紅曲蜂膠片輔助降血脂功能的研究

黃彥通，周丹英，余琪

（浙江省中藥研究所有限公司，浙江杭州310023）

高血脂癥是指人體脂質代謝障礙導致的血漿膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇等的異常現象，與心血管疾病、動脈粥樣硬化的發生密切相關[1]。人群血清膽固醇水平的升高導致2010年～2030年期間我國心血管病事件約增加920萬[2]。我國成人血脂異常水平和患病率與西方發達國家相比還處于較低水平，但比10年前有了較大升高，隨著年齡增加有上升的趨勢[3]。我國血脂異?？偦疾÷蕿?4 %，城鄉差別不大，城市患病率為35.1 %，鄉村為26.3%，男性患病率41.9%，高于女性患病率32.5%[4]。我國兒童青少年高膽固醇血癥患病率也有明顯升高，兒童青少年合并血脂異?？偦疾÷蕿?5.3 %，7 歲～18歲兒童青少年血脂異?？偦疾÷剩?1.6 %）高于2歲～6 歲兒童（9.0%）[5]。對于高血脂癥，臨床治療多使用降血脂藥物，但藥物具有一定的毒副作用，不適合長期服用，因此，開發既有營養價值又有降脂功效的保健食品是防治高脂血癥的一個重要研究方向。本產品紅曲蜂膠片是以紅曲、蜂膠乙醇提取物為主要原料開發的保健食品?，F代藥理學研究表明，紅曲、蜂膠均有良好的調節血脂作用[6-7]，而由蜂膠乙醇提取物、紅曲粉為原料組合而成的具有降脂功效的保健食品還未見報道。因此，本文依照《關于印發抗氧化功能評價方法等9 個保健功能評價方法的通知》對紅曲蜂膠片的功效性進行評價。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紅曲蜂膠片非定型粉末：浙江某生物科技有限公司，棕紅色，由功能性紅曲米粉與蜂膠乙醇提取物配合輔料制成，主要功效性成分為洛伐他汀和總黃酮，規格為0.5 g/片，每日兩次，每次2 片。以每人60 kg 體重計算，折合劑量0.033 g/（kg·d）。

膽固醇測定試劑盒、甘油三酯測定試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒：中生北控生物科技股份有限公司。

1.2 試驗動物

雄性SD 大鼠，50只，體重180 g～220 g，無特定病原體，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司，實驗動物合格證號：SCXK（滬）2012-0002；實驗動物維持飼料由浙江省實驗動物中心提供；實驗動物模型飼料由北京科奧協力飼料有限公司提供。

1.3 儀器與設備

TBA-40FR型全自動生化分析儀：東芝公司；Thermo16離心機：賽默飛世爾科技公司；eppendorf Researchplus可調移液器：德國艾本德股份公司。

1.4 方法

1.4.1 動物分組

空白對照組、模型組按1 mL/100 g 體重灌胃去離子水，紅曲蜂膠片低劑量、中劑量、高劑量組分別以0.17、0.33、1.00 g/kg 劑量等容灌胃（分別相當于人推薦攝入量的5、10、30 倍）?？瞻讓φ战M繼續給予維持飼料，模型對照組及3 個劑量組繼續給予模型飼料，并每周定期稱量體重。

1.4.2 實驗方法

50只SD 大鼠于屏障環境適應6 d，按體重隨機分為2 組，10 只大鼠給予維持飼料作為空白對照，40 只給予模型飼料作為模型組。模型組給予模型飼料12 d后，空白對照組和模型組大鼠不禁食采血（尾部），采血后20 ℃靜置1 h，分離血清，測定血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）水平。根據TC 水平將模型組隨機分成4 組，每組10 只，分別為模型對照組和樣品的3 個劑量組，4 組比較LDL-C、TG、TC、HDL-C 差異均無顯著性（P＞0.05）。分組后，空白對照組繼續給予維持飼料，模型對照組及3 個劑量組繼續給予模型飼料，并每周定期稱量體重。于給受試樣品后第31 天和第42 天不禁食采血，采血后20 ℃靜置1 h，分離血清，采用全自動生化分析儀測定血清LDL-C、TG、TC、HDL-C 水平。

1.4.3 統計方法

用SPSS11.5 統計軟件統計。方差符合齊性要求時，用方差分析進行統計；如果各組均數之間差異有顯著性，則進一步用q 檢驗進行兩兩比較。方差不符合齊性要求時，用秩和檢驗進行統計。

2 結果

2.1 高脂血癥動物模型的建立

造模后、實驗第31 天及實驗第42 天，大鼠不禁食采血（尾部），采血后室溫靜置1 h，分離血清，測定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平，結果見表1～表3。大鼠血清TC、TG、LDL-C 與對照組比較均顯著升高（P＜0.01），表明高脂血癥動物模型成立。

表1 造模后大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平（±s）Table 1 Serum lipids level of TC，TG，LDL-C，HDL-C in model rats（±s）

表1 造模后大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平（±s）Table 1 Serum lipids level of TC，TG，LDL-C，HDL-C in model rats（±s）

注：與空白對照組比較，**表示差異極顯著，P＜0.01。

組別 鼠數 LDL-C/（mmol/L） TG/（mmol/L） TC/（mmol/L） HDL-C/（mmol/L）空白對照組 10 0.43±0.04 1.31±0.25 1.61±0.15 0.95±0.08模型組 40 0.90±0.10** 4.11±1.12** 3.75±0.58** 1.22±0.12**t 21.412 14.468 20.509 6.496 P 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 實驗第31 天大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平（±s）Table 2 Serum lipids level of TC，TG，LDL-C，HDL-C in each group rats on the day 31 after administration（±s）

表2 實驗第31 天大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平（±s）Table 2 Serum lipids level of TC，TG，LDL-C，HDL-C in each group rats on the day 31 after administration（±s）

注：與空白對照組比較，**表示差異極顯著，P＜0.01。

組別 鼠數 LDL-C/（mmol/L） TG/（mmol/L） TC/（mmol/L） HDL-C/（mmol/L）空白對照組 10 0.30±0.07 1.42±0.26 1.47±0.20 0.78±0.12模型組 10 0.73±0.07** 2.81±0.44** 3.43±0.45** 0.86±0.07 t 13.679 8.588 12.665 1.935 P 0.000 0.000 0.000 0.069

表3 實驗第42 天大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平（±s）Table 3 Serum lipids level of TC，TG，LDL-C，HDL-C in each group rats on the day 42 after administration（±s）

表3 實驗第42 天大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平（±s）Table 3 Serum lipids level of TC，TG，LDL-C，HDL-C in each group rats on the day 42 after administration（±s）

注：與空白對照組比較，**表示差異極顯著，P＜0.01。

組別 鼠數 LDL-C/（mmol/L） TG/（mmol/L） TC/（mmol/L） HDL-C/（mmol/L）空白對照組 10 0.34±0.04 1.33±0.37 1.54±0.22 0.76±0.15模型組 10 0.72±0.07** 2.47±0.47** 3.23±0.50** 0.76±0.10 t 14.260 6.029 9.725-0.090 P 0.000 0.000 0.000 0.930

表4 各組大鼠體重變化情況（±s）Table 4 Weight changes of each group rats（±s）

表4 各組大鼠體重變化情況（±s）Table 4 Weight changes of each group rats（±s）

組別 鼠數 始重/g 第14 天體重/g 第31 天體重/g 第42 天體重/g模型對照組 10 306.5±17.7 401.9±19.4 499.0±21.7 530.8±22.5低劑量組 10 318.2±20.7 407.7±26.8 493.4±35.8 530.6±38.5中劑量組 10 315.9±14.9 409.0±23.7 496.4±34.5 533.8±40.3高劑量組 10 306.2±16.6 398.9±23.1 474.5±30.5 509.9±32.7

2.2 紅曲蜂膠片對高脂血癥大鼠體重及血脂的影響

大鼠喂飼維持飼料觀察6 d 后，按體重隨機分成模型組（40 只）和空白對照組（10 只），體重分別為（204.5±9.6）g 和（206.1±9.0）g，差異無統計學意義（t=-0.486，P＞0.05）。造模后，樣品對大鼠體重的影響結果見表4，原始數據均符合方差齊的要求（P＞0.05）。給樣前、中、末期，低、中、高3 劑量組大鼠體重分別和模型對照組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。

紅曲蜂膠片對高脂血癥大鼠血脂的影響見表5，喂飼高脂飼料31 d 后，模型對照組大鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C 值與高、中、低劑量組比較差異均無統計學意義（P＞0.05），中、高劑量組的血清TG 值及中劑量組的血清TC 值與模型對照組相比稍有降低。喂飼高脂飼料42 d 后，模型對照組大鼠血清TG 與高、中劑量組比較有明顯降低，差異顯著（P＜0.05）；模型對照組大鼠血清LDL-C 與中劑量組比較有明顯降低，差異顯著（P＜0.05）。

表5 各組大鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C 含量測定結果（±s）Table 5 The results of serum TG，TC，LDL-C，HDL-C content of each group rats（±s）

表5 各組大鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C 含量測定結果（±s）Table 5 The results of serum TG，TC，LDL-C，HDL-C content of each group rats（±s）

注：與空白對照組比較，*表示差異顯著P＜0.05。

組別 鼠數 LDL-C/（mmol/L） TG/（mmol/L） TC（/mmol/L） HDL-C/（mmol/L）實驗前 31 d 后 42 d 后 實驗前 31 d 后 42 d 后 實驗前 31 d 后 42 d 后 實驗前 31 d 后 42 d 后模型對照組 10 0.90±0.12 0.76±0.10低劑0.73±0.07 0.72±0.07 4.04±1.05 2.81±0.44 2.47±0.47 3.80±0.53 3.43±0.45 3.23±0.50 1.27±0.10 0.86±0.07 0.75±0.10中劑量組 10 0.87±0.09 0.72±0.09 0.69±0.08 4.01±1.16 2.83±0.48 2.21±0.42 3.78±0.36 3.47±0.38 3.22±0.37 1.23±0.10 0.88±0.08 0.70±0.04高劑量組 10 0.92±0.09 0.70±0.07 0.62±0.07*4.05±1.17 2.64±0.52 1.94±0.46*3.72±0.38 3.30±0.47 3.03±0.56 1.20±0.10 0.86±0.08量組 10 0.92±0.12 0.75±0.09 0.70±0.08 4.16±1.04 2.40±0.56 1.93±0.40*3.84±0.60 3.56±0.60 3.25±0.56 1.16±0.11 0.85±0.12 0.74±0.07

各項實驗結果表明：給受試樣品42 d 后，中劑量組大鼠血清LDL-C 含量，中、高劑量組大鼠血清TG含量均明顯低于模型對照組，差異均有統計學意義。綜上所述，在本實驗條件下，紅曲蜂膠片輔助降血脂功能動物實驗結果陽性。

3 結論與討論

近年來，我國人群的血脂水平逐步升高，血脂異?；疾÷拭黠@提高且有低齡化趨勢。血脂異常受飲食及生活方式的影響，飲食治療和生活方式改善是治療血脂異常的基礎措施[8]。紅曲是藥食兩用的傳統中藥，以大米為原料經紅曲霉發酵而成，具有降血脂、降血壓、抗肥胖、防治老年癡呆及骨質疏松等多種藥理作用[9]。高躍中等[10]通過人體試食實驗研究了功能性紅曲具有明確的調脂功能，并且無明顯不良反應。1979年日本遠藤章教授在紅曲菌發酵液中得到可以抑制體內膽固醇合成的活性物質Monacolin K，后來證明Monacolin K 即為洛伐他汀，該類化合物在臨床應用中可作為羥甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶的競爭性抑制劑，能有效減少或阻斷內源性膽固醇的合成[11]。他汀類藥物雖然降低血脂異常的效果較明確，但可引起較嚴重的不良反應。研究表明，紅曲降脂作用較為溫和，不良反應少[12]，從紅曲中提取的洛伐他汀有明顯降低膽固醇及甘油三酯的作用[13]。Chen C H 等[14]研究了紅曲的3 個產品的溶解性、物態、口服生物藥效率，并與純洛伐他汀進行比較，結果顯示紅曲產品溶解度高并結晶度減少，因而具有比純洛伐他汀更高更快的口服生物藥效率。有研究表明，紅曲中非他汀類物質也具有輔助降血脂的功能，并且只需紅曲中所含他汀類純品十分之一的劑量即能表現出較好的功效[15]。蜂膠為天然蜂產品，食用歷史悠久，屬可用于保健食品的物品，具有抗炎鎮痛、增強免疫、保護心血管、抗腫瘤、抗氧化、護肝等方面的藥理作用[16]。蜂膠中富含黃酮類化合物，已從蜂膠中分離鑒定的黃酮化合物有30 余種，許多黃酮種類為蜂膠所特有，已有報道證明黃酮類物質為降血脂，清除自由基，擴張冠狀血管等多種保健功能的活性成分[17]。有研究表明，蜂膠中黃酮含量越高，輔助降血脂作用越明顯[18]。

本實驗通過喂食高脂模型飼料建立了大鼠混合型高脂血癥模型，研究了紅曲蜂膠片的輔助降血脂功能。研究表明，紅曲蜂膠片可降低血清中TG、LDL-C的含量，與模型對照組比較有顯著性差異（P＜0.05）。紅曲蜂膠片以傳統食品紅曲與蜂膠乙醇提取物為主要原料，經過科學的配比，經由現代制劑工藝加工而成，方中紅曲能健脾消食，活血化瘀，蜂膠能補虛弱，化濁脂。紅曲蜂膠片的主要功效性成分為洛伐他汀與總黃酮，紅曲中的洛伐他汀能有效減少或阻斷內源性膽固醇的合成，從而實現輔助降血脂的功效；而蜂膠能促進肝臟的脂質代謝，抑制甘油三酯和膽固醇與蛋白質的結合，抑制脂蛋白和血管壁膠原纖維蛋白的結合，蜂膠中的多種黃酮類物質可與膽固醇或其轉化物膽酸結合，從而抑制其在腸內的吸收促進降解和排泄[19]。LDL-C 升高是動脈粥樣硬化性心血管疾病（atherosclerotic cardiovascular disease，ASCVD）重要的危險因素[20]，故認為紅曲蜂膠片對防治動脈粥樣硬化方面疾病也具有積極意義。近年來，越來越多的關于輔助降血脂類保健食品正在興起，其中以蜂膠降脂類產品與紅曲降脂類產品未完全普及，具有非常廣闊的市場前景。