銀屑病患者CC趨化因子配體20、IL-36及其受體拮抗劑IL-36Ra水平與脂代謝相關性分析

周慧麗

(河北省任丘市人民醫院皮膚性病科，河北 任丘 062550)

銀屑病是一類可以影響關節以及皮膚的慢性炎癥性皮膚病，具有一定的遺傳傾向性，組織學上主要以血管增生分化改變、炎癥滲入、角質形成細胞過度增殖等為特征[1]。銀屑病通常伴有不同程度的心血管疾病、2型糖尿病、血脂異常、高血壓以及肥胖等代謝性疾病有關[2]。銀屑病的疾病發生進展與脂肪因子變化以及脂代謝紊亂具有一定的相關性[3]。脂代謝通常會受到酶、激素、神經體液、遺傳、肝臟等的調節，當上述因素發生一定的異常時，可引起有關器官以及脂代謝紊亂發生一定的諸如動脈粥樣硬化、脂肪肝、肥胖癥、高脂血癥等病理生理變化[4]。研究[5]表明，細胞炎癥因子受體以及細胞炎癥因子可以一定程度對促進局部角質細胞成熟，IL-36以及IL-36Ra可以通過對巨噬細胞、骨髓來源性樹突狀細胞以及單核細胞進行富集，進而誘導機體自身免疫調控的異常，加劇慢性皮膚炎癥反應。CCL20主要是由被活化的角質形成細胞產生，與銀屑病的脂代謝具有一定的相關性。報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇我院2016年5月至2018年6月收治的96例銀屑病患者作為研究對象，根據患者的病情的嚴重程度將其分為尋常性銀屑病(PV組，n=42)和泛發性膿皰性銀屑病(GPP組，n=54)兩組，另取同期來我院檢查的50例健康人作為對照組。其中PV組患者男26例，女16例，年齡19～56歲，平均年齡(28.64±5.69)歲，BMI指數(22.35±1.36) kg/m2；GPP組患者男32例，女22例，年齡18～55歲，平均年齡(28.32±5.73)歲，BMI指數(22.41±1.30) kg/m2；對照組受試者男30例，女20例，年齡18～55歲，平均年齡(28.32±5.78)歲，BMI指數(22.12±1.43)kg/m2。上述三組受試者在年齡、性別、BMI指數等一般資料方面差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。診斷標準、納入和排出標準見相關資料[6]。

1.2方法 (1)血脂水平測定 所有受試者入院后，抽取其5ml清晨空腹靜脈血，加入35 μL 10%的乙二胺四乙酸抗凝，通過離心機(Ortho BioVue；強生(上海)醫療器材有限公司)在4 ℃、離心半徑為10.5 cm、轉速3 000 r/min條件下，離心10 min，分離得到血清，冰箱-75 ℃條件下保存，待測。采用采用全自動生化分析儀(CS-6400型，迪瑞醫療科技股份有限公司)，通過過氧化氫酶清除法對低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平測定；通過甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法對總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)水平進行測定。(2)血清IL-36以及IL-36Ra水平測定 選用標準品稀釋液將標準品進行復溶，之后靜置混勻，將對比稀釋后的7個濃度加入至板條孔中，空白對照孔不加，之后再將100 μL的檢測液加入至每一個孔中，通過封蓋板密封，置于室溫條件反應120 min，再用PBS液體進行3次洗滌，除空白對照孔以外，每個孔中再次加入100 μL的檢測液，室溫條件下，進行為期1 h的孵育，再用PBS液體進行3次洗滌，每個孔中再加入50 μL的底物，避光條件下，進行為期25 min的孵育，最后將終止液加入其中，5 min后于450 nm處進行吸光度的測定。IL-36Ra以及IL-36α、IL-36β、IL-36γ抗體均購于上海勁馬生物科技有限公司，羅氏檢測公司為其提供相配套的試劑，操作方法嚴格按照說明書執行。(3)血清CCL20以及CCR6水平測定 采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法對血清CCR6和CCL20濃度進行測定，試劑盒購于通蔚試劑(上海)有限公司，操作方法嚴格按照說明書執行。

2 結 果

2.1三組受試者血脂水平比較 PV組和GPP組患者的TG水平均明顯高于對照組，TC、LDL-C以及HDL-C水平均明顯低于對照組，且GPP組患者的上述指標變化明顯更為顯著，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組受試者血脂水平比較

注：與對照組相比，*P<0.05；與PV組相比，△P<0.05。

2.2三組受試者血清IL-36以及IL-36Ra水平比較 三組受試者的IL-36α、IL-36γ水平差異無統計學意義(P>0.05)。PV組和GPP組患者的IL-36β水平明顯高于對照組，IL-36Ra水平明顯低于對照組，且GPP組患者的上述指標變化明顯更為顯著，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 三組受試者血清IL-36以及IL-36Ra水平比較

注：與對照組相比，*P<0.05；與PV組相比，△P<0.05。

2.3三組受試者血清CCL20以及CCR6水平比較 PV組和GPP組患者的血清CCL20以及CCR6水平均明顯高于對照組，且GPP組患者的上述指標變化明顯更為顯著，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 三組受試者血清CCL20以及CCR6水平比較

注：與對照組相比，*P<0.05；與PV組相比，△P<0.05。

2.4銀屑病患者CCL20、IL-36及IL-36Ra水平與脂代謝相關性 銀屑病患者的CCL20水平與TC、LDL-C、HDL-C水平呈現負相關，與TG水平呈現正相關；IL-36Ra水平與TC、LDL-C、HDL-C水平呈現正相關，與TG水平呈現負相關；IL-36β水平與TC、LDL-C、HDL-C水平呈現負相關，與TG水平呈現正相關，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 銀屑病患者CCL20、IL-36及IL-36Ra水平與脂代謝相關性

3 討 論

臨床相關的病例對照研究以及橫斷面研究顯示，銀屑病關節炎或者銀屑病患者大都表現為相對較高的血脂水平[8]。對于文中的銀屑病血脂水平研究結果，可能是由于TC包含有各種結合脂蛋白中的膽固醇量之和，在人體內以膽固醇酯或者游離膽固醇的形式存在[9]。TG是一種不溶于水的經過脂肪酸酯化的甘油分子，在載脂蛋白的輔助下，形成脂蛋白，進入血液，隨后進入機體各個組織進行代謝。LDL-C是由極低密度脂蛋白經過酯酶水解而成，是血液中含有TC量最高的一種脂蛋白；HDL-C是一種具有特殊轉運方式的脂蛋白，可以將外周血中的TC向肝臟中進行轉運，之后進行相應的分解代謝，可以有效的避免LDL-C在血管壁上的沉積，從而起到一定程度的抗動脈粥樣硬化效果[10]。另外在銀屑病患者而血液中的TG水平較高時，還可使機體內的肝脂肪酶和具有脂蛋白分解功能的膽固醇酯轉運蛋白水平增加，進而促進機體內的HDL代謝分解。而病情更為嚴重的膿皰性銀屑病患者TG水平最高，可能是由于TG是一種可以保護銀屑病的分子[11]。另外，銀屑病主要以毛細血管擴張充血、棘層肥厚以及表皮角化過度為主要的病理變化，會一定程度引起機體免疫功能紊亂，進而導致機體發生代謝性綜合征，造成脂代謝紊亂。

關于文中相關性結果，可能是由于IL-36是一種包含有IL-36α、IL-36β以及IL-36γ的炎癥細胞因子，IL-36需要與機體內部的特異性受體IL-36R相結合(IL-36Ra是其受體拮抗劑)，并在諸如削刮內皮炎癥性疾病、CD4+T淋巴細胞調節異常以及紫外線等外源性因素的刺激下，發揮促炎癥作用[12]。而IL-36、IL-36R以及IL-36Ra主要在機體食道、氣管、皮膚、胸腺、支氣管以及內臟器官的纖維結締組織中進行表達，B細胞、單核細胞、角質形成細胞在受到外界刺激后可被活化，進行合成分泌IL-36[13]。IL-36R、IL-36以及IL-1受體輔助蛋白形成一條新的傳導信號的通路，可以對靶基因的表達起到很好的促進作用，發揮促炎癥效果，而IL-36R與IL-36特異性結合形成復合物后，將不能夠對信號通路進行激活，降低機體抗炎癥效果[14]。IL-36Ra、IL-36與銀屑病的病發關系密切。有學者[15]人對于小鼠體外研究結果顯示，在患有銀屑病的小鼠中會出現IL-6的過度表達，同時小鼠表現為皮膚表面多層鱗屑以及增厚，組織病理學以真皮內炎細胞浸潤和棘層肥厚為主要表現，與人銀屑病患者具有相似的臨床表現，同時抗菌肽、IL-23、IL-22、IL-17等銀屑病相關基因的表達較多，而病情相對較為嚴重的泛發性膿皰性銀屑病上述表現以及炎癥因子表達癥狀加重，再結合文中對于PV和GPP患者血脂水平研究結果，得到銀屑病患者的CCL20、IL-36及IL-36Ra水平與脂代謝存在密切的相關性。

綜上所述，銀屑病患者血清CCL20、IL-36以及IL-36Ra與其血脂水平之間具有一定的相關性，可為銀屑病的臨床診斷治療提供參考。