香杞平脂咀嚼片的制備工藝優化與質量評價

陸敏，常曉婕，張文晉，劉寧，2，楊佳美，劉艷華，2，馬學琴，2，楊建宏，2，余建強，2，李鳳梅，2，*

（1.寧夏醫科大學 藥學院，寧夏 銀川 750004；2.寧夏回藥現代化工程技術研究中心，寧夏回醫藥協同創新中心，寧夏藥物創新與仿制藥研究重點實驗室，寧夏 銀川 750004）

高血脂癥是一種常見而多發的代謝性疾病，是引起心腦血管疾病的重要危險因素，常見于中老年人[1]。中醫學上無高血脂癥的病名，認為高血脂癥為本虛標實，屬“血瘀”、“痰濁”范疇，臨床辨證多歸于肝腎虧虛、脾虛痰濁、氣滯、血瘀[2]，治療時大多采用補益肝腎、健脾益氣、滋陰養血、活血化瘀、清熱通便、消食化痰之藥。從現代醫學觀點看，中藥的降脂作用主要從抑制膽固醇的吸收、調節血脂代謝、促進膽固醇排泄來體現[1]。由于治療高血脂的大多是為化學藥物，雖然服用后起效快，但對身體具有損傷，而如果采用食療的方式，雖然起效緩慢但通過長期食用，能夠起到防治高血脂的作用[3]。

咀嚼片系指于口腔中咀嚼或吮服使片劑溶化后吞服，在胃腸道中發揮作用或經胃腸道吸收發揮全身作用的片劑[4]。它是一類可在口腔內嚼碎后咽下的片劑，大小一般與普通片劑相同，可根據需要制成不同形狀的異形片[5]。具有口感好，服用方便，溶出迅速，吸收快，生物利用度較高等優點。研究表明，胡蘆巴[6-7]莖葉及種子的水提物和醇提物均有顯著的降血脂的作用。枸杞[8]可明顯降低血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）和低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）。仙人掌[9]干粉和浸出液，可降低高脂血癥小鼠血清TC、TG和LDL-C 含量，明顯升高高密度脂蛋白含量。本研究使用單因素試驗優化并篩選最佳處方，為了有效控制制劑質量，采用高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC）法測定香杞平脂咀嚼片中主藥胡蘆巴中提取物胡蘆巴堿的含量。

本研究將具有降血脂作用且具有寧夏地方特色的3種天然植物：枸杞、葫蘆巴及仙人掌進行科學配伍，并通過單因素考查試驗，優化制備工藝，研制成長期應用具有良好降血脂功效的健康食品—“香杞平脂咀嚼片”。本研究首次將枸杞、葫蘆巴和仙人掌結合，制備香杞平脂咀嚼片，將寧夏地方特色資源優勢轉化為經濟產業優勢。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

枸杞提取物、葫蘆巴提取物、仙人掌提取物、甘露醇等制劑使用輔料均為食品級別：鑫鑫食化有限公司；胡蘆巴堿對照品：上海科順生物科技有限公司；乙腈（色譜純），其余試劑均為分析純。

1.2 儀器與設備

YP202N 單沖壓片機：上海中南醫藥機械有限公司；WFO-700W 送風定溫干燥箱：上海愛朗儀器有限公司；島津HPLC 儀[配有LC-20AT 泵、檢測器SPD-20A、自動進樣器 SIL-20A、InerSustain 色譜柱（4.6 mm×25 mm，5 μm）等]：島津（中國）有限公司；KQ-500E 型超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司。AL104 電子天平：梅特勒-拖利多儀器上海有限公司。

1.3 制備工藝研究

1.3.1 制備工藝路線

香杞平脂咀嚼片制備工藝路線圖，見圖1。

圖1 香杞平脂咀嚼片制備工藝路線圖Fig.1 Preparation process diagram of xiang qi lower blood lipids chewable tablet

1.3.2 填充劑種類的篩選

試驗分別選用甘露醇、α-乳糖、甘露醇：α-乳糖（質量比 1∶1）、甘露醇：α-乳糖（質量比 2∶1）為填充劑，使用14 目篩制粒，干燥，整粒，壓片（機器壓力為12 kg），考察片的口感、片劑外觀、吸濕性和硬度為指標，篩選填充劑。

1.3.3 填充劑用量的篩選

用甘露醇做填充劑，按輔料用量分別為原料藥的0.5 倍、1 倍、2 倍和 3 倍，分別使用 14 目篩制粒，干燥，整粒，壓片（機器壓力為12 kg），以口感、片外觀和硬度為指標，篩選出最佳用量。

1.3.4 甜味劑的篩選

以甜菊糖作為甜味劑，分別按0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的質量進行制粒（14 目篩），干燥，整粒，壓片（機器壓力為12 kg），通過矯味效果確定用量。

1.3.5 酸味劑的篩選

以檸檬酸為酸味劑，分別按0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的質量進行制粒（14 目篩），干燥，整粒，壓片（機器壓力為12 kg），考察矯味效果，確定用量。

1.3.6 香精種類的篩選

香精選擇為薄荷香精和橘子香精，分別按照加入質量分數為1%薄荷香精、1%桔子香精和0.5%薄荷香精加上0.5%桔子香精，分別使用14 目篩制粒，干燥，整粒，壓片（機器壓力為12 kg），考察矯味效果，確定種類。

1.3.7 香精用量的篩選

以薄荷香精加入質量分數為0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%進行分別制粒（14 目篩），干燥，整粒，壓片（機器壓力為12 kg），考察矯味效果，確定薄荷香精用量。

1.3.8 潤濕劑的篩選

分別以75%、80%、85%、90%、95%乙醇溶液進行制軟材，分別使用14 目篩制粒，干燥，整粒，壓片（機器壓力為12 kg），通過以軟材黏度、過篩情況、片外觀和硬度為指標，篩選出最佳潤濕劑。

1.4 胡蘆巴堿的含量測定

1.4.1 色譜條件

色譜柱 InerSustain C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相為乙腈：H3PO4溶液（10∶90，體積比）；流速為1 mL/min，檢測波長：265 nm；柱溫：30℃；進樣量：10 μL。理論塔板數按胡蘆巴堿峰計算不應低于4 000。

1.4.2 溶液的制備

對照品溶液的制備[10]：精密稱取胡蘆巴堿對照品0.003 3 g，加50%甲醇溶解并定容于10 mL 容量瓶，搖勻，作為貯備溶液。精密量取對照品貯備液1 mL 至5 mL 容量瓶中，加50%甲醇定容，搖勻，即得66 mg/L的對照品溶液。

供試品溶液的制備[11-12]：取香杞平脂咀嚼片20 片，精密稱定，研細。取藥粉約1.5 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，加入50%的甲醇30 mL，密塞，振搖，超聲處理50 min，放冷，過濾至50 mL 容量瓶中。錐形瓶用約10 mL 50%甲醇沖洗，洗液一并濾入容量瓶中。加50%甲醇定容至刻度，搖勻。溶液用0.45μm 微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液。

1.4.3 系統適用性試驗

按色譜條件，分別將各溶液進樣瓶放入進樣盤中，設置程序，各進樣 10 μL，記錄色譜圖[12-13]。

1.4.4 線性關系考察

精密量取對照品貯備液 0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 mL，分別置于5 mL 量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，即得不同濃度的對照品溶液。根據1.4.1 的色譜條件下進樣測定，以胡蘆巴堿溶液濃度（X）（mg/L）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線。

1.4.5 精密度試驗

取同一對照品溶液，連續進樣5 次，每次進樣10 μL，按上述1.4.1 的色譜條件進行測定。

1.4.6 重復性試驗

取同一批香杞平脂咀嚼片5 份，精密稱定，按照“1.4.2”項下的方法制備供試品溶液，按1.4.1 下色譜條件進行測定。

1.4.7 穩定性試驗

精密吸取“1.4.6”中的1號供試品，在20℃下放置0、2、4、6、8、12 h 后分別進樣測定，記錄峰面積。

1.4.8 加樣回收率試驗

取供試樣品藥粉6 份，各約1.5 g，精密稱定，各加入濃度為0.450 mg/mL 的對照品溶液1 mL，按“1.4.2”項下方法平行制備供試品溶液，按1.4.1 的色譜條件進樣，計算得回收率。

1.5 樣品含量的測定

取3 批樣品粉末各1.5 g，每批3 份，精密稱定，測定樣品中葫蘆巴堿含量，結果用平均值表示。

2 結果與討論

2.1 制備工藝

2.1.1 填充劑的確定

咀嚼片常用填充劑為蔗糖、糊精、乳糖、甘露醇等。蔗糖味甜，制出的片劑光滑，但易吸濕，且不適用于糖尿病人[13]，而糊精口感較差，故本試驗分別選用甘露醇、α-乳糖、甘露醇∶α-乳糖（質量比 1∶1）、甘露醇∶α-乳糖（質量比 2∶1）為填充劑，結果見表1 與圖2。

表1 不同填充劑對咀嚼片的影響Table 1 The influence of different fillers on chewable tablets

圖2 藥粉與不同填充劑的混合物的吸濕率Fig.2 Moisture absorption rate of mixture of materials and different fillers

表1表示甘露醇制備出的片硬度適中，更適合老人和小孩服用；圖2 顯示此原料的吸濕性強，在使用甘露醇作為填充劑的時候其吸濕性大大減小，所以本研究采用甘露醇作為填充劑。

2.1.2 填充劑用量的確定

以甘露醇做填充劑，以口感、片外觀和硬度為指標，試驗結果見表2。

表2 甘露醇用量對咀嚼片的影響Table 2 Effect of mannitol dosage on chewable tablets

綜合各項指標，輔料與原料質量比為1∶1 時，口感和硬度均較適中，確定填充劑與原料藥的質量比為1∶1 時效果較好。

2.1.3 甜味劑的確定

常用甜味劑包括天然的和合成的兩大類。天然的甜味劑有蔗糖、單糖漿、蜂蜜、山梨醇、甘露醇、甜菊糖等；合成的甜味劑有糖精鈉、阿斯巴甜和甜蜜素。本試驗選擇天然甜味劑-甜菊糖。它具有高甜度、低熱能的特點，其甜度是蔗糖的200 倍～300 倍，熱值僅為蔗糖的1/300。是一種可替代蔗糖非常理想的甜味劑，常作為保健甜味添加劑。通過矯味效果確定最終用量，結果見表3。

表3 甜味劑用量對咀嚼片口感的影響Table 3 Effect of the dosage of sweetener on the taste of chewable tablets

因為藥物本身有一定的甜味，所以加入甜菊糖如果量過大，會產生甜膩感，效果不佳。將甜菊糖用量調至0.1%后，甜味適度，掩蓋苦味能力最佳，矯味效果好。

2.1.4 酸味劑的確定

檸檬酸是最為常用的酸味劑，且安全可靠易于獲得，本研究采用檸檬酸作為酸味劑，通過矯味情況確定最終用量。檸檬酸用量為0.2%時酸味不夠，0.4%時酸味一般。將檸檬酸用量調至0.3%時，酸度合適，與甜菊糖混合效果最佳，結果見表4。

表4 酸味劑用量對咀嚼片口感的影響Table 4 Effect of the dosage of sour agent on the taste of chewable tablets

2.1.5 香精的確定

采用橘子香精和薄荷香精中的一種或復配進行掩味，通過矯味情況確定最終用量，結果見表5、表6。

表5 不同香精對咀嚼片口感的影響Table 5 Effects of different flavors on the taste of chewable tablets

表6 薄荷香精用量對咀嚼片口感的影響Table 6 Effect of the amount of mint flavor on the taste of chewable tablets

綜上所述，在使用薄荷香精用量在0.3%的時候掩味效果是最佳。

2.1.6 潤濕劑的選擇

由于原料藥吸濕情況嚴重，如果使用純水會使制粒困難，難以過篩，最終根據軟材黏度，過篩情況和片的外觀和硬度確定最終使用85%乙醇進行制粒，得到的顆粒較好，結果見表7。

2.2 葫蘆巴含量測定

2.2.1 高效液相系統適應性

對照品與供試品的高效液相色譜圖見圖3。

如圖3所示供試品和對照品色譜圖相應的位置上，有相同的的胡蘆巴堿峰。

表7 乙醇潤濕劑對咀嚼片制粒情況的影響Table 7 Effect of ethanol wetting agent on granulation of chewable tablets

2.2.2 方法學考察

葫蘆巴堿線性關系曲線圖見圖4。

由圖4可知，胡蘆巴堿的檢測濃度在6.6 mg/L～132 mg/L 時與峰面積值呈良好線性關系，y=13 380x-2 123（R2=0.999 9）。并根據1.4.1 操作得到精密度的相對標準偏差（relative standard deviation，RSD）為0.22%；重復性的RSD 為2.00%；在12 h 內的RSD 為1.40%；得到6 份樣品的平均加樣回收率為95.38 %，RSD 為1.13%，表明該高效液相儀器精密度良好，此方法重復性較好，且供試品溶液在12 h 內穩定。

圖3 對照品、供試品的高效液相色譜圖Fig.3 HPLC chromatogram of reference，test and negative control

圖4 葫蘆巴堿線性關系曲線圖Fig.4 The linear relationship graph of Trigonelline

2.2.3 樣品含量測定

根據操作“1.5”得到3個批次樣品的平均含量為0.25 mg/g，RSD 值為 0.80%。

3 結論

研究通過制備工藝研究最終制備工藝為：枸杞、仙人掌和葫蘆巴3種提取物質量分數共占49.15%，甘露醇49.15%，甜菊糖0.1%，檸檬酸0.3%，薄荷香精0.3%，將以上物質混合均勻，使用85%乙醇進行制軟材，過14 目篩制粒，50℃烘箱干燥 2 h，整粒，加入整粒后占顆粒質量1%硬脂酸鎂混勻，10 mm 沖頭壓片（機器壓力為12 kg）得到香杞平脂咀嚼片。隨著人們對健康的重視，人們也意識到食療能夠起到促進健康長壽，防治疾病的作用[3]。近年來，人民生活水平的提高，飲食不規范導致血脂異常，而市面上有關于調節血脂平衡的藥物多數是化學合成藥物，具有較強的不良反應和副作用，且無法長期食用，治標不治本，因此通過開發香杞平脂咀嚼片，不僅能夠為防治高血脂的人們提供多種產品選擇，還能將寧夏的本土資源進行利用轉化，將資源利用。前期通過動物實驗研究[14]，證明香杞平脂咀嚼片具有降血脂的功效，同時對肝臟具有保護作用。此研究對香杞平脂咀嚼片進行質量研究，結果表明該咀嚼片質量可控，葫蘆巴堿含量為0.25 mg/g。證明此工藝得到的香杞平脂咀嚼片符合咀嚼片的制備要求，安全可靠，有較好的外觀，口感清爽，質量可控，且具有一定的降血脂和保肝的功效，為今后進一步實驗和產品深入開發提供基礎。