CD44和LRP表達與前列腺腺癌發病風險的研究

馬鳳艷 黃炳臣 黃小英

【摘要】目的探討CD44與肺耐藥蛋白（LRP）在前列腺腺癌（PAC）中的表達及其關聯性。方法采用免疫組織化學SP法檢測CD44和LRP在92例PAC和40例良性前列腺增生（BPH）組織中的表達，通過Spearmans等級相關及Logistic回歸模型分析CD44和LRP表達的關聯性及其對PAC發病的影響。結果CD44和LRP在PAC腫瘤組織中的陽性率分別為46.7%和42.4%，高于BPH組的陽性率（分別為20.0%和22.5%），差異有統計學意義（P<005）;CD44和LRP表達增加PAC發病風險，對應風險值分別為3.51和2.54;PAC腫瘤組織中CD44與LRP表達呈正相關（r=0.39，P<0.01）。結論CD44與LRP的異常表達可能與PAC的發生密切相關，二者在PAC的發病過程中可能發揮重要作用。

【關鍵詞】前列腺腺癌;CD44;LRP;發病風險

中圖分類號：R737.25 文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.01.003

前列腺腺癌（Prostatic adenocarcinoma，PAC）是中老年男性常見的惡性腫瘤之一[1]。在中國，盡管前列腺癌發病率遠低于西方國家，但近年來呈明顯上升趨勢，且大多數患者初診時已經發生轉移，預后較差[2]。近年來，有研究顯示CD44和LRP的異常表達涉及一些腫瘤如腸癌等的發生和發展[3～4]，但在PAC中，它們之間是否存在關聯未見報道。本研究采用免疫組化二步法對PAC以及良性前列腺增生（Benign prostatic hyperplasia，BPH）患者的組織學標本中CD44和肺耐藥蛋白（Lung resistance-related protein，LRP）的表達進行分析，以期探討PAC中CD44和LRP的關聯性及其對PAC發病的影響。

1材料與方法

1.1材料

收集2016年1月～2017年9月間在右江民族醫學院附屬醫院病理科確診的帶有石蠟包埋組織標本的PAC患者92例，平均年齡（77.0±4.1）歲。所有患者術前均未行化療、放療及內分泌治療。此外，收集來自同一時期同一醫院的帶有石蠟包埋組織標本的BPH患者40例作為對照，平均年齡（76.0±5.7）歲。獲取所有研究對象的適量石蠟包埋組織標本用于CD44和LRP的表達分析。

1.2試劑和方法

所有組織均經4%中性甲醛固定，石蠟包埋。鼠抗人CD44單克隆抗體、鼠抗人LRP單克隆抗體、SP即用型免疫組化試劑盒及DAB顯色劑均購自福州邁新公司。石蠟組織切片厚4 μm，按照說明書的操作規范，使用免疫組化SP法對所有標本進行CD44和LRP的染色分析。本研究中，我們采用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照，用已知陽性的大腸癌組織作陽性對照。

1.3統計學方法

應用SPSS 17.0軟件進行統計學分析，計數資料采用百分率進行統計描述，統計推斷用χ2檢驗來分析，相關性分析采用Spearmans等級相關。檢驗水準：α=0.05，雙側檢驗。

2結果

2.1CD44和LRP表達對PAC發病的影響

CD44在BPH和PAC組織中的陽性率分別為20.0%（8/40）和46.7%（43/92），BPH組織中CD44的陽性率明顯低于PAC組織，差異有統計學意義（P<005）;而LRP在BPH和PAC組織中的陽性率分別為225%（9/40）和42.3%（39/92），BPH組織中LRP的陽性率明顯低于PAC組織，差異有統計學意義（P<0.05）。Logistic回歸分析結果顯示CD44和LRP表達可增加PAC發病風險，對應風險值分別為351（1.46～8.43）和2.54（1.08～5.93）。見表1。

2.2PAC腫瘤組織中CD44和LRP表達的相關性

92例PAC組織中CD44和LRP均為陽性27例，均為陰性37例，CD44陽性而LRP陰性16例，LRP陽性而CD44陰性12例，配對計數資料分析表明CD44和LRP表達的相關性呈正相關（Spearmans等級相關，r=0.39，P<0.01）。見表2。

3討論

PAC是一種好發于老年男性患者的常見惡性腫瘤，該腫瘤起源于前列腺分泌性上皮細胞[5～6]。在全世界范圍內，PAC發病率居所有惡性腫瘤的第2位，死亡率居第5位[7]。通過BPH 和癌組織學分析發現無癥狀前列腺炎癥見于多數成年男性，約80%的患者前列腺組織存在不同程度的炎癥因子浸潤[8]。大量的病例-對照研究證明，炎癥的持續存在將增加PAC的發生風險[9～10]。在慢性炎癥微環境下，由于炎癥因子的不斷浸潤或致癌物的反復刺激將導致前列腺上皮細胞的損傷，并發生體細胞基因組的改變[11]，增加基因的不穩定性，進而導致更多的基因突變，如MYC基因的過表達，抑癌基因NKX3.1、PTEN、CDKN1B的沉默等[12]，促使前列腺細胞轉化為高級別的PIN或早期癌變，而AR突變、ERG-TMPRSS2融合等又將驅動PAC的進展[13]，從分子水平研究前列腺癌發病機制對其防治均有重大意義[14～15]。

人類CD44基因位于11號染色體短臂上，長約50 kb，包括20個高度保守的外顯子[16]。研究表明CD44異常表達可早于ras、p53等基因的異常，所以CD44的變異可能與ras基因激活有關，是癌形成的一個重要因素。有一項對結腸腫瘤p53突變和CD44蛋白的研究，在結腸腫瘤各期中觀察到有統計顯著性的p53、CD44V6表達增強的趨勢，p53和CD44V6表達間有顯著相關性[17]。Louis等[18]實驗結果顯示前列腺腺癌p53陽性率為78.26%，且隨著癌細胞分化程度降低、臨床分期增高和淋巴結轉移，p53蛋白陽性率愈來愈高，可見p53可能是PAC患者預后的標志物之一。由此推斷，CD44可能通過影響p53突變來調控PAC的發生發展。

已有報道，LRP 在多種癌癥中高表達，可以作為一個新的潛在的癌癥預測標志物。如在胃癌當中，LRP在癌組織中高表達，且多因素分析發現，LRP的表達與淋巴結轉移，TNM分期以及生存預后相關[19];在前列腺癌中，LRP在癌組織中高表達，且與腫瘤轉移和血清前列腺特異性抗原水平呈正相關，但與患者的生存預后以及激素治療敏感性呈負相關[20]。Kluth等[21]對500例前列腺癌組織進行研究，發現LRP1基因重排1例，說明LRP1基因突變可能與PAC易感性有關。亦有相關研究證實，LRP在PAC中呈高表達[22]。本研究結果提示CD44和LRP二者在PAC組織中顯著高表達，與既往研究一致;而且，我們還首次證實了CD44和LRP表達水平呈正相關。但本研究也存在局限性，由于未對上述患者進行隨訪，故而不能驗證CD44和LRP的表達能否預測前列腺癌預后。

綜上，在PAC組織中，CD44和LRP表達增加，且它們間具有正向相關作用，這種上調的CD44和LRP在前列腺腺癌的發生中起重要作用。值得注意的是當前研究結果是基于相對較小樣本獲得，而且我們也沒有開展相關機制研究，因此，本研究結果需要通過更大樣本并結合體內外實驗加以確認。

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（收稿日期：2018-11-09修回日期：2019-01-07）

（編輯：潘明志）