β-地中海貧血表型兒童地中海貧血基因突變分析

彭楊

【摘要】 目的 探討分析β-地中海貧血表型兒童地中海貧血發生情況及基因突變類型。方法 選取160例β-地中海貧血表型患兒作為研究對象， 對所有患兒進行β-地中海貧血基因檢測、α-地中海貧血基因檢測。分析β-地中海貧血表型患兒的基因突變情況。結果 160例β-地中海貧血表型患兒中， 臨床檢查確診為β-地中海貧血152例， 占比為95.00%（152/160）， 其中合并α-地中海貧血21例， 占比為13.82%（21/152）， β-地中海貧血患兒中， 發現11種突變、30種基因類型， 其中純合子突變13例（8.55%）， 以CD41-42（-TCTT）/CD41-42（-TCTT）、CD17（A→T）/CD17（A→T）純合子為主， 分別占4.60%、3.95%;雙重雜合子突變30例（19.74%）， 其中， CD41-42（-TCTT）/CD17（A→T）、CD41-42（-TCTT）/IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TCTT）/CD71-72（+A）位居前3位。雜合子突變109例（71.71%）， 主要以IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TTCT）為主。合并α-地中海貧血患兒基因突變檢測結果：6種α-地中海貧血基因突變、11種基因類型， 其中以純合子--sea/-αα、-α3.7/-α3.7、-α4.2/-α4.2最為常見， 分別占19.05%、14.29%、14.29%， 其次為雜合子及雙重雜合子。結論 就本地區而言， β-地中海貧血表型患兒存在突變類型多樣化、基因類型多樣化的現狀， 且發病率較高， 應采取積極有效的措施， 加強地中海貧血的相關干預工作， 可以有效減少低地中海貧血兒的出生。

【關鍵詞】 β-地中海貧血;兒童;基因;檢測;突變

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.04.043

地中海貧血又被稱之為海洋性貧血， 主要是由于珠蛋白基因缺失、珠蛋白基因存在缺陷而導致其在合成的過程中存在一定的障礙。臨床上， 根據患者病因所涉及的不同珠蛋白鏈， 地中海貧血可進一步劃分為α-地中海貧血、β-地中海貧血、γ-地中海貧血和δ-地中海貧血。臨床上， α-地中海貧血、β-地中海貧血最為常見[1]。其中， β-地中海貧血在我國最為常見， 尤其是在長江流域以南地區， 發病率較高。根據相關研究資料顯示， 廣西β-地中海貧血發病率高達6.43%， 嚴重影響著兒童的健康成長和發育[2]。因此， 必須要了解本地區兒童β-地中海貧血的發病情況及基因突變類型， 并在此基礎上進行有效的臨床治療。為此， 本院選取2017年1月～2018年1月收治的160例β-地中海貧血表型患兒作為研究對象， 旨在探究β-地中海貧血表型兒童地中海貧血發生情況及基因突變類型及合并ɑ-地中海貧血的發生率， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2017年1月～2018年1月本院收治的160例β-地中海貧血表型患兒作為研究對象。所有患兒均進行血液聯合血紅蛋白組分分析， 并確診為β-地中海貧血表型。其中， 男103例， 女57例;年齡0.9～15.0歲， 平均年齡（7.95±6.05）歲。

1. 2 方法

1. 2. 1 儀器和試劑 擴增儀（Thermo公司， 型號C1000PCR）、核酸提取儀（廈門致善公司， 型號Lab-Aid 820）、凝膠成像分析系統（BIO公司， 型號GELOOCXR）、超微量分光光度計（Thamo公司， 型號TL600B）。DNA提取試劑為儀器配套試劑， PCR反應試劑（深圳亞能公司）。

1. 2. 2 檢測方法 靜脈抽取患兒2 ml血液， 并進行EDTA抗凝， 再利用核酸提取儀， 并嚴格按照其操作步驟和方法， 進行DNA提取。然后采用膽管多重PCR擴增結合反響點雜交技術， 對患兒進行17種β-地中海貧血突變檢測;對于已經確診的β-地中海貧血患兒再次進行6種α-地中海貧血基因突變檢測。

2 結果

2. 1 臨床診斷結果 160例β-地中海貧血表型患兒中， 臨床檢查確診為β-地中海貧血152例， 占比為95.00%（152/160）， 其中合并α-地中海貧血有21例， 占比為13.82%（21/152）。

2. 2 β-地中海貧血患兒基因突變情況 β-地中海貧血患兒中， 發現11種突變、30種基因類型， 其中純合子突變13例（8.55%）， 以CD41-42（-TCTT）/CD41-42（-TCTT）、CD17（A→T）/CD17（A→T）純合子為主， 分別占4.60%、3.95%;雙重雜合子突變30例（19.74%）， 其中， CD41-42（-TCTT）/CD17（A→T）、CD41-42（-TCTT）/IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TCTT）/CD71-72（+A）位居前3位。見表1。雜合子突變109例（71.71%）， 主要以IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TTCT）為主， 其次為CD17（A→T）、CD71-72（+A）、-28（A→G）、CD43（G→T）、CD27-28（+C）、βE（GAG→AAG）。

2. 3 合并α-地中海貧血患兒基因突變情況 合并α-地中海貧血患兒基因突變檢測結果：6種α-地中海貧血基因突變、11種基因類型， 其中純合子突變10例（47.62%）， 以--sea/-αα、-α3.7/-α3.7、-α4.2/-α4.2最為常見， 分別占19.05%、14.29%、14.29%;其次為雜合子9例（42.86%）， 其中以ΑWSα/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα為前3位， 分別占據14.29%、9.52%、9.52%。雙重雜合子突變2例（9.52%）， 分別為β41-42/βN合并--SEA/αα、β654/βN合并--SEA/αα。見表2。

3 討論

根據臨床研究中顯示， 地中海貧血屬于一種單基因遺傳性疾病， 在世界上具有較高的發病率。在4種地中海貧血的類型中， 以β-地中海貧血最為常見。根據流行性病學相關研究資料顯示， 地中海貧血遍布世界各地， 其中以地中海地區、中非洲、亞洲、南太平洋地區為主要病發地區[3]。在我國也具有較高的發病率， 尤其是以長江流域以南的地區兩廣地區、貴州、四川等地區為首[4]。

臨床上， 輕度患兒常常表現輕度貧血、容易疲勞等， 多無自覺癥狀， 不易被察覺;中度患兒常常出現中度貧血， 且大多患兒可以成長至成年;重度患兒自出生之日起便出現貧血、肝脾重大、黃疸、發育不良， 并常常導致一些嚴重的并發癥， 如急性心包炎、繼發性脾功能亢進、繼發性血色病等。就目前而言， 臨床上尚未出現有效的治療方法， 患兒必須要定期進行輸血、應用螯合劑除鐵以維持生命[5， 6]。可以說， 地中海貧血不僅影響著患兒的生命健康， 也給家庭帶來了沉重的負擔。由于地中海貧血屬于一種單基因遺傳性疾病， 具有高度的遺傳異質性， 可促使患者體內的基因發生突變。因此， 在對地中海貧血兒童進行臨床治療前， 加強其基因突變和疾病發生情況的分析尤為重要[7， 8]。

本次研究結果充分表明：地中海貧血兒童基因突變、基因類型多樣。其中， β-地中海貧血患兒中， 發現11種突變、30種基因類型， 其中以CD41-42（-TCTT）/CD41-42（-TCTT）、CD17（A→T）/CD17（A→T）純合子為主， 其次為CD41-42（-TCTT）/CD17（A→T）、CD41-42（-TCTT）/IVS-Ⅱ-654（C→T）、CD41-42（-TCTT）/CD71-72（+A）等雙重雜合子突變;合并α-地中海貧血患兒中， 發現6種α-地中海貧血基因突變、11種基因類型， 其中以純合子--sea/-αα、-α3.7/-α3.7、-α4.2/-α4.2最為常見， 雜合子以ΑWSα/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα為前3位。雙重雜合子突變分別為β41-42/βN合并--SEA/αα、β654/βN合并--SEA/αα。

綜上所述， β-地中海貧血表型患兒基因類型多樣化， 必須要據此采取有效的措施， 進行科學的干預， 以有效降低其發生率。

參考文獻

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[8] 張強， 范歆， 何升， 等.廣西壯族自治區β-地中海貧血基因突變分析.中華地方病學雜志， 2014， 33（6）：615-618.

[收稿日期：2018-07-27]