凍干機(jī)性能驗證方法的建立和應(yīng)用

魯高升

摘要：文章目的主要建立真空冷凍干燥機(jī)（凍干機(jī)）性能驗證方法，對LYO（SIP，CIP）型凍干機(jī)性能進(jìn)行驗證。方法：根據(jù)2010版藥品生產(chǎn)和質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）指南的要求，對凍干機(jī)真空、在線清洗和滅菌系統(tǒng)（CIP/SIP）、板層溫度均勻性等性能指標(biāo)進(jìn)行測試，驗證其是否符合產(chǎn)品工藝需求。結(jié)果：凍干機(jī)抽極限真空至1Pa以下；在線清洗覆蓋率100%；在線滅菌完全，各溫度點F0>30min；板層均勻性溫度保持在-50℃、0℃和50℃時，各板層所有測試點在同一時刻溫度最大值與最小值溫差≤2℃。結(jié)論：通過測試驗證，所用凍干機(jī)各項性能可滿足生產(chǎn)要求。

關(guān)鍵詞：凍干機(jī)；性能驗證；真空；在線CIP/SIP；溫度均勻性

引言

真空冷凍干燥是在低溫低壓條件下去除液體物料中絕大部分的水分，使之成為含水率極低的干品的一種干燥方法，這種低溫干燥方法由于它具有其它熱干燥方法無法比擬的優(yōu)越性，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代醫(yī)藥，如抗生素、生物制品、高級營養(yǎng)品等行業(yè)的大生產(chǎn)中。真空冷凍干燥機(jī)（簡稱凍干機(jī)）就是實現(xiàn)這種干燥的專用設(shè)備。在國外，上世紀(jì)三、四十年代就有應(yīng)用，國內(nèi)的工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用凍干機(jī)則要晚幾十年，起步于九十年代。這種早期的凍干機(jī)性能普通，功能也比較簡單，隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，如今的凍干機(jī)已成為性能優(yōu)越，功能齊備且能實現(xiàn)全過程自動控制的先進(jìn)設(shè)備，完全能滿足現(xiàn)代化大生產(chǎn)的需要。經(jīng)幾十年的發(fā)展和幾代人的努力，對于提高凍干機(jī)的性能我們?nèi)〉昧艘欢ǖ慕?jīng)驗，在此就兩個局部性問題談一談。

1材料與方法

1.1驗證材料

材料包括測試儀器和指示劑兩部分。（1）測試儀器。NanoVACQ Temperature溫度驗證系統(tǒng)（法國TMI Orion公司）；Sartorius Sartocheck-4型完整性測試儀（德國賽多利斯集團(tuán)）。（2）指示劑。滅菌生物指示劑（ATCC7953上海福澤醫(yī)藥器材有限公司）。

1.2驗證方法

1.2.1凍干機(jī)極限真空

凍干機(jī)主要包含干燥箱、冷凝器、以及真空系統(tǒng)等其它的功能子系統(tǒng)。干燥箱的主要功能是給制品在真空冷凍干燥過程中提供密閉的環(huán)境，保證整個凍干過程的真空狀態(tài)。冷凝器采用與干燥箱連體的立式圓桶形冷阱，冷阱將放置在干燥箱的后部，冷阱盤管將通過氟利昂來進(jìn)行制冷，可達(dá)到的最低溫度為-75℃，用于捕獲水汽。干燥箱和冷凝器通過大通徑的、液壓驅(qū)動的主蘑菇閥進(jìn)行隔離和相通。真空系統(tǒng)包括主真空泵、真空泵隔離閥和羅茨泵，羅茨泵作為前級泵目的是提高主真空泵的吸氣壓力，加快抽空速度，減少抽空時間。為了檢測其工作狀態(tài)，分別在干燥箱和真空系統(tǒng)管路上安裝了真空度的傳感器，對凍干機(jī)的極限真空性能進(jìn)行檢測。

凍干機(jī)極限真空測試是確保干燥箱表面干燥前提下運行程序，在冷凝器溫度達(dá)到-45℃時，啟動真空系統(tǒng)對冷阱進(jìn)行抽空，一定時間后打開蘑菇閥，以排除不凝性氣體和捕獲水汽進(jìn)行抽拉真空，直至箱內(nèi)達(dá)到極限真空。

1.2.2凍干機(jī)在線清洗CIP覆蓋率

（1）在整個凍干腔體的內(nèi)表面噴灑一層維生素B2水溶液，濃度為20mg/L，特別注意難以清洗部位（如管口，箱體頂部和板層下方）要噴灑完全。開啟注射用水，啟動CIP循環(huán)，完成CIP后，用熒光燈照射檢查腔體內(nèi)表面，尋找是否殘留有維生素B2熒光物部位，進(jìn)行3次重復(fù)的測試。（2）合格標(biāo)準(zhǔn)。CIP清洗后的腔體內(nèi)部表面無可見熒光物，清洗覆蓋率100%（參考藥用真空冷凍干燥機(jī)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)JB/T20032-2012）。

1.2.3凍干機(jī)在線滅菌SIP測試

（1）前校準(zhǔn)方法。驗證前將驗證用溫度探頭和標(biāo)準(zhǔn)溫度探頭同時放入溫度干井，進(jìn)行前校準(zhǔn)；設(shè)置溫度為100℃、132℃及121℃，進(jìn)行3點校準(zhǔn)；校準(zhǔn)讀取偏差應(yīng)≤0.5℃。（2）將校準(zhǔn)后的溫度探頭通過驗證口接入凍干機(jī)內(nèi)，放置24支度探頭，探頭覆蓋凍干機(jī)干燥箱箱體、各板層以及復(fù)壓系統(tǒng)。運行凍干機(jī)的SIP程序，滅菌溫度121℃，滅菌時間30min。進(jìn)行3次重復(fù)測試。驗證測試完成后將使用溫度探頭進(jìn)行后校驗，校驗點設(shè)置為121℃，后校驗讀取偏差應(yīng)≤0.5℃。（3）凍干機(jī)滅菌生物指示劑挑戰(zhàn)測試。在每一個溫度探頭附近各放置1支生物指示劑（1～24#），探頭編號與指示劑編號一致，凍干機(jī)的SIP程序結(jié)束后取出指示劑進(jìn)行培養(yǎng)。（4）合格標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB-8599-2008“大型蒸汽滅菌器技術(shù)要求自動控制型”，滅菌階段同一時刻溫度最熱點與最冷點的溫度偏差≤2℃，溫度最小值≥121.0℃；依據(jù)衛(wèi)生部令第79號“藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）”，同時結(jié)合產(chǎn)品工藝要求，各溫度點F0≥30min，滅菌生物指示劑在線滅菌后應(yīng)無菌生長。

1.2.4凍干機(jī)板層溫度均一性測試

（1）前校準(zhǔn)方法。驗證前將驗證用溫度探頭和標(biāo)準(zhǔn)溫度探頭同時放入溫度干井，進(jìn)行前校準(zhǔn)；設(shè)置溫度為-50℃、0℃及50℃，進(jìn)行3點校準(zhǔn)；校準(zhǔn)讀取偏差應(yīng)≤0.5℃。（2）干燥箱有10塊有效板層和1塊溫度補償板層，板層溫度范圍可從-55℃至+80℃，將校準(zhǔn)后的溫度探頭通過驗證口接入凍干機(jī)內(nèi)，放置55支度探頭，每塊板層四個角和中心各一個探頭。運行凍干機(jī)的板層均一性驗證程序，進(jìn)行3次重復(fù)測試。

2結(jié)果

2.1凍干機(jī)抽真空測試結(jié)果

凍干機(jī)抽真空程序，抽真空速率和極限真空均在標(biāo)準(zhǔn)要求以內(nèi)。抽氣速率：箱體壓力下降至10Pa的時間應(yīng)≤30min；極限真空：≤1Pa。

2.2凍干機(jī)在線清洗CIP覆蓋率測試結(jié)果

對噴灑維生素B2水溶液的凍干腔體進(jìn)行在線清洗CIP測試，3次重復(fù)試驗觀察結(jié)果顯示均無可見熒光物，清洗覆蓋率為100%。

2.3凍干機(jī)在線滅菌SIP測試結(jié)果

SIP后采用水浸入法檢測呼吸器濾芯完整性，WIT或WFT值符合氣體濾芯完整性標(biāo)準(zhǔn)。同時溫度探頭溫度曲線均在121℃以上，滅菌后滅菌生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果為陰性，無菌生長。

2.4凍干機(jī)板層溫度均一性測試結(jié)果

板層均勻性溫度保持在-50℃、0℃和50℃三個溫度控制點時，各板層所有測試點在同一時刻溫度最大值與最小值溫差≤2℃。

3討論

由于一體化凍干機(jī)采用冷凝器在干燥箱下方的整體結(jié)構(gòu)，產(chǎn)品中逸出的水蒸汽能迅速地均勻地流向冷凝器表面。即使沒有真空泵的導(dǎo)流作用，冷凝器仍然保持很高的效率，能充分捕捉制品表面逸出的水蒸汽，保持箱體內(nèi)的真空度不降低。當(dāng)箱內(nèi)真空度達(dá)到設(shè)定值后，維持密閉箱內(nèi)真空度的“泵”是高效的冷凝器而不是真空泵組，因此，一體化凍干機(jī)的真空泵組的吸氣口不放置于冷凝器的底部，而位于冷凝器盤管中心的上方。并且，從真空泵組到箱體之間的抽氣管路上裝有氣動隔膜閥，需要抽氣時，隔膜閥打開，使箱內(nèi)壓力下降，當(dāng)真空度到達(dá)設(shè)定值時，隔膜閥關(guān)閉。由于冷凝器捕水效率高，箱體真空度可在相當(dāng)長的一段時間內(nèi)保持穩(wěn)定，正因為如此，隔膜閥也一直保持關(guān)閉狀態(tài)。只有當(dāng)箱內(nèi)壓力高于設(shè)定值時，隔膜閥才重新自動打開，真空度達(dá)到設(shè)定值時又關(guān)閉，這樣，一方面可以控制箱內(nèi)真空度不會太低，以維持一定的熱對流，提高傳熱效率。同時，箱內(nèi)真空度很穩(wěn)定，既使在突發(fā)的情況下，也不會產(chǎn)生真空泵組和冷凝器中的氣流返流到干燥箱的現(xiàn)象，大大減少了壓力波動的可能性；另一方面也提高了安全性，因為，在第一次干燥階段，不需要太低的壓力。由于隔膜閥大部分時間處于關(guān)閉狀態(tài)，在一定程度上，可避免在高真空條件下出現(xiàn)真空泵內(nèi)的油蒸汽的返流現(xiàn)象。

本研究通過實踐一系列的測試方法，建立一套適用于公司凍干機(jī)性能驗證的方法，為今后凍干機(jī)驗證及生產(chǎn)工作的順利開展提供依據(jù)。

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（作者單位：浙江昌海制藥有限公司）