腫瘤浸潤性樹突狀細(xì)胞在結(jié)腸癌組織中的密度及臨床意義

孫志娟，張俊毅赤峰學(xué)院國際教育學(xué)院教務(wù)辦，內(nèi)蒙古赤峰024000

2赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院病理科，內(nèi)蒙古赤峰024000 0

結(jié)腸癌是中老年人較常見的惡性腫瘤之一，且近些年有年輕化趨勢。雖然隨著胃腸鏡技術(shù)的發(fā)展，結(jié)腸癌早期確診率有所提高，使得病死率有所下降，但是部分結(jié)腸癌患者仍可在早期即可通過淋巴液、血液等方式轉(zhuǎn)移，腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移是結(jié)腸癌患者預(yù)后不良最重要的影響因素[1-2]。目前研究已證實，免疫系統(tǒng)在腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重大作用，而多種途徑均可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對機(jī)體免疫耐受，從而大量增殖并轉(zhuǎn)移。CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞等已被證實與腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移有關(guān)[3]。樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）是機(jī)體的一種抗原呈遞細(xì)胞，在腫瘤患者中，主要將腫瘤細(xì)胞表面分子標(biāo)志物和代謝產(chǎn)物等呈遞給細(xì)胞毒性T細(xì)胞等，進(jìn)而殺傷腫瘤細(xì)胞[4-5]。但目前關(guān)于腫瘤浸潤性樹突狀細(xì)胞（tumor infiltrating dendritic cell，TIDC）在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)和臨床意義尚不清楚。為此，本研究探討TIDC在結(jié)腸癌組織中的密度及臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2016年1月至2017年1月赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院收治的117例結(jié)腸癌患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①確診為結(jié)腸癌；②接受手術(shù)治療；③年齡≥18歲且≤70歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前曾接受放化療或分子生物治療等特殊治療；②復(fù)發(fā)性結(jié)腸癌；③潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病等重大胃腸道疾病；④合并其他惡性腫瘤，肝腎等臟器功能不全；⑤既往患心肌梗死、腦卒中等重大心血管疾病，急性或慢性感染期，6個月內(nèi)曾接受免疫調(diào)節(jié)劑等治療；⑥原位癌。117例患者中，男性79例，女性38例；年齡≥60歲63例，﹤60歲54例；腫瘤直徑≥5 cm 67例，﹤5 cm 50例；腺癌75例，非腺癌42例；分化程度：中低分化59例，高分化58例；TNM分期：Ⅱ期78例，Ⅲ期39例。所有患者對本研究均知情同意并簽署知情同意書，本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

所有患者入院后完善相關(guān)檢驗檢查，擇期行結(jié)腸癌切除術(shù)，取術(shù)中標(biāo)本，檢測結(jié)腸癌組織（結(jié)腸癌組織中心部位）和癌旁組織（距離腫瘤邊緣5 cm以上）中主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ（major histocompatibility complexⅡ，MHC-Ⅱ）和 CD54的表達(dá)情況。同時收集患者年齡、性別、腫瘤直徑、腫瘤細(xì)胞類型、分化程度、TNM分期等臨床特征，分析結(jié)腸癌組織中TIDC的密度、TIDC的MHC-Ⅱ和CD54表型與患者臨床特征的關(guān)系。

1.3 檢測方法

取術(shù)中組織標(biāo)本進(jìn)行免疫組化染色后，在400倍鏡下隨機(jī)取5個視野進(jìn)行TIDC計數(shù)，取平均值。取組織使用胰蛋白酶消化后制成細(xì)胞懸液，使用流式細(xì)胞儀檢測TIDC細(xì)胞的MHC-Ⅱ和CD54表型陽性表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗或配對t檢驗。以P﹤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)腸癌組織與癌旁組織中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)情況的比較

結(jié)腸癌組織中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)率均明顯低于癌旁組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P﹤0.01）。（表1）

表1 結(jié)腸癌組織與癌旁組織中TI-DC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)情況的比較（± s）

表1 結(jié)腸癌組織與癌旁組織中TI-DC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)情況的比較（± s）

組織類型結(jié)腸癌組織（n=117）癌旁組織（n=117）t值P值TIDC密度9.93±2.25 12.97±2.89 9.588 0.000 MHC-Ⅱ陽性（%）6.62±2.04 12.16±2.34 18.567 0.000 CD54陽性（%）7.58±2.74 11.98±2.24 14.384 0.000

2.2 不同臨床特征的結(jié)腸癌患者腫瘤組織中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)情況的比較

不同年齡、性別、腫瘤直徑和腫瘤細(xì)胞類型的結(jié)腸癌患者腫瘤組織中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P﹥0.05）。中低分化的結(jié)腸癌患者腫瘤組織中TIDC密度明顯低于高分化的結(jié)腸癌患者腫瘤組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=7.574，P﹤0.01）；TNM分期為Ⅲ期的結(jié)腸癌患者腫瘤組織中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)率均明顯低于TNM分期為Ⅱ期的結(jié)腸癌患者腫瘤組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t=8.845、3.278、5.750，P﹤0.01）。（表2）

表2 不同臨床特征結(jié)腸癌患者腫瘤組織中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54陽性表達(dá)情況（ n=117）

3 討論

中老年人群中最常見的惡性腫瘤是結(jié)腸癌，結(jié)腸癌在早期可通過淋巴結(jié)、血液循環(huán)等轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重危害了中老年人群的身心健康[6-7]。根據(jù)目前的相關(guān)研究證實，免疫功能對結(jié)腸癌的轉(zhuǎn)移有著重要的影響，特別是腫瘤微環(huán)境下的免疫功能[8-9]。腫瘤患者中的DC通常作為一種抗原呈遞細(xì)胞，通過對細(xì)胞毒性T細(xì)胞的刺激進(jìn)行增殖，達(dá)到對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。但是在特定環(huán)境下DC細(xì)胞可以表現(xiàn)為免疫抑制作用，這部分DC細(xì)胞由分化異常或不成熟的DC細(xì)胞組成，主要表現(xiàn)為CD54和MHC-Ⅱ陽性表達(dá)率下降[10-12]。本研究中結(jié)腸癌組織TIDC的CD54和MHC-Ⅱ陽性表達(dá)率均較癌旁組織下降，說明結(jié)腸癌組織中TIDC不成熟細(xì)胞比例增加。2015年張子杰[13]研究顯示結(jié)腸癌組織、外周血中DC細(xì)胞顯著減少，但該研究未探討結(jié)腸癌組織中TIDC與患者臨床特征的關(guān)系。尹文功[14]研究則顯示結(jié)腸癌組織中的TIDC的密度與臨床分期、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與年齡、性別和腫瘤病理組織學(xué)類型無關(guān)。該研究同樣支持本研究，不過本研究還同時探討了TIDC細(xì)胞的分型，發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中成熟TIDC細(xì)胞比例下降，因此本文具有一定的臨床意義。TIDC細(xì)胞是一種抗原呈遞細(xì)胞，在腫瘤的免疫中發(fā)揮重要作用，TIDC水平降低將導(dǎo)致機(jī)體對腫瘤降解產(chǎn)物的呈遞能力降低，無法有效刺激細(xì)胞毒性T細(xì)胞的大量增殖，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對機(jī)體的免疫耐受[15-16]。另外，本研究顯示結(jié)腸癌組織中成熟TIDC細(xì)胞比例下降，不成熟的TIDC細(xì)胞具有免疫抑制作用，可以分泌多種免疫抑制細(xì)胞因子，而促進(jìn)Th1/Th2細(xì)胞免疫向Th2免疫漂移[17-18]。目前，關(guān)于TIDC在結(jié)腸癌中的作用尚處于研究階段。2015年Radej等[19]研究顯示，結(jié)腸癌細(xì)胞降解產(chǎn)物可以刺激TIDC細(xì)胞增殖和成熟。但DC細(xì)胞在結(jié)腸癌中的價值為以后的研究提供了新方向，為臨床治療提供了更多的治療靶點(diǎn)。DC-CIK治療即是學(xué)者根據(jù)免疫功能在腫瘤發(fā)生中的重要作用提出的新療法，或許可以在結(jié)腸癌患者中應(yīng)用，但目前仍缺乏研究證實。

綜上所述，TIDC在結(jié)腸癌組織中密度降低，不成熟的調(diào)節(jié)性TIDC比例增加，可能與腫瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移有關(guān)。