不同水平的植物乳桿菌代謝產物對肉雞生長性能、糞微生物菌群及絨毛形態的影響

龔 勝，鄧樹勇，甘凌秀

（廣西壯族自治區畜牧研究所，廣西南寧 530001）

臨床上抗生素耐藥性是一個世界性問題，大多數風險評估研究認為，食品性動物耐藥性的主要因素是由于抗生素生長促進劑的使用，它們促使耐藥性的發展和傳播，威脅到許多疾病的控制能力（Chesson，2006）。雖然抗生素具有促生長、提高飼料利用率和預防胃腸道感染等作用，但抗生素耐藥性是限制其使用的主要原因。目前全期已經有幾種細菌對抗生素產生了耐藥性（Aarestrup，1995），引起世界衛生組織（WHO）對抗生素耐藥性的廣泛關注，因此，歐盟在早些年就已全面禁止在飼料中添加抗生素。目前對腸球菌、鏈球菌、沙門氏菌、彎曲桿菌和大腸桿菌的治療也因抗生素耐藥性帶來一些問題（Wegener，2006）。從豬身上分離的大腸桿菌也被證實對新霉素、土霉素、萘二酸和氯霉素產生了耐藥性（Loh等，2006）。因此，在動物生產中尋找抗生素的替代品是急迫和重要的。已有大量研究表明，天然代謝產物對家禽生產具有重要作用，與活微生物相比，代謝物在貯存、運輸等方面具有優勢。因此，本試驗以肉仔雞為研究對象，評估日糧中添加不同水平的植物乳桿菌代謝物對肉雞生長性能、糞微生物菌群、揮發性脂肪酸含量和小腸絨毛形態的影響，為有益菌代謝產物的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 試驗選擇健康、體重一致的1日齡AA肉雞576只，隨機分為6組，每組4個重復，每個重復24只雞。試驗采用單因素設計，共6種日糧，對照組飼喂基礎日糧+80 mg/kg新霉素，處理組分別在基礎日糧中添加0.1%，0.2%，0.3%，0.4和0.5%的植物乳桿菌代謝產物（購自北京英惠爾生物科技有限公司）。本試驗分為1～21 d和22～42 d兩個階段，共進行42 d。基礎日糧組成及營養水平見表1。

表1 1～41 d各組日糧組成及營養水平

1.2 數據和樣品收集 每周對各重復雞只進行個體稱重，統計飼料用量。試驗結束后計算試驗全期各重復雞只的總增重、平均日增重、平均日采食量和飼料轉化率。

1.3 糞細菌和揮發性脂肪酸含量的測定 試驗結束前3 d每個重復隨機選擇5只雞連續收集糞樣，將每只雞連續3 d的糞樣混合，參考Foo等（2003）的研究方法測定糞中大腸桿菌和乳酸桿菌的含量。剩余糞樣-20℃保存，取1 g樣品，加入1 mL用1.5 mol/L硫酸稀釋的24%偏磷酸。參考Jin等（1998）的研究方法測定糞中總揮發性脂肪酸（VFA）、乙酸、丙酸、丁酸和其他VFA的含量。

1.4 小腸絨毛形態 試驗結束后，每個重復隨機選擇3只雞進行屠宰，收集小腸腸段，將十二指腸、空腸、回腸分離后，用于測定各腸段絨毛高度、隱窩深度及絨毛高度與隱窩深度比值。

1.5 統計分析 采用SPSS（19.0版）單因素方差分析（One-way ANOVA），以不同水平植物乳桿菌代謝產物為方差分析的主因素，各組差異用Tukey法進行多重比較，P＜0.05判定為差異顯著，結果以“平均數±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 不同水平植物乳桿菌代謝產物對肉雞生長性能的影響 由表2可知，處理4組較對照組、處理1組、3組和5組顯著提高了42 d肉雞末重、總增重和平均日增重（P＜0.05），其他組之間對上述指標無顯著影響（P＞0.05）。各組對肉雞平均日采食量無顯著影響。處理1組和處理3組較處理4組顯著提高了肉雞飼料轉化率（P＜0.05），其他組之間對飼料轉化率無顯著影響（P＞0.05）。

2.2 不同水平植物乳桿菌代謝產物對肉雞糞中微生物菌群和揮發性脂肪酸含量的影響 由表3可知，對照組與植物乳桿菌代謝產物組對糞中乳酸桿菌含量無顯著影響（P＞0.05）。對照組較各植物乳桿菌代謝產物組顯著提高了糞中大腸桿菌含量（P＜0.05），植物乳桿菌代謝產物組之間對糞中大腸桿菌含量無顯著影響（P＞0.05）。對照組與植物乳桿菌代謝產物組對糞中丙酸和其他揮發性脂肪酸的含量均無顯著影響（P＞0.05）。與處理4組相比，對照組、處理1、2、5組顯著降低了糞中乙酸含量（P＜0.05），處理3組與處理4組對糞中乙酸含量的影響無顯著差異（P＞0.05）。處理1組較處理3、4和5組顯著提高了糞中丁酸含量（P＜0.05）。處理4組總揮發性脂肪酸含量最高，顯著高于對照組（P＜0.05）。

表2 不同水平植物乳桿菌代謝產物對肉雞生長性能的影響

2.3 不同水平植物乳桿菌代謝產物對肉雞小腸絨毛形態的影響 由表4可知，處理4組十二指腸和空腸絨毛高度顯著高于其他各組（P＜0.05），處理2組和3組十二指腸絨毛高度顯著高于對照組、處理1和5組（P＜0.05），處理2組空腸絨毛高度顯著高于對照組、處理4和5組（P＜0.05）。處理1組回腸絨毛高度最高（P＜0.05）。對照組和處理1組十二指腸和空腸隱窩深度顯著高于處理4組和處理5組（P＜0.05），但對照組回腸隱窩深度最低（P＜0.05）。各組對小腸絨毛高度與隱窩深度比值的影響與對絨毛高度和隱窩深度的影響一致。

3 討論

3.1 日糧添加不同水平植物乳桿菌代謝物對肉雞生長性能的影響 本試驗結果發現，日糧添加0.4%植物乳桿菌代謝產物較對照組、0.1%、0.3%和0.5%植物乳桿菌代謝物組顯著提高了42 d肉雞末重、總增重和平均日增重，而0.1%和0.3%植物乳桿菌代謝物組較0.4%組顯著提高了肉雞飼料轉化率。研究表明，有益菌的代謝產物是抗生素的潛在替代物，其抗菌效果與抗生素相似（Loh等，2006）。Foo等（2003）用乳酸菌喂斷奶后的大鼠發現，乳酸菌可以提高大鼠的生長速度，Ogunbanwo等（2004）用植物乳桿菌代謝物飼喂肉雞，得到的生長性能結果與本試驗結果一致。抗菌素對動物生長性能的改善作用主要在于其對胃腸道的抑菌、殺菌作用，其殺菌作用已在SPF動物上得到證實（Butaye等，2003）。抗生素的作用機制主要包括降低由細菌產生的毒素，提高營養物質的消化吸收率，降低亞臨床感染的發生率（Butaye等，2003）

表3 不同水平植物乳桿菌代謝產物對肉雞糞中微生物菌群的影響

表4 不同水平植物乳桿菌代謝產物對肉雞小腸絨毛形態的影響

3.2 日糧添加不同植物乳桿菌代謝產物對糞中細菌及揮發性脂肪酸含量的影響 對照組較各植物乳桿菌代謝產物組顯著提高了糞中大腸桿菌含量。與0.4%植物乳桿菌代謝物組相比，對照組、0.1%、0.3%和0.5%植物乳桿菌代謝物組顯著降低了糞中乙酸含量，0.4%植物乳桿菌代謝物組總揮發性脂肪酸含量最高。本試驗結果證實了植物乳桿菌代謝物的作用，可以減少胃腸道大腸桿菌的含量，與Savadogo等（2004）的研究結果一致，認為有益菌代謝產物有廣泛的抗菌活性，可以從多方面抑制病原體，如革蘭氏陽性菌（芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、肺炎鏈球菌等）和革蘭氏陰性菌（大腸桿菌）。代謝產物可以降低胃腸道大腸桿菌感染風險（Pascual等，1999）。乳酸菌的作用機制主要從兩個方面，即作用位點和營養物質；此外，除了腸道本事的物理屏障外，乳酸菌不利于有害菌的繁殖，代謝產物具有抗菌功能（Reid，2000）。日糧添加植物乳桿菌代謝物提高了糞中揮發性脂肪酸的含量，肉雞糞揮發性脂肪酸增加的主要原因之一是隨著代謝物的添加量升高，可以提高其他腸道發酵物質的含量，如乳糖、生物胺等（Gibson和 Fuller，2000）。

3.3 日糧添加不同水平植物乳桿菌代謝物對小腸絨毛形態的影響 0.4%代謝物組十二指腸和空腸絨毛高度顯著高于其他各組，0.2%和0.3%代謝物組十二指腸絨毛高度顯著高于對照組、0.1%和0.5%代謝物組，0.2%代謝物組空腸絨毛高度顯著高于對照組、0.1%和0.5%代謝物組，上述結果與Savadogo等（2004）研究結果一致。絨毛是小腸對營養物質吸收的重要組成部分。絨毛高度越大，腸道上皮的表面積相應增加，可以促進營養物質的吸收。絨毛作為腸屏障對防御病原菌的入侵也具有積極作用，病原菌在腸上皮內正常菌群中可能會改變絨毛的滲透性，從而導致病原菌的入侵，影響養分的吸收和代謝（Podolsky，1993）。植物乳桿菌代謝物含有抗菌成分和有機酸，可以抑制病原菌的生長，從而降低細菌在腸上皮細胞定植的風險，減少腸黏膜的感染。

4 結論

日糧添加植物乳桿菌代謝產物可以改善肉雞生長性能，降低糞中大腸桿菌含量，提高小腸絨毛高度和糞中揮發性脂肪酸含量，其中日糧添加0.2%和0.4%植物乳桿菌代謝產物對肉雞增重、飼料轉化率和絨毛高度的影響表現最佳。