孕激素受體陰性子宮內(nèi)膜樣腺癌中PTEN的表達(dá)及意義

陳勇，王夙斐

(長(zhǎng)江大學(xué)醫(yī)學(xué)部，湖北 荊州 434000)

易村犍，魏華

(長(zhǎng)江大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 荊州 434000)

子宮內(nèi)膜癌是婦科常見(jiàn)的惡性生殖系統(tǒng)腫瘤，其發(fā)病率逐年上升，目前已居達(dá)女性所有惡性腫瘤的第4位，甚至在有些發(fā)達(dá)國(guó)家其發(fā)病率已位居?jì)D科惡性腫瘤的第1位[1]。子宮內(nèi)膜樣腺癌是子宮內(nèi)膜癌中最常見(jiàn)的病理類型，目前子宮內(nèi)膜樣腺癌的治療方式主要是全面分期手術(shù)及輔助放療或化療，但是手術(shù)使患者失去了女性卵巢內(nèi)分泌功能。近年針對(duì)孕激素受體(PR)表達(dá)陽(yáng)性的患者業(yè)已證實(shí)采用孕激素治療有效，但是對(duì)于PR陰性的患者無(wú)較好的治療方法。本研究通過(guò)檢測(cè)PR及PTEN在子宮內(nèi)膜樣腺癌的表達(dá)情況，并分析與臨床相關(guān)病理特征的關(guān)系，進(jìn)一步探討在PR陰性子宮內(nèi)膜樣腺癌中PTEN檢測(cè)的意義。

1 資料與方法

1.1 資料來(lái)源

收集到的96例標(biāo)本均在長(zhǎng)江大學(xué)附屬第一醫(yī)院手術(shù)切除，患者術(shù)前未進(jìn)行化療及放療等治療，且術(shù)后由病理科專家診斷為子宮內(nèi)膜樣腺癌。

1.2 檢測(cè)方法

收集到的標(biāo)本均常規(guī)行規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色。采用免疫組化Envision法(單克隆鼠抗人PR抗體及單克隆鼠抗人PTEN抗體均購(gòu)自DAKO公司)檢測(cè)PR及PTEN在腫瘤組織中的表達(dá)情況。

1.3 結(jié)果評(píng)定

PR的陽(yáng)性表達(dá)定位在腫瘤細(xì)胞胞核，PTEN的陽(yáng)性表達(dá)定位在腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)或胞核。切片染色結(jié)果評(píng)分根據(jù)陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞占比和細(xì)胞染色強(qiáng)度確定。隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡視野計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)：陰性0分，<10%為1分，10%～50%為2分，>50%為3分；同時(shí)確定染色強(qiáng)度：陰性0分，淡黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。兩組相乘結(jié)果：0分(-)、1～3分(+)、4～6分(++)、7～9分(+++)。最終評(píng)定結(jié)果為：陰性：(-)和(+)，陽(yáng)性：(+ +)和(+ + +)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS19.0，采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析用相關(guān)系數(shù)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床病理特點(diǎn)

子宮內(nèi)膜樣腺癌96例患者年齡33～78(56.8±8.9)歲。組織病理分級(jí)：G1級(jí)30例(31.25%)，G2級(jí)38例(39.58%)，G3級(jí)28例(29.17%)。手術(shù)病理分期：Ⅰ期86例(89.58%)，Ⅱ～Ⅳ期10例(10.42%)。

2.2 PR及PTEN表達(dá)情況與臨床病理特征的關(guān)系

PR表達(dá)與女性平均絕經(jīng)年齡[2]無(wú)關(guān)(P>0.05)，但PR陽(yáng)性表達(dá)缺失率在大于48歲年齡組中高于小于48歲年齡組。PR表達(dá)在組織病理學(xué)分級(jí)中比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且隨著組織學(xué)分級(jí)越高，PR陽(yáng)性表達(dá)缺失率越高。PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失與女性平均絕經(jīng)年齡無(wú)關(guān)(P>0.05)，PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失率在各臨床病理特征中比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 不同臨床病理特征子宮內(nèi)膜樣腺癌中PR與PTEN表達(dá)情況

2.3 PR陰性時(shí)PTEN表達(dá)情況與臨床病理特征的關(guān)系

共有44例標(biāo)本PR表達(dá)陰性，其中PTEN陽(yáng)性表達(dá)在組織病理分級(jí)表達(dá)情況為：G1級(jí)0例，G2級(jí)8例，G3級(jí)7例；在手術(shù)病理分期表達(dá)情況為：Ⅰ期13例，Ⅱ～Ⅳ期2例；PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失在組織病理分級(jí)表達(dá)情況為：G1級(jí)7例，G2級(jí)6例，G3級(jí)16例；在手術(shù)病理分期表達(dá)情況為：Ⅰ期26例，Ⅱ～Ⅳ期3例。PR陰性時(shí)PTEN的表達(dá)與子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織學(xué)分級(jí)相關(guān)(P<0.05)，且PTEN在G1級(jí)中表達(dá)缺失率明顯高于G2及G3級(jí)，但與手術(shù)病理分期無(wú)關(guān)(P>0.05)。

2.4 PR與PTEN相關(guān)性分析

表2 PR與PTEN的相關(guān)性

PR陽(yáng)性表達(dá)52例(54.17%)，PR陽(yáng)性表達(dá)缺失44例(45.83%)；PTEN陽(yáng)性表達(dá)34例(35.42%)，PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失62例(64.58%)。在52例PR陽(yáng)性子宮內(nèi)膜樣腺癌標(biāo)本中，PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失為33例，PR陽(yáng)性子宮內(nèi)膜樣腺癌中PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失占比例為63.46%；在44例PR陰性子宮內(nèi)膜樣腺癌標(biāo)本中，PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失為29例，PR陰性子宮內(nèi)膜樣腺癌中PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失占比例為65.91%。子宮內(nèi)膜樣腺癌中PTEN表達(dá)與PR表達(dá)無(wú)相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)r=0.025，P>0.05)。見(jiàn)表2。

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，隨著全球經(jīng)濟(jì)發(fā)展及生活環(huán)境的改變，其發(fā)病率仍在逐年上升，在我國(guó)子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率也開(kāi)始呈現(xiàn)增高及年輕化的趨勢(shì)。

子宮內(nèi)膜癌主要分為兩型：Ⅰ型(雌激素依耐型)和Ⅱ型(非雌激素依耐型)。Ⅰ型主要組織病理類型包括子宮內(nèi)膜樣腺癌,Ⅱ型主要組織病理類型包括漿液性細(xì)胞癌、透明細(xì)胞癌和癌肉瘤。子宮內(nèi)膜樣腺癌是子宮內(nèi)膜癌最常見(jiàn)的病理類型，占各種亞型的80%以上。子宮內(nèi)膜樣腺癌患者主要接受全面分期手術(shù)為主及輔助性放療或化療的綜合治療。雖然這些治療提高了患者的生存率，但患者往往失去生育能力和女性卵巢內(nèi)分泌功能，導(dǎo)致全身代謝紊亂及相關(guān)并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。

中國(guó)女性的平均絕經(jīng)年齡約為48歲，理論上只要卵巢存在排卵就有生育的可能，隨著倆孩時(shí)代的開(kāi)放，這種生育的希望可能更迫切。但是對(duì)于患有子宮內(nèi)膜樣腺癌且希望保留生育能力的女性來(lái)說(shuō)，這是一種艱難的選擇。基于子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)生是由于雌激素的長(zhǎng)期作用而無(wú)孕激素拮抗導(dǎo)致的發(fā)病機(jī)制，目前已開(kāi)展以孕激素及其衍生物治療的一種非手術(shù)方法。一般認(rèn)為孕激素對(duì)癌細(xì)胞有直接抑制作用，在外源性孕激素作用下，孕激素通過(guò)與其特異性靶細(xì)胞受體結(jié)合，抑制癌細(xì)胞增長(zhǎng)，逐漸向分泌狀態(tài)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡和萎縮。Koskas等[3]報(bào)道，子宮內(nèi)膜癌患者經(jīng)大量孕激素保守治療后的完全緩解率約為80%，復(fù)發(fā)率為25%左右。目前關(guān)于PR的表達(dá)情況與患者預(yù)后的關(guān)系已經(jīng)有大量研究，均認(rèn)為PR表達(dá)陽(yáng)性患者其預(yù)后較PR陰性患者更佳。臨床上已有通過(guò)補(bǔ)充孕激素治療子宮內(nèi)膜癌后成功妊娠的報(bào)道[4]。本研究發(fā)現(xiàn)PR表達(dá)在組織病理學(xué)分級(jí)中比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且隨著組織學(xué)分級(jí)越高，PR陽(yáng)性表達(dá)缺失率越高，也證實(shí)了以上結(jié)論。但是針對(duì)PR陰性的子宮內(nèi)膜樣腺癌患者，目前尚無(wú)較好的保留女性生育及卵巢內(nèi)分泌功能的治療方法。本研究發(fā)現(xiàn)PR陰性患者占全部子宮內(nèi)膜樣腺癌的45.83%，占平均絕經(jīng)年齡以下的比例為28.57%。然而，針對(duì)此類臨床亞型的保留女性生育及卵巢內(nèi)分泌功能治療方式的研究甚少。

PTEN基因是1997年被發(fā)現(xiàn)并被命名的一種腫瘤抑制基因[5]。PTEN是一種兼具蛋白磷酸酶和脂質(zhì)磷酸酶活性的雙特異性磷酸酶，具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲轉(zhuǎn)移等主要功能[6, 7]。目前大量研究表明，PTEN基因的缺失、失活或減弱在多種腫瘤如膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、前列腺癌、乳腺癌和黑色素瘤中均有發(fā)現(xiàn)[8]。有研究發(fā)現(xiàn)PTEN基因是子宮內(nèi)膜癌中最常見(jiàn)的突變基因，且其突變主要發(fā)生在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌。本研究發(fā)現(xiàn)PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失率在子宮內(nèi)膜樣腺癌患者中為64.58%，同時(shí)發(fā)現(xiàn)在組織病理分級(jí)G1級(jí)中表達(dá)缺失率高于G2級(jí)及G3級(jí)，且呈遞減趨勢(shì)。在手術(shù)病理分期早期中表達(dá)缺失率高于晚期，可見(jiàn)PTEN表達(dá)缺失在子宮內(nèi)膜樣腺癌是早期分子事件。但是PTEN陽(yáng)性表達(dá)缺失率在各臨床病理特征中比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，該結(jié)果也與國(guó)內(nèi)學(xué)者報(bào)道的基本一致[9]。通過(guò)進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)當(dāng)PR陰性時(shí)PTEN的表達(dá)與子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織學(xué)分級(jí)相關(guān)(P<0.05)，且PTEN在G1級(jí)中表達(dá)缺失率明顯高于G2及G3級(jí)，表明PTEN可能參與PR陰性子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)病機(jī)制，但仍需要更多的樣本量來(lái)驗(yàn)證此結(jié)論。Nei等[10]通過(guò)檢測(cè)孕激素治療后復(fù)發(fā)的患者發(fā)現(xiàn)存在PTEN表達(dá)缺失，提示PTEN的缺失可能有拮抗孕激素的作用，但具體分子機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。該結(jié)論可能有助于解釋使用孕激素治療PR陽(yáng)性的子宮內(nèi)膜癌有效率達(dá)不到100%的可能分子機(jī)制。

此項(xiàng)研究存在幾個(gè)局限性。首先，樣本容量不是很大，未來(lái)仍需大樣本來(lái)驗(yàn)證此結(jié)論。其次，這是一項(xiàng)現(xiàn)象分析，我們無(wú)法探討PR和PTEN表達(dá)缺失導(dǎo)致子宮內(nèi)膜樣腺癌的機(jī)制。同時(shí)，我們沒(méi)有檢測(cè)到PR和PTEN異常表達(dá)的相關(guān)性。

綜上所述， PR的表達(dá)與子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。臨床上希望保留生育能力和女性卵巢內(nèi)分泌功能的子宮內(nèi)膜樣腺癌患者，若檢測(cè)出PR陽(yáng)性，使用孕激素是一種較好的替代手術(shù)方法。PTEN作為子宮內(nèi)膜樣腺癌早期分子事件，對(duì)于子宮內(nèi)膜樣腺癌的早篩查、早診斷具有臨床意義。因此我們建議對(duì)于年輕的早期子宮內(nèi)膜樣腺癌患者，在選擇孕激素治療時(shí)建議聯(lián)合篩查PR及PTEN的表達(dá)情況，從而來(lái)判斷激素治療的高效性。同時(shí)PTEN也可能參與PR陰性子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)病機(jī)制，針對(duì)PTEN的靶向治療可能彌補(bǔ)PR陰性子宮內(nèi)膜樣腺癌患者保留生育及卵巢內(nèi)分泌功能治療的空缺。