劑（分別為維甲酸和拉帕替尼）作為單藥或聯(lián)合用藥，觀察其對食管癌細(xì)胞生長、凋亡及下游信號通路的影響，結(jié)果顯示，foretinib能抑制c-met的磷酸化，這與食管癌細(xì)胞生長的減少以及蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，又稱AKT）和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase，ERK）磷酸化的抑制有關(guān)；維甲酸對ESO51細(xì)胞生長的抑制作用在具有c-met擴(kuò)增和過表達(dá)的ESO51細(xì)胞中最為顯著，維甲酸或siRNA特異性敲除c-met可阻滯HGF/c-met信號轉(zhuǎn)導(dǎo)誘導(dǎo)ESO51細(xì)胞凋亡；聯(lián)合應(yīng)用foretinib和拉帕替尼通過AKT和ERK有效阻滯c-met和HER2信號通路，顯著抑制OE33細(xì)胞生長，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而克服單藥耐藥。c-met與食管癌放化療敏感性的研究較少，有待進(jìn)一步研究。

4 c-met與食管癌預(yù)后的關(guān)系

食管癌的預(yù)后與患者臨床分期、病理分型與分級、治療方法、腫瘤大小及腫瘤位置相關(guān)[19]。近年來隨著食管癌生物學(xué)研究的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)食管癌預(yù)后與其生物學(xué)行為密切相關(guān)，尤其是c-met表達(dá)失調(diào)對于食管癌的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移有著重要作用。周子浩等[14]的研究納入了食管鱗癌患者100例，c-met陰性表達(dá)組及c-met陽性表達(dá)組患者的生存期分別為48.2個月和30.9個月，提示c-met可能是預(yù)測食管鱗癌患者生存期的影響因子。Jardim等[20]采用熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）法檢測了34例食管癌患者的c-met擴(kuò)增情況，結(jié)果顯示有3例（8.8%）患者存在c-mett擴(kuò)增，存在c-met擴(kuò)增及未存在c-met擴(kuò)增的患者中位總生存期分別為3個月和5個月，提示c-met擴(kuò)增是影響食管癌患者預(yù)后不良的因素之一。朱曉峰等[21]應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測食管鱗癌組織和癌旁正常食管組織中c-metmRNA的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，c-metmRNA陽性表達(dá)與陰性表達(dá)患者在術(shù)后5年內(nèi)發(fā)生復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的例數(shù)分別為16例（59.3%）和5例（21.7%），c-metmRNA陽性表達(dá)患者的5年生存率為25.9%，明顯低于陰性表達(dá)患者的60.9%；Cox回歸多因素分析提示c-metmRNA陽性表達(dá)是影響食管鱗癌患者預(yù)后的獨立危險因素。Xu等[22]采用IHC檢測了90例晚期食管鱗癌患者食管鱗癌組織中c-met的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，c-met在晚期食管鱗癌組織中的陽性表達(dá)率為43.3%，c-met陽性表達(dá)與陰性表達(dá)患者的生存期分別為253天和422天，提示c-met可能是晚期食管鱗癌預(yù)后的獨立影響因素。Xu等[23]采用IHC法檢測了180例Ⅱb～Ⅲc期食管鱗癌患者的食管鱗癌組織中c-met的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，c-met高表達(dá)患者和低表達(dá)患者（包括陰性表達(dá)患者）的生存期分別為41.9個月和56.7個月，多因素分析顯示c-met高表達(dá)是預(yù)測生存期的唯一影響因素。Ozawa等[24]采用IHC法檢測了104例手術(shù)治療后的食管鱗癌患者食管鱗癌組織中c-met的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，c-met高表達(dá)與腫瘤侵犯深度、病理分級密切相關(guān)，c-met高表達(dá)患者生存率降低，多因素分析發(fā)現(xiàn)c-met高表達(dá)是食管鱗癌預(yù)后的獨立影響因素。Shah等[25]的研究納入了晚期胃食管結(jié)合部癌患者，其中62例觀察組患者給予onartuzumab聯(lián)合化療治療，62例對照組患者給予安慰劑聯(lián)合化療，結(jié)果顯示，兩組c-met陽性表達(dá)患者的中位無進(jìn)展生存期分別為5.95個月和6.80個月，中位生存期分別為8.51個月和8.48個月，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），提示onartuzumab沒有改善c-met陽性表達(dá)食管癌患者的生存。Catenacci等[26]分別采用IHC、FISH法及選擇反應(yīng)監(jiān)測方法（selected reaction monitoring，SRM）檢測了447例胃食管腺癌患者組織中的c-met表達(dá)情況，3種檢測方法結(jié)果顯示，c-met高表達(dá)或擴(kuò)增的食管癌患者生存期較短。Ren等[27]的一項薈萃分析也證實c-met高表達(dá)提示食管癌患者預(yù)后不良，c-met可作為食管癌患者潛在的新的預(yù)后生物標(biāo)志物。rilotumumab單克隆抗體作為c-met及HGF靶向抑制劑，在治療晚期胃食管腺癌中均未顯示出理想療效且不良反應(yīng)難以耐受[28-29]。

5 小結(jié)與展望

c-met與食管癌的發(fā)生發(fā)展、臨床分期、放化療敏感性及預(yù)后關(guān)系密切，有望成為食管癌早期診斷、早期治療及預(yù)后監(jiān)測的生物標(biāo)志物之一。但是，c-met在檢測技術(shù)上依賴IHC、FISH、SRM等技術(shù)且需要病理組織，檢測方法不方便；另外食管癌作為一種全身性疾病，治療需注重個體化治療，無論是現(xiàn)在還是未來，臨床研究的方向是低毒、有效的治療，目前臨床上還未研發(fā)出針對食管癌安全有效的c-met靶向抑制劑，這些都有待進(jìn)一步研究解決。