硝基呋喃類藥物及其代謝物檢測方法的研究進展

摘要：本文對于硝基呋喃類藥物具體的種類和理化性質以及可能帶來的危害進行了相關的分析，并且對于膠體金免疫和酶聯免疫以及高效液相色譜，還有液相色譜串聯質譜等一些當前被使用在對硝基呋喃類藥物和其代謝物殘留進行檢查方式的具體使用情況進行研究，同時針對這一藥物檢測方式的有效應用給出了個人的一些建議。

關鍵詞：硝基呋喃類藥物及代謝物;檢測方法;研究進展

1 硝基呋喃類藥物簡介

硝基呋喃類藥物其本身屬于呋喃核的5位引入硝基以及2位被引入到其他基團中的一種通過人工合成方式生成的抗菌藥。因為這一類類藥物其本身都存在C=N雙鍵與5-硝基呋喃環的一種結構，因此四種藥物的理化性質是相同的，其都屬于一種無臭并且味苦，同時擁有穩定性質的一種黃色結晶粉末。其本身對于光敏感和代謝會產生一定的影響，其在和蛋白質融合在一起的時候會構成一種相對穩定的蛋白結合物。

2 硝基呋喃類藥物及其代謝物殘留檢測方法

2.1 膠體金免疫法（GICA）

膠體金免疫法其屬于前處理的方式其進行反應的時間相對較短，并且僅僅需要使用肉眼就能夠對其進行定性的一種檢測方法。我國的相關研究人員對于飼料中硝基呋喃抗生素膠體金檢測試的紙條進行研究，檢測出其中呋喃唑酮和呋喃它酮，以及呋喃西林與呋喃妥因進行檢測的最低極限分別能夠達到5，3，2，2 μg·kg-1，假陽性率能夠達到2%，假陰性率則能夠達到為0。

2.2 酶聯免疫法（ELISA）

酶聯免疫吸附試驗是一種具有高特異性和高靈敏度的半定量定量方法。它操作簡單，檢測時間短。它可以實現大量樣品的同時檢測。因此，它經常被用作藥物殘留分析的篩選方法。2004年，Cooper等首次制備了AOZ多長抗體，并提出了用于蝦組織AOZ檢測的ELISA方法。該方法的建立為開發硝基呋喃代謝物的ELISA奠定了基礎。徐一平[24]建立了AHD的ELISA方法，檢出限為0.085 mg·mL-1，通過測定豬肉樣品的回收率確定了該方法的準確性。現在市場上，如德國R-Biopharm，英國RANDOX等公司都有成熟的產品。

2.3高效液相色譜（HPLC）

高效液相色譜法是檢測硝基呋喃及其代謝物的常用方法之一。由于呋喃結構的紫外光譜吸收不明顯，靈敏度降低，不能滿足檢測要求。然而，衍生化后，硝基呋喃代謝產物可以產生強烈的紫外吸收，檢測限提高到1μg·kg-1。王元等建立了一種用酸測定水產品中四種硝基呋喃代謝物的方法。- 分解樣品，2-氯苯甲醛衍生化，用乙酸乙酯萃取，并用SPE柱純化，5.0-500。μg·L-1濃度范圍內線性關系良好，定量限為1.0μg·kg -1，兩次加入濃度水平的平均回收率為76%～102%，相對標準偏差小于10%（n = 6）。Chumanee等采用2-萘醛甲醛衍生法，用液相色譜 - 二極管陣列檢測器檢測蝦肉中4種硝基呋喃代謝物，檢出限為1μg·kg-1。

3 結論

目前，用于硝基呋喃類抗生素和其代謝物檢測方式主要有膠體金免疫法和酶聯免疫法以及液相色譜即串聯質譜檢測法，液相色譜法的優勢是自動化和精準度相對較高，可是其因為受到基質效應的干擾經常會產生一些假陽性，并且其檢測的儀器相對比較貴操作過程較為繁瑣在進行前處理過程較為復雜，因此需要有專業的人員對其進行分析。而液相色譜串聯質譜法，其自身的特異性相對較高敏感度和精確度也非常的強，這樣的情況使得檢測極限相對較低。可是其在使用上的成本比較高，操作流程復雜是其存在的主要缺點。而酶聯免疫法和膠體金免疫法基本上擁有快速簡便和高特異性的優勢，可是卻不能夠去完成電量檢測的需求，并且其經常會產生一些假陽性或者是假陰性的風險。所以針對不同的環節和不同的樣品，需要結合實際的情況去選擇不同的方式，只有這樣才能夠使得其測量的結果更加的準確和高效，除此之外還能夠降低使用資金。而在對液相色譜或串聯質譜檢測方式進行使用的過程中建議去運用內標法去完成定量這種方式不僅能夠減少基質效應對其產生的干擾同時還能夠防止前處置技術過程中目標成分丟失而產生的定量不精準的情況。對于酶聯免疫法或膠體金免疫法進行選擇的時候，需要盡可能選擇一些質量合格，并且其自身穩定性較高的產品，同時使其在對產品進行使用之前完成所需要的驗證。

硝基呋喃代謝物需要經過衍生增大分子量，通過這種方式去使其色譜行為得到改善同時還能夠令離子化效率檢測的精準度與靈敏度得到提升，當前我們國家所制定的檢測標準和國外報告的文獻里的一些標準都是通過加入了其他物質去保持在恒定溫度下進行檢測的這樣的一種情況所需要的檢測時間相對較久，并且其檢測效率也無法得到有效保證，尤其是在遇到一些緊急或突發情況的時候，就會使得檢測機構對檢測結果的上報出現延遲，當前很多文獻報道選擇的都是新型衍生化劑去進行檢測，這樣的一種方式能夠減少衍生時間，同時還能夠滿足檢測極限，使其回收率得到較大提升，筆者曾經通過把溫度提高到60度的方式，持續4小時去對其進行驗收，獲得的結果和連續進行16個小時的衍生，存在的差異并不是很大，但是如果將這種方式進行大范圍的使用，還需要對其進行進一步的驗證。

參考文獻：

[1]生威，李季，許艇.動物性產品中硝基呋喃類抗生素殘留檢測方法研究[J].農業環境科學學報，2006（25）：429-434.