33157例患者血型不規則抗體篩查的結果分析

劉潺　李平　王樹亞　劉婷婷

【摘 要】目的：通過對本院住院患者血清不規則抗體篩查結果的分析，探討血型不規則抗體篩查在臨床輸血中的意義。方法：應用微柱凝膠免疫檢測技術對本院2015年8月至2016年7月33157名住院患者進行不規則抗體篩查，并將陽性結果復查后再采用譜細胞分析，確定不規則抗體的特異性。結果：1）在33157名患者中共查出不規則抗體陽性101例，占0.30%，其中女性患者陽性率為0.420%，高于男性患者（0.181%），差異有統計學意義（P<0.01）。2）61例患者接受了抗體類型鑒定，其中檢出特異性抗體42例（68.85%），包括Rh系統患者31例（50.82%），MNS系統患者8例（13.11%），Lewis系統患者2例（3.28%），抗Ec合并抗Mur患者1例（1.64%）;非特異性抗體患者15例（24.59%），包括自身抗體7例（11.48%），冷抗體3例（4.92%），自身抗體合并同種抗體5例（8.20%）;性質不明抗體4例（6.56%）。3）按臨床科室劃分，不規則抗體檢出率以風濕免疫科患者最多，占4.67%，其次為血液科患者，占1.71%，內科患者占0.49%，產科患者占0.33%。結論：輸血前血型不規則抗體的篩查與種類鑒定非常必要，及早發現有臨床意義的不規則抗體，減少溶血性輸血反應，保證患者輸血安全。

【關鍵詞】 不規則抗體;篩查;輸血安全

Analysis of irregular antibody screening results in 33157 hospitalized patients

Liu Chan， Li Ping， Wang Shuya， Liu Tingting

Department of Transfusion， Affiliated Hospital of Medical School of Nanjing University， Nanjing， Jiangsu 210000

[Abstract] Objective： Red blood cell irregular antibodies were analyzed in hospitalized patients to ensure safty of blood transfusion. The type of antibodies and distribution were investigated to explore the significance in clinical transfusion. Methods： Irregular antibodies screening was performed with microcolumn gel method in 33157 hospitalized patients between August 2015 and July 2016. The positive results were reviewed and further analyzed to identifiy the specificity of irregular antibodies. Results： 1） 101 cases of irregular antibodies were detected accounting for 0.30% with 72 females （0.402%） and 29 males （0.180%） Female patients had a significantly high positive rate compared with male（P<0.05）. 2） Of 61 positive samples for further antibody specificity， 42 cases were identified as specific antibodies， including 31 cases of Rh group （50.82%）， 8 cases of MNS group （13.11 %）， 2 cases of Lewis group （3.28%）， and 1 case of antiEc combined with antiMur， while 15 cases as nonspecific antibodies， including 7 cases of auto antibodies， 3 cases of cold antibodies， 5 cases of autoantibodies combined with specific antibodies and 4 cases of others. 3） The distribution of positive irregular antibodies in different clinical departments： rheumatology department with a highest rate at 4.67%， followed by hematology department （1.71%）， internal medicine department （0.49%） and obstetrical department （0.33%）. Conclusion： It is essential to perform irregular antibodies screening and identification for patients before transfusion， which is of great significance for ensuring blood transfusion safety and reducing adverse transfusion reaction.

[Key words]Irregular antibody;Screening;Blood transfusion safety

輸血前檢測是保證臨床用血安全的重要手段。隨著輸血技術的發展和完善，ABO和RhD血型鑒定作為常規檢測手段極大地減少了臨床輸血不良反應的發生，而因紅細胞不規則抗體導致臨床輸血產生的溶血反應還時有發生[12]。紅細胞血型不規則抗體是指ABO血型系統以外的其他血型系統抗體，如Rh、MNS、Lewis等血型系統的抗體。不規則抗體是導致臨床溶血性輸血不良反應、新生兒溶血癥及紅細胞輸注無效以及實驗室疑難交叉配型的主要原因[36]。近年來，人們對血型系統的認識逐漸加深，不規則抗體篩查已經成為輸血前相容性檢測的常規項目。尤其對于有輸血史和妊娠史的患者，避免了由于免疫性抗體引起的遲發型溶血等輸血不良反應。不規則抗體的類型在不同國家和地區分布有差異，對本地區人群不規則抗體的分布特征和頻率進行考察，是臨床輸血安全和優化用血管理的保證。為了解不規則抗體在本院住院患者中的分布特點，選取本院33157名患者進行篩查和分析，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2015年8月至2016年7月收治的住院患者共33157例，其中男性16016例，女性17141例，年齡分布為1～100歲。EDTAK2抗凝血2mL，分離血漿，檢測。

1.2 儀器與試劑

抗體篩選紅細胞、微柱凝膠檢測卡及儀器由長春博訊生物技術有限公司提供，專用孵育器、離心機由長春博研科學儀器有限責任公司提供，抗體鑒定譜細胞由上海血液生物醫藥有限公司提供。以上試劑均批檢合格并在有效期內使用。

1.3 方法

1.3.1 不規則抗體篩選的方法 分別取50μL 0.8%的I、II、III號篩選細胞與50μL患者血清，加入微柱凝膠卡反應孔中，置于37℃專用孵育器孵育15min后，放入專用離心機900r/min離心2min，1500r/min離心3min。結果判讀：離心后，若紅細胞凝聚在凝膠表面或者中間為抗體陽性，沉于反應孔底部則為陰性。抗體初步篩查為陽性的標本進行復檢以排除人為因素和（或）操作失誤。復查結果仍為陽性的標本進一步用抗體鑒定譜細胞進行抗體特異性分析。

1.3.2 不規則抗體鑒定 通過鹽水法、抗人球蛋白法或聚凝胺法對不規則抗體進行特異性鑒定。根據受檢血漿與譜細胞反應格局以及相應抗原測定判讀抗體特異性。當受檢血漿與所有譜細胞和自身細胞的凝集強度一致時，判斷為非特異性自身抗體[7]。

1.3.3 冷抗體檢測 將患者自身紅細胞與血清在4℃進行冷抗體吸收試驗，重復吸收3次，將充分吸收后的血清與譜細胞在37℃反應。若無凝集、無溶血，則排除同種抗體的存在，確定為單一冷抗體;冷抗體特異性鑒定通過患者血清與成人OI細胞、臍血Oi細胞及自身細胞的反應格局進行判斷[8]。

1.3.4 自身抗體檢測 將患者紅細胞放散后與患者血清進行自身抗體吸收試驗，將吸收后的患者血清與譜細胞進行反應，根據反應格局確定抗體類型，若無凝集、無溶血，則排除同種抗體的存在。將患者紅細胞放散液與譜細胞及自身細胞進行反應，若陽性反應強度一致，則判斷為單一非特異性自身抗體[9]。

1.4 統計學處理

應用SPSS 22.0軟件對數據進行統計分析，計數資料采用例數或百分率（%）表述，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 血型不規則抗體的陽性率

33157例患者樣本中檢出不規則抗體陽性101例，陽性率為0.30%，其中女性72例，陽性率為0.420%，男性29例陽性率為0.181%。女性患者不規則抗體的陽性率明顯高于男性，差異具有統計學意義（P<0.01）。具體結果見表1。101例抗體篩查陽性患者中無輸血史且無妊娠史的29例，占28.71%，而有輸血史或妊娠史的為72例，占71.29%，明顯高于無輸血史無妊娠史患者。結果見表2。

2.2 血型不規則抗體的鑒定

對101例不規則抗體陽性樣本中的61例進行不規則抗體的鑒定（其余40例拒絕送檢）。根據鑒定結果，特異性抗體42例（68.85%）：包括Rh血型系統31例（50.82%），MNS系統8例（13.11%），Lewis系統2例（3.28%），抗Ec合并抗Mur 1例（1.64%）;非特異性抗體15例（24.59%）：包括自身抗體7例（11.48%），冷抗體3例（4.92%），自身抗體合并同種抗體5例（8.20%），以及性質不明抗體4例（6.56%）。數據分析結果見表3和表4。

2.3 不同臨床科室患者不規則抗體陽性率比較

不同臨床科室患者不規則抗體陽性率不同，差異有統計學意義（P<0.01），風濕免疫科檢出率最高，血液病患者、產期疾病患者不規則抗體陽性率明顯高于外科、其他患者。見表5。

3 討論

本次對本院33157例住院患者進行了血型抗體篩查，共檢測出不規則抗體陽性101例，陽性檢出率為0.30%，接近文獻報道的陽性率（0.32%）[1012]。101例不規則抗體陽性患者中，女性陽性檢出率（0.420%）明顯高于男性（0.181%），差異有統計學意義（P<0.01）。輸血和妊娠是導致患者產生不規則抗體的兩大因素，而女性同時存在著輸血和妊娠雙重被動免疫機會，使得女性的不規則抗體陽性檢出率遠高于男性。

本次經鑒定的61例不規則抗體中，Rh系統抗體31例，占50.82%，其次為MNS系統（13.11%），Lewis系統（3.28%）。Rh系統抗體在血型免疫抗體中所占比例較高，也是引起免疫性溶血反應最常見的不規則抗體[13]。Rh系統的抗體多為IgG抗體。這類抗體能與輸入患者體內的、表面具有相應抗原的紅細胞結合，產生抗原抗體反應，破壞輸入體內的紅細胞，產生溶血性輸血反應。此外，IgG類抗體能通過胎盤進入胎兒血液循環。如果母嬰Rh血型不合，母親體內因此產生的不規則抗體進入胎兒血液循環，即導致較嚴重的新生兒溶血病。Rh系統抗體又以抗E為主（25例，40.98%）。我國漢族人群E抗原的分布頻率為47%，接近一半。在臨床輸血中，未對獻血者及受血者的E抗原作檢測，隨機輸血使得產生抗E的機會明顯增多。有研究表明，抗原陽性與陰性的百分率越接近，產生抗體的機會就越多[14]。已有不少文獻報道由抗E引起的遲發型溶血反應和新生兒溶血反應。目前，一些醫院已將E抗原作為血型檢測常規，需高度重視。與此相反，我國漢族人群的D抗原的分布頻率高達99.6%，同時國內實驗室普遍進行RhD抗原的檢測，并建立了RhD陰性獻血源的信息系統，保證RhD陰性血制品的供應。本次還檢出1例Rh血型系統聯合其他稀有血型系統抗體，還有7例自身抗體及5例自身抗體合并同種抗體，對需要輸血的不規則抗體陽性患者均進行了交叉配血，選擇對應抗原陰性或相合的血液進行輸注，未發生輸血不良反應。

從不規則抗體陽性患者的科室分布來看，風濕免疫科不規則抗體的檢出頻率最高，其次為血液科，內科和產科。風濕免疫科患者多存在自身免疫功能的改變，體內循環免疫復合物增多，且反復輸注血制品。血液科、內科患者一般要長期反復輸血。有研究表明，慢性病患者反復輸血時，每輸1單位紅細胞、血漿，被動免疫的風險增加1%～2%，多次輸血后機體內所產生同種抗體概率上升至15%～20%[15]。產科患者則由于妊娠等原因產生不規則抗體的機會較高。這種分布特征也從側面表明了反復輸注血液制品和妊娠是產生不規則抗體的主要原因。

綜上所述，輸血前進行不規則抗體篩查是十分必要的，對于有反復輸血史以及妊娠史的患者更應該提高重視，及早發現有臨床意義的不規則抗體，選擇抗體對應抗原陰性的同型血進行輸注，以減少因此產生不規則抗體而導致的輸血不良反應。同時，龐大而復雜的血型系統對處在輸血檢驗日常的工作人員也提出了更高的要求：提高檢測技能，配備符合本地抗體分布特點的譜細胞，避免誤判漏檢，確保臨床用血安全。

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