強直性脊柱炎患者血清MMP-9、DKK-1水平與疾病活動度的關系*

焦阿金,何川疆,許愛敏

(新疆喀什地區第一人民醫院檢驗科,新疆喀什 844000)

強直性脊柱炎(AS)是以中軸脊柱關節為主要病變部位，并累及脊椎關節、外周關節、骶髂關節及其鄰近肌腱、韌帶等部位的慢性系統性炎性疾病[1]。該病主要的病理特征為肌腱附著點炎和韌帶骨贅形成，好發于20～30歲的青年，發病隱匿，早期僅表現為外周或腰骶部關節不適，往往被忽視，且易與其他脊柱或外周關節疾病相混淆，導致延誤診治，致使病情持續進展，甚至出現勞動力喪失，嚴重影響患者的生活質量，還給患者和社會帶來巨大的經濟壓力[2]。最新的研究發現，基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)、Dickopff相關蛋白-1(DKK-1)在AS的疾病發生和發展中具有重要的作用，但對于兩者與AS疾病活動度的關系尚不清楚[3]。本研究對本院接診的145例AS患者進行了研究，旨在探討MMP-9、DKK-1與該病疾病活動度的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2015年1月至2017年1月本院風濕免疫科接診的145例AS患者納入AS組，納入標準：(1)符合AS的診斷標準[4]；(2)年齡20～70歲；(3)病程超過半年；(4)經本院醫學倫理委員會批準；(5)簽署知情同意書。排除標準：(1)合并累及關節或脊柱的其他疾病；(2)合并自身免疫性疾病；(3)既往有惡性腫瘤史；(4)哺乳期或妊娠期婦女；(5)合并甲狀腺等內分泌系統疾病；(6)合并感染性疾病；(7)合并嚴重心、肝、肺等重要臟器疾病。其中男性127例，女性18例；平均年齡(37.26±4.85)歲；平均病程(4.15±1.03)年；平均體質量指數(BMI)(25.78±4.07)kg/m2。另選擇同期性別、年齡、BMI相匹配的62例體檢健康者為對照組，年齡21～69歲，平均(37.08±4.81)歲；男性51例，女性11例；平均BMI(25.35±4.02)kg/m2；經體檢確認各項常規檢查結果均正常，排除風濕性疾病、感染性疾病、感染性疾病及明顯器質性疾病者。

1.2方法 根據AS疾病活動指數(BASDAI)評分，將145例AS患者進一步分為非活動期組(BASDAI評分<4分)48例，活動期組(BASDAI評分≥4分)97例。所有患者均給予24周的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)拮抗劑益賽普(上海中信國健藥業股份有限公司，國藥準字S20050059，25 mg/瓶)25 mg/次，2次/周。用非抗凝管采集對照組和AS組治療前后的外周靜脈血4 mL，靜置后35 r/min離心15 min，取上清液，存于-80 ℃冰箱待測。

1.3觀察指標 (1)生物學指標：采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清C反應蛋白(CRP)、MMP-9、DKK-1水平，試劑盒均購于美國R&D公司，嚴格按照說明書步驟進行操作；采用普朗PUC-2068全自動動態血沉儀測定紅細胞沉降率(ESR)；比較AS組治療前與對照組各臨床指標，比較活動期組與非活動期組血清MMP-9、DKK-1水平，比較AS組治療前后血清MMP-9、DKK-1水平。(2)疾病活動度：采用BASDAI、AS功能指數(BASFI)、AS病情活動度評分(ASDAS)觀察AS組治療前后的疾病活動度，采用修改后的AS脊柱評分(mSASSS)評估AS組治療前后病情改善情況，由頸椎和腰椎評分共同組成，總分0～72分，評分越高表示脊柱損傷越嚴重[5]。(3)相關性分析：采用Pearson相關系數分析MMP-9、DKK-1與BASDAI、BASFI、ASDAS評分間的關系。

2 結 果

2.1AS組與對照組各臨床指標比較 AS組ESR和血清CRP、MMP-9水平均高于對照組，血清DKK-1水平低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 AS組與對照組各臨床指標比較

2.2活動期組與非活動期組血清DKK-1、MMP-9水平比較 活動期組血清DKK-1低于非活動期組，血清MMP-9水平高于非活動期組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3AS組治療前后各指標比較 AS患者治療后血清DKK-1、mSASSS評分均無明顯變化(P>0.05)，MMP-9和BASDAI、BASFI、ASDAS評分均明顯下降，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表2 活動期組與非活動期組血清DKK-1、MMP-9水平比較

表3 AS組治療前后各指標比較

2.4DKK-1、MMP-9與AS疾病活動度的相關性分析 相關性分析顯示，DKK-1與BASDAI、BASFI、ASDAS評分無明顯相關性(P>0.05)；MMP-9與BASFI評分不相關(P>0.05)，與BASDAI、ASDAS評分呈正相關(P<0.05)。見表4。

表4 DKK-1、MMP-9與AS疾病活動度的相關性分析

3 討 論

目前，AS的臨床診斷主要依賴骶髂關節X線檢查和患者臨床表現，但AS發病早期不易察覺，部分患者臨床表現較輕微，如低熱、消瘦、輕度貧血、乏力等，X線檢查也無明確的骶髂關節炎表現，極易被忽視，延誤病情，關節炎性反應后出現纖維化和鈣化，形成骨贅，脊椎的柔軟度進行性下降，嚴重者甚至出現竹節狀脊柱，伸展或彎曲困難[6]。過往AS疾病活動度的預測主要以BASDAI為主，但BASDAI主觀性較強，常用的生物學指標(ESR、CRP)雖能在一定程度上反映AS的疾病進展，但靈敏度和特異度均較低，因此，臨床工作中，尋找能準確預測AS疾病進展和疾病活動度的生物標記物已迫在眉睫[7]。本研究對本院接診的145例AS患者進行了研究，發現AS患者血清DKK-1呈低表達，MMP-9呈高表達。

Wnt信號通路在骨平衡和成骨細胞分化過程中極為關鍵，β-catenin能正向調節Wnt信號通路，增加骨密度，而DKK-1是Wnt信號通路的抑制因子，能拮抗β-catenin的的穩定表達，降低骨密度，抑制骨形成[8]。劉亞等[9]研究表明，DKK-1能明顯抑制骨細胞的存活，對于關節炎大鼠，阻斷DKK-1能顯著降低骨細胞數量，減少骨吸收，下調骶髂關節融合。本研究中，AS組ESR、CRP水平明顯高于對照組，說明AS患者體內存在明顯的炎性反應，而AS組血清DKK-1明顯低于對照組，提示DKK-1在AS疾病進展中發揮重要作用。

AS的病理改變如滑膜炎、附著點炎，其實是細胞外基質(ECM)被蛋白水解酶不斷消化的過程，MMPs是細胞生長、遷移和ECM重塑的調節劑，在ECM的降解和重塑中具有重要作用，與AS的炎癥和骨質破壞病理過程關系密切[10]。MMP-9是MMPs家族中以酶原形式分泌的一員，主要由中性粒細胞、巨噬細胞、結締組織細胞、小膠質細胞和部分腫瘤細胞分泌，可破壞ECM中的Ⅳ、Ⅴ、Ⅸ、Ⅺ型膠原蛋白，破壞細胞屏障的完整性，增加血管通透性，激發炎性反應，在關節炎、血管形成等多種病理過程中呈高表達[11]。本研究結果顯示，AS組血清MMP-9明顯高于對照組，提示MMP-9在AS的發生、發展中發揮重要作用。經TNF-α拮抗劑治療24周后，AS組患者血清DKK-1、mSASSS評分無明顯變化，MMP-9和BASDAI、BASFI、ASDAS評分均明顯下降，提示TNF-α拮抗劑可能緩解病情，降低疾病活動度，但對AS骨化進程無明顯阻止作用。相關性分析顯示，DKK-1與BASDAI、BASFI、ASDAS評分無明顯相關性；MMP-9與BASFI評分不相關(P>0.05)，與BASDAI、ASDAS評分呈正相關；進一步說明MMP-9與AS疾病活動度有著良好的相關性，對疾病的好轉起預示作用。

4 結 論

綜上所述，AS患者血清DKK-1呈低表達，MMP-9呈高表達，TNF-α拮抗劑能明顯下調MMP-9水平，對DKK-1無明顯影響，MMP-9可反映AS的疾病活動度，DKK-1與疾病活動度無明顯相關，但DKK-1能在一定程度上反映AS的骨化進程。