王超 于震峰 王菲
【摘要】觀察三七粉對兔局部二度凍傷創面愈合的影響。將健康大白兔30只制備凍傷模型后分為三組,觀察VEGF的表達水平及統計創面愈合時間。三七粉外敷對兔局部二度凍傷創面愈合具有促進作用。
【關鍵詞】三七粉;凍傷;血管內皮生長因子
【中圖分類號】R259 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2019.11..02
凍傷是寒冷地區冬季多發病,是由于低溫導致全身或局部溫度下降而發生的損傷,二度凍傷為有漿液性滲出皮損,損傷達真皮層,三七不僅有良好的止血效果,還可以加快創面的修復,對創面的愈合具有重要的應用價值。本實驗開展三七粉外敷對兔局部二度凍傷創面愈合的機制研究,為二度凍傷創面的臨床治療探討出一種合理有效且簡單經濟的治療方法,并提供其作用的理論依據。
1 資料與方法
1.1 模型及分組
健康新西蘭大白兔30只(雌雄不限),麻醉后10%硫化鈉脫毛,將金屬片(5 cm×10 cm)浸入-196℃液氮中取出立即將其貼緊兔背部裸露皮膚區10秒,使皮膚造成局部深二度以上凍傷。將制備好的大白兔模型隨機分為三組,
A(對照組),B(常規換藥組),C(三七粉外敷組)批準文號(滇20162606,云南三七科技藥業有限公司)。
A組不做任何處置;B組常規雷夫努爾紗布包扎換藥;C組用三七粉浸透紗布(1 g/cm2)外敷包扎換藥。
1.2 樣本采集
在模型制備后的第1、3、5、7天每組隨機抽取1只動物,麻醉后在背部皮損處取一標本,大小約2 cm×1 cm。標本采集完成后,對動物繼續飼養直到該動物皮損愈合。將取得的病理標本進行固定(4%甲醛溶液),并形成石蠟塊,完整保存。
1.3 檢測指標
用毫米方格紙法分別在第3、5、7、14天對殘余皮損面積測量,并對皮損完全愈合時間進行準確計算,創面愈合判斷標準為皮損的上皮化率。
對VEGF的表達陽性率、血管密度進行歸納、整理,并用4%甲醛溶液對標本進行固定,采取常規石蠟包埋法進行制作,形成切片。在檢測時,需要進行脫蠟水化,并對抗兔VEGF抗體應用免疫組化染色,VEGF陽性評估:半定量計分法判定,并以陽性著色程度為依據進行評分。微血管的密度判定:參照 Weidner的計數方法對該指標進行計數。
2 結 果
傷后第1天每組凍傷皮損處呈現暗紅色,均可見水腫和滲出。凍傷后第3天發現均處于腫脹狀態,且A組、B組皮損處附著壞死組織,A組壞死灶明顯,與A組壞死組織比較,B組相對較少,C組皮損處壞死組織很少。傷后第5天A組皮損處加深明顯,表面壞死組織結成厚痂皮。B組皮損處表面結有薄層壞死痂皮。C組皮損處基底較濕潤無明顯痂皮,傷后第7天A組皮損處不僅存在較厚的壞死組織,還可見少量的分泌物;B組皮損處觀察,皮損組織開始溶痂并附著少量液化壞死組織,C組皮損處基底較新鮮,部分皮損邊緣上皮化。14天A組皮損處壞死痂皮部分脫落,部分皮損上皮化愈合。B組皮損處壞死組織脫落皮損邊緣已上皮化愈合,中間有部分未上皮化,皮損基底較紅潤。C組皮損處已基本上皮化愈合。
對皮損VEGF表達陽性結果分析,在免疫組化染色圖片中發現,血管、毛囊、皮損基底部細胞為VEGF主要分布部位。傷后第1 d,比較三組VEGF陽性率,無顯著差別。
第3 d開始,C組表現為棕黃色的顆粒細胞顯著增多,皮損VEGF陽性程度增加且速度較快,持續時間至第5 d。至第
7 d天時,A組VEGF表達仍處于低水平狀態,而B組,VEGF有增高趨勢,但是增高程度、表達強度均低于C組。
對皮損愈合率結果進行歸納、統計,結果顯示,C組皮損愈合率最高,A組最低,對傷后第14 d結果觀察,C組、A組皮損愈合率分別為(96.29±2.31)、(67.86±1.76)。皮損愈合率組間對比,有顯著差異性(P<0.05)。對不同時間的組間愈合率數據對比,差異有統計學意義(P<0.05)。
3 討 論
目前用于凍傷治療的藥物不多,我國目前大力提倡中醫中藥發展,所以尋找一種常用中藥治療凍傷的想法油然而生。
三七粉是臨床中醫中一種傳統中藥,該藥物具有溶解血栓、止血、擴張血管、活血化瘀及改善微循環的作用,本實驗通過毫米方格法測量殘余創面面積,測算皮膚上皮化率,發現三七粉外用對創面的愈合有促進作用,它不僅可以加速壞死物質清除,還具有促進成纖維細胞和上皮細胞生長的作用。可得出外用三七粉組愈合時間明顯快于常規換藥組及對照組。
VEGF是一種調控因子,對血管生成具有一定的調控作用。VEGF可以對內皮增殖、內皮遷移、血管形成等進行刺激,從而保證血管的完整性,利于血管正常狀態的維持。此外,在創面愈合之中,可以將內皮因子、毛細血管數量作為其指標,若數量呈現增加趨勢,則說明創面愈合效果好。在本次實驗中,通過對VEGF測定,測定結果對三七粉用于創面治療的效果予以客觀證實,說明三七粉可以促進創面壞死組織清除,利于血管內皮生長因子表達,有效的縮短了創面愈合時間。
綜上實驗表明,三七粉外敷,對凍傷皮損壞死組織脫離具有加快效果,且對上皮細胞生長、血管內皮生長因子生成具有促進效果,利于凍傷皮損愈合。
參考文獻
[1] 薛寶生,王 楊,孫海峰.凍傷診療研究進展[J].創傷與急危重病醫學,2014,2(2):65.
[2] 徐曉光,顧 軍.凍瘡的防治[J].人民軍醫,2002,45(3):138-140.
[3] 劉義梅,朱 毅,陳科力.中醫藥治療凍傷的研究[J].中南民族大學學報,2013,32(3).
[4] 劉 璟,地里下提·白克力,修彬華.自制凍傷軟膏治療兔凍傷的病理觀察[J].藥學服務與研究Pharm Care Res 2012Feb;12(1).
[5] 周 旭,呂俊蘭,靳士曉,陳紅鴿,袁海龍,韓 晉.家兔皮膚輕度凍傷模型的研究[J].解放軍軍醫學報,2011,27(6).
本文編輯:劉欣悅