植物乳桿菌替代抗生素對斷奶仔豬生長性能和血清生化指標的影響

計 偉， 秦龍山， 肖定福， 吳興利， 蔡力創， 趙艷平， 謝春艷*

（1.湖南農業大學，生物科學技術學院，湖南省豬場廢棄物無害化處理與資源化利用工程研究中心；湖南省畜禽安全生產協同創新中心，湖南長沙 410128；2.江西省科學院生物資源研究所，江西南昌 330096；3.雙胞胎（集團）股份有限公司，韶關金蘋果飼料有限公司，廣東韶關512000；4.江西新世紀民星動物保健品有限公司，江西南昌 330096）

在現代養豬生產模式中，外來抗原刺激等因素會導致仔豬生長緩慢、腸道屏障受損、飼料利用率低及腹瀉等問題，嚴重影響養豬企業的經濟效益。日糧中添加恩拉霉素和喹乙醇等抗生素能促進仔豬生長（Yi等，2018；鄒成義，2011），但易引起動物腸道菌群失調和耐藥性增強。益生菌作為潛在的抗生素替代品之一，具有廣闊的應用前景（Thacker等，2014）。植物乳桿菌具有對酸的耐受性（計偉等，2018)，為其能夠順利在宿主腸道內提供條件。研究發現，日糧中添加1×109cfu/g的植物乳桿菌，豬平均日增重提高20.45%，飼料轉化率提高21.07%（Wang等，2012）。另有研究發現，植物乳桿菌LQ80發酵液態飼料，能夠提高仔豬血清免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）含量（Mizumachi等，2009）。目前關于植物乳酸菌替代恩拉霉素和喹乙醇的研究相對較少。因此，本試驗通過添加植物乳桿菌代替斷奶仔豬日糧中的抗生素，評價仔豬生長性能及血清生化指標，初步探討植物乳桿菌在正常飼喂過程中的效果，以期為其替代抗生素在斷奶仔豬階段的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 乳酸菌制劑：植物乳桿菌，活菌數≥1×108cfu/g，由湖南粒豐生物科技有限公司提供。

1.2 試驗設計 試驗采用單因素完全隨機設計，選擇杜×長×大（21±1）日齡的斷奶仔豬 120頭，隨機分成2組，每組4個重復，每個重復15頭豬?？股亟M在基礎日糧中添加800 mg/kg恩拉霉素和200 mg/kg喹乙醇。植物乳桿菌組在基礎日糧中添加0.1%植物乳桿菌。試驗在河南廣安生物科技股份有限公司寶融種豬場進行，正式試驗期14 d。

1.3 試驗日糧及飼養管理 參照NRC（2012）配制本試驗日糧，其組成及營養水平見表1。試驗期間，仔豬自由采食和飲水，消毒及免疫按照豬場常規管理進行。

表1 基礎日糧組成及營養水平

1.4 指標測定

1.4.1 生長性能 分別于試驗第0天和14天8:00空腹稱重，飼養試驗結束時，禁食12 h，自由飲水。準確記錄各組豬的喂料量與余料量，計算平均日采食量（ADFI）、日增重（ADG）和料重比（F/G）。

1.4.2 樣品采集 血清收集：試驗結束時，每個重復挑選1頭豬前腔靜脈采血10 mL，室溫靜置1 h后4℃、3000 r/min離心15 min，收集血清分裝于1.5 mL離心管中，-20℃保存待測。

1.4.3 血清生化指標 采用全自動生化分析儀（Beckman，USA）和相應的試劑盒測定血清中的總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、D-乳酸（D-LACT）、堿性磷酸酶 （ALP）、乳酸脫氫酶 （LDH）、葡萄糖（GLU）、免疫球蛋白 G （IgG）、免疫球蛋白 M（IgM）、補體 C3、補體 C4等指標。

1.5 統計分析 試驗數據采用Excel 2016進行初步整理，用SPSS 21.0軟件的獨立樣本T檢驗進行組間差異顯著性比較，結果以“平均值±標準誤”表示，以P＜0.05為差異顯著，以P＜0.01為差異極顯著。

2 結果

2.1 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬生長性能的影響 由表2可知，與抗生素組相比，植物乳桿菌組斷奶仔豬平均日增重和平均日采食量分別提高7.5%、8.8%，但未達到差異顯著水平（P＞0.05）。

表2 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬血清生化指標的影響 由表3可知，與抗生素組相比，植物乳桿菌組血清中 TP提高 19.7%（P＜0.05），DLACT降低 18.0%（P ＜ 0.05）。 血清中 ALB、ALP、LDH、GLU、TG、TC與抗生素組相比，差異均不顯著（P ＞ 0.05）。

表3 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬血清生化指標的影響

2.3 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬血清免疫指標的影響 由表4可見，與抗生素組相比，植物乳桿菌組血清中IgG和IgM含量分別提高37.2%（P ＜ 0.05）、113.5%（P ＜ 0.01）。 但血清中 C3、C4與抗生素組相比，差異不顯著（P＞0.05）。

表4 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬血清免疫指標的影響g/L

3 討論

3.1 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬生長性能的影響 近年來，乳酸菌在改善斷奶仔豬生長性能和腸道健康方面受到廣泛關注。在斷奶應激狀態下，仔豬通常會出現采食量減少、腸道消化酶活性降低和飼料利用率降低等情況，繼而導致仔豬腹瀉、腸道微生態平衡被破壞（Richard等，2012）。研究表明，外源植物乳桿菌可提高斷奶仔豬腸道微生物多樣性（Zhao等，2016）。乳酸菌在仔豬腸道內代謝產生大量消化酶，將一些不易被吸收的大分子物質分解成易吸收的物質，利于胃腸道消化吸收（Lahteinen等，2014）。此外，乳酸菌還參與蛋白質、能量、礦物元素和維生素等代謝過程，促進仔豬生長。研究表明，在試驗第35天，添加0.1%植物乳桿菌（2×108cfu/g）對斷奶仔豬的末重（FW）、ADG、ADFI及 F/G 均無顯著影響 （P>0.05）（柴建民等，2016）。在試驗第14天和28天，用1×109cfu/g的植物乳桿菌替代硫酸黏桿菌素，兩組間斷奶仔豬的生長性能指標均無顯著差異（王強等，2018）。本研究結果顯示，在試驗第14天，用0.1%植物乳桿菌代替恩拉霉素和喹乙醇對仔豬生長性能指標均無顯著差異。

3.2 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬血清生化指標的影響 血清生化指標在一定程度上可反映機體的健康狀況。本試驗結果顯示，與抗生素組相比，植物乳桿菌組斷奶仔豬血清總蛋白含量顯著提高。說明添加植物乳桿菌有助于仔豬對氮元素的利用。D-乳酸（D-LACT）是胃腸道內細菌發酵的代謝產物，正常情況下很少被吸收進入血液，而且哺乳動物不具有 D-LACT的快速降解所需要的酶系統，故生理狀態下血漿D-LACT水平一般很低。應激狀態易引起仔豬腸道形態和腸黏膜屏障受傷（欒兆雙等，2012），造成腸道黏膜通透性增加，D-LACT通過受損腸黏膜經循環入血，引起血液中 D-LACT 升高（Li等，2002；Vella和 Farrugia等，1998；Luk等，1980）。 植物乳桿菌在仔豬腸道定植對其腸道屏障有著積極作用。研究表明，植物乳桿菌通過上調腸道閉合小環蛋白-1（ZO-1）、閉鎖蛋白（Occludin）和閉合蛋白（Claudins）的 mRNA表達，穩定緊密連接蛋白的結構和分布，改善仔豬腸道屏障功能（Wu等，2016）。本試驗結果顯示，與抗生素組相比，植物乳桿菌組仔豬血清中D-LACT含量顯著降低，表明植物乳桿菌可通過降低仔豬血清D-LACT含量調節腸道屏障功能。

3.3 植物乳桿菌和抗生素對斷奶仔豬血清免疫指標的影響 免疫球蛋白是介導體液免疫的主要抗體，也是反映機體免疫功能的重要指標。IgG是血清中最主要的一種免疫球蛋白，對仔豬的呼吸道、消化道等局部黏膜免疫具有抗感染作用。而IgM是抗原刺激誘導體液免疫應答中最先產生的抗體，其具有殺菌、溶菌、促吞噬和凝集作用，在機體的早期防御中起著重要的作用。研究表明，在試驗第28天與35天，日糧中用植物乳桿菌替代抗生素對斷奶仔豬血清免疫指標均無顯著影響 （王強等，2018；柴建民等，2016）。本研究結果顯示，在試驗第14天，用植物乳桿菌代替恩拉霉素和喹乙醇可顯著提高仔豬血清IgG和IgM含量。其原因可能是斷奶后14 d與斷奶后30 d相比，后者仔豬逐漸適應周圍環境和日糧，斷奶應激逐漸減緩，免疫功能趨于穩定。而在斷奶應激恢復過程中，添加植物乳桿菌達到與添加恩拉霉素和喹乙醇一樣的生長效果，且在提高免疫功能方面更有優勢。

4 結論

與抗生素相比，日糧中添加植物乳桿菌基本不影響斷奶仔豬的生長性能，但可以顯著提高其血清中IgG和IgM含量。表明植物乳桿菌在提高仔豬免疫功能方面更有優勢。