D松醇復(fù)配Mn2+對(duì)2型糖尿病大鼠的降血糖作用及其機(jī)制的研究

王 夢(mèng),張澤生,劉 暄,李雨蒙,張文菱子

(天津科技大學(xué)食品工程與生物技術(shù)學(xué)院,天津 300457)

糖尿病已經(jīng)成為繼心腦血管疾病和腫瘤之后世界第三大非傳染性疾病,嚴(yán)重影響到人們的正常生活,威脅著人類的健康[1]。2 型糖尿病是一種復(fù)雜的代謝紊亂疾病,主要發(fā)病機(jī)制是機(jī)體胰島β細(xì)胞受損,患者出現(xiàn)胰島素抵抗導(dǎo)致機(jī)體血糖水平上升[2]。胰島素抵抗是指胰島素效應(yīng)器官對(duì)胰島素的敏感性下降,主要是指外周靶器官對(duì)胰島素介導(dǎo)的葡萄糖代謝作用不敏感的狀態(tài)[3]。

D-松醇是D-手性肌醇的一種甲基化衍生物,在植物中含量十分豐富。目前制備方法有從天然植物中提取和化學(xué)合成等方法[4-9]。D-松醇具有類胰島素的作用,它能夠通過(guò)提高機(jī)體對(duì)胰島素的敏感程度來(lái)緩解機(jī)體胰島素抵抗現(xiàn)象,調(diào)控機(jī)體血糖水平,而且D-松醇在促進(jìn)胰島素功能的同時(shí)還可以為機(jī)體傳輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[10-12]。此外,D-松醇還可以保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的胰腺組織、肝臟、腎臟,修復(fù)由糖尿病引起的肝、腎功能損傷[13-14]。有研究表明,D-松醇可與肝細(xì)胞受損后產(chǎn)生的半乳糖胺在Mn2+的螯合作用下結(jié)合,形成胰島素第二信使[15],改善胰島素抵抗癥狀。而D-松醇復(fù)配Mn2+的降血糖效果和機(jī)制研究未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)注射鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)建立2型糖尿病大鼠模型,探究 D-松醇復(fù)配Mn2+后的降血糖作用效果,并初步探討其作用機(jī)制,為預(yù)防或延緩糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

雄性SPF級(jí)大鼠 85只,體重(200±20) g,斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司,許可證編號(hào)[SCXK(京)2016-0002];D-松醇(純度95%) 西安一品生物技術(shù)有限公司;食品級(jí)MnSO4科漢森(天津)食品添加劑公司;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基礎(chǔ)飼料 斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司;STZ 北京索萊寶科技有限公司;大鼠胰島素酶聯(lián)免疫試劑盒、糖化血清蛋白試劑盒 南京建成生物工程研究所;鹽酸吡格列酮 北京太洋藥業(yè)股份有限公司;高糖高脂飼料 為實(shí)驗(yàn)室自制,高脂高糖飼料配方為:50%基礎(chǔ)飼料、22%白砂糖、15%豬油、9%酪蛋白、1%明膠、0.5%膽固醇、0.5%膽酸鹽、1% 礦物質(zhì)、1% 維生素。

OneTouch血糖儀 英國(guó)強(qiáng)生公司;Multiskan FC酶標(biāo)儀 瑞士Mettler Toledo公司;GLM-17R冷凍離心機(jī) 美國(guó)Thermo Fisher公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 2型糖尿病大鼠模型的建立 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物始終飼養(yǎng)于清潔級(jí)動(dòng)物房中(環(huán)境設(shè)施合格證號(hào):SYXK(津)2006-0005),并保證實(shí)驗(yàn)大鼠自由飲水、進(jìn)食,保持室內(nèi)環(huán)境溫度為(22±2) ℃、濕度為40%～60%、12 h光照明暗交替。85只實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,隨機(jī)選取15只禁食12 h,測(cè)空腹血糖,作為該批次動(dòng)物基礎(chǔ)血糖值。之后對(duì)大鼠進(jìn)行稱重,按體重?zé)o顯著性差異進(jìn)行分組,分空白組(15只)、模型組(70 只)。空白組喂飼正常飼料,模型組喂飼高脂高糖飼料,持續(xù)4周。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)腹腔注射低劑量鏈脲佐菌素(STZ)溶液建立2型糖尿病模型。稱取200 mg STZ在冰浴中溶于10 mL pH4.4的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖溶液中,緩沖液濃度為0.1 mol/L,配制濃度為20 mg/mL的STZ溶液。根據(jù)大鼠體重,按30 mg/kg 的劑量腹腔注射STZ溶液。正常組大鼠根據(jù)體重給予同等體積比例的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖溶液。注射STZ溶液72 h后對(duì)模型組大鼠進(jìn)行空腹血糖(FBG)測(cè)定,大鼠空腹血糖值在16.7 mmol/L

1.2.2 動(dòng)物分組及降血糖實(shí)驗(yàn)

1.2.2.1 動(dòng)物分組 將60只造模成功大鼠按空腹血糖水平無(wú)顯著性差異分為6組,即模型對(duì)照組(DC)、D-松醇劑量組(DP)、D-松醇復(fù)配MnSO4低劑量組(LPM)、D-松醇復(fù)配MnSO4中劑量組(MPM)、D-松醇復(fù)配MnSO4高劑量組(HPM)、陽(yáng)性對(duì)照組(PC),每組10只。再選取同一批次的正常大鼠10只作為空白對(duì)照組(NC),開始進(jìn)入實(shí)驗(yàn)階段。期間保證各組大鼠自由飲水、攝食,每天觀察大鼠精神狀況、活動(dòng)、飲食、飲水、體毛色澤等情況。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案如表1所示。

表1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案Table 1 Experimental design scheme

1.2.2.2 受試樣品對(duì)T2DM大鼠體重的影響 灌胃干預(yù)期為5周,期間每周固定時(shí)間對(duì)各組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行體重的測(cè)定。

1.2.2.3 受試樣品對(duì)T2DM大鼠空腹血糖(FBG)的影響 灌胃干預(yù)期為5周,期間每周固定時(shí)間對(duì)各組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行空腹血糖(FBG)的測(cè)定。大鼠禁食不禁水12 h后尾靜脈取血,用血糖儀測(cè)定并記錄空腹血糖值,實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束后比較各組大鼠血糖值及血糖下降率。

血糖下降率(%)=(實(shí)驗(yàn)前血糖值-實(shí)驗(yàn)后血糖值)/實(shí)驗(yàn)前血糖值×100

1.2.2.4 受試樣品對(duì)T2DM大鼠口服葡萄糖耐量(OGTT)的影響 灌胃干預(yù)4周后,對(duì)各組大鼠進(jìn)行葡萄糖耐量(OGTT)測(cè)定。禁食不禁水12 h 后,劑量組大鼠給予不同濃度的受試樣品,模型對(duì)照組大鼠給予同體積蒸餾水。20 min后經(jīng)口灌胃葡萄糖溶液2.0 g/kg·d,測(cè)定此時(shí)大鼠的血糖值(即給予葡萄糖0 h時(shí)的血糖值),之后分別測(cè)定大鼠0.5、1.0和2.0 h時(shí)的血糖值。分析比較各組大鼠在給予葡萄糖后0.5、1.0、2.0 h的血糖值并繪制血糖變化曲線、根據(jù)公式[16]計(jì)算血糖變化曲線下面積(AUG)。

AUG(mmol/L)=[(0 h血糖+0.5 h血糖)×0.5]/2+[(1 h血糖+0.5 h血糖)×0.5]/2+[(1 h血糖+0.5 h血糖)×0.5]/2

式(1)

表2 全定量PCR引物設(shè)計(jì)序列Table 2 Real-time PCR primer design sequence

1.2.2.5 受試樣品對(duì)T2DM大鼠胰島素耐量(ITT)的影響 在口服糖耐量實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)束72 h后,對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行胰島素耐量的測(cè)定。禁食不禁水12 h后,劑量組給予不同濃度的受試樣品,模型對(duì)照組給予同體積蒸餾水。20 min后皮下注射0.15 U/kg胰島素,測(cè)定此時(shí)大鼠的血糖值(即注射胰島素 0 h時(shí)的血糖值),而后繼續(xù)測(cè)定注射胰島素后0.5、1.0和2.0 h的血糖值。觀察各實(shí)驗(yàn)組大鼠在注射胰島素后各時(shí)間點(diǎn)的血糖值并繪制血糖變化曲線、計(jì)算血糖變化曲線下面積(公式同式1)。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)大鼠生理指標(biāo)檢測(cè)方法

1.2.3.1 空腹血清胰島素(FINS)水平的測(cè)定 本實(shí)驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)法測(cè)定大鼠FINS的含量。試劑盒操作方法參照南京建成大鼠胰島素酶聯(lián)免疫試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3.2 胰島素敏感性指數(shù)(ISI)和胰島β細(xì)胞功能指數(shù)(HOMA-β)測(cè)定 通過(guò)檢測(cè)得知大鼠FINS后配合FBG值計(jì)算胰島素敏感指數(shù)以評(píng)價(jià)大鼠組織對(duì)胰島素的敏感程度，計(jì)算胰島β細(xì)胞功能指數(shù)(HOMA-β)以評(píng)價(jià)受試大鼠胰島細(xì)胞分泌能力。

ISI計(jì)算公式為ISI=Ln1/INS×BG

HOMA-β計(jì)算公式為HOMA-β=20×FINS/(FBG-3.5)

1.2.3.3 糖化血清蛋白(GSP)含量的測(cè)定 糖化血清蛋白(GSP)含量測(cè)定又稱糖胺含量測(cè)定,血漿中的葡萄糖與一些蛋白分子氮端非酶促結(jié)合形成糖胺物質(zhì),糖胺的形成與血糖濃度呈正相關(guān)。試劑盒操作方法按照南京建成糖化血清蛋白試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.2.4 實(shí)時(shí)熒光全定量分析(RT-PCR)實(shí)驗(yàn) 將大鼠肝臟在液氮中研磨至粉末,后采用Trizol法[16]提取肝臟RNA,反轉(zhuǎn)錄得到cDNA,再利用Real-time PCR 法[16]以GADPH為看家基因,檢測(cè)IRS-1、IRS-2、AMPKα-1、AMPKα-2、PGC-1、PEPCK、G6Pase、GLUT4基因mRNA表達(dá)水平。

1.3 數(shù)據(jù)處理

本實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均采用數(shù)理統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以“均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差”(Mean±SD)表示,采用Duncans(Duncans Multiple Range Tests)進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。組間分析采用t檢驗(yàn),p<0.05表示兩組之間具有顯著性差異,p<0.01表示兩組之間具有極顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物外貌形態(tài)變化

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的外貌、體態(tài)進(jìn)行觀察記錄。N組的健康大鼠,體型勻稱、毛發(fā)順暢且有光澤,運(yùn)動(dòng)能力強(qiáng)、飲食飲水量正常。糖尿病大鼠體型明顯消瘦、毛發(fā)蓬亂且無(wú)光澤,運(yùn)動(dòng)能力差,并且出現(xiàn)飲食飲水量增加、排尿量增大的現(xiàn)象。

2.2 受試樣品對(duì)T2DM大鼠體重變化的影響

糖尿病患者最直觀的病癥是患者的體重明顯降低。給予受試樣品期間,每周對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠的體重進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如表3。

由表3可知,與健康大鼠相比,患病大鼠的體重極顯著性的降低,因?yàn)榛疾〈笫笥捎跈C(jī)體產(chǎn)生胰島素抵抗,機(jī)體不能充分利用葡萄糖,使脂肪和蛋白質(zhì)分解加速來(lái)補(bǔ)充能量和熱量,導(dǎo)致機(jī)體體重減輕。給予受試樣品的大鼠在經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的干預(yù)之后體重有增長(zhǎng)的趨勢(shì)。DC組與NC組相比,大鼠體重具有極顯著性的降低(p<0.01);DP組、LPM組和MPM組的大鼠體重與DC組相比,第五周有顯著性升高趨勢(shì)(p<0.05);HPM組和PC組的大鼠體重與DC組相比,從第三周開始出現(xiàn)顯著性升高趨勢(shì)(p<0.05),在第五周出現(xiàn)極顯著性升高趨勢(shì)(p<0.01)。

表3 各組大鼠的體重變化(Mean±SD,n=10)Table 3 Body weight change in experimental rats(Mean±SD,n=10)

2.3 受試樣品對(duì)T2DM大鼠FBG變化的影響

糖尿病患者最直觀的病癥是患者的空腹血糖值明顯升高且長(zhǎng)期維持在一個(gè)相對(duì)較高的水平,給予受試樣品期間,每周對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠的空腹血糖值進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如表4所示。

表4 各組大鼠空腹血糖值的變化(Mean±SD,n=10)Table 4 FBG change in experimental rats(Mean±SD,n=10)

由表4可知,造模成功后,DC組大鼠FBG值與NC組相比極顯著性升高(p<0.01);與DC組相比,給予受試樣品5周后,DP組、LPM組和MPM組大鼠FBG值顯著下降(p<0.05),下降率分別為7.44%、9.47%和11.24%,給予受試樣品3周后,HPM組和PC組大鼠FBG值顯著下降(p<0.05),且在第五周極顯著下降(p<0.01),下降率分別為18.73%和22.54%。說(shuō)明D-松醇復(fù)配Mn2+能更好的調(diào)控2型糖尿病大鼠空腹血糖水平,達(dá)到降血糖作用。

2.4 受試樣品對(duì)T2DM大鼠OGTT變化的影響

口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)是一種檢測(cè)機(jī)體對(duì)葡萄糖耐受能力的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),是一個(gè)非常精細(xì)的變化過(guò)程。對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行口服糖耐量測(cè)試,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1(A、B)所示。

圖1 受試樣品對(duì)T2DM大鼠OGTT的影響(Mean±SD,n=10)Fig.1 Effect of fermented beverage on OGTT in T2DM rats(Mean±SD,n=10)

由圖1A可知,NC組大鼠在給予葡萄糖溶液后血糖值于0.5 h達(dá)到頂峰,在2.0 h時(shí)回落至初始值附近;DC組大鼠在給予葡萄糖溶液后血糖值于0.5 h達(dá)到頂峰,在2.0 h時(shí)回落至初始值附近,但仍然維持一個(gè)較高的血糖水平;各劑量組大鼠血糖值有明顯回落至初始值的趨勢(shì),且HPM組和PC組大鼠血糖值有所降低。經(jīng)過(guò)AUG可得圖1B結(jié)果,DC組大鼠血糖曲線下面積極顯著大于NC組(p<0.01);各劑量組大鼠血糖變化曲線下面積較DC組極顯著性減小(p<0.01),且MPM組和HPM組較DP組顯著性減小(p<0.05)。

2.5 受試樣品對(duì)T2DM大鼠ITT變化的影響

胰島素耐量實(shí)驗(yàn)考察機(jī)體對(duì)胰島素的敏感程度,對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行胰島素耐量測(cè)試,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2(A、B)所示。

圖2 受試樣品對(duì)T2DM大鼠ITT的影響(Mean±SD,n=10)Fig.2 Effect of fermented beverage on ITT in T2DM rats(Mean±SD,n=10)

如圖2A所示,劑量組大鼠皮下注射胰島素后0.5 h時(shí),HPM 組血糖下降率有明顯上升趨勢(shì)。經(jīng)過(guò)計(jì)算血糖變化曲線下面積可得如圖2B,DC組大鼠曲線下面積極顯著性的大于正常對(duì)照組(p<0.01);MPM組血糖變化曲線下面積與 DC組比較,出現(xiàn)顯著性減小(p<0.05),且HPM組和PC組出現(xiàn)極顯著性減小(p<0.01)。

2.6 受試樣品對(duì)T2DM大鼠FINS、ISI和HOMA-β的影響

2型糖尿病患者血糖水平處在一個(gè)相對(duì)較高的狀態(tài),這一現(xiàn)象并非都是因?yàn)橐葝u細(xì)胞受損導(dǎo)致胰島素分泌不足引起的,大部分是由于機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性下降,因而導(dǎo)致胰島素利用率下降,出現(xiàn)胰島素抵抗現(xiàn)象。因此,持續(xù)的高血糖水平會(huì)反饋調(diào)節(jié)胰島細(xì)胞不斷分泌胰島素,使患者的空腹血清胰島素含量較高,使機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性降低。

由表5可知,大鼠患糖尿病后FINS極顯著性升高(p<0.01),ISI和HOMA-β極顯著性降低(p<0.01),各劑量組FINS與DC組相比具有極顯著性差異(p<0.01),HPM組FINS 極顯著性低于DP組(p<0.01)。MPM組和HPM組ISI與DC組相比均有顯著性升高(p<0.05)。HOMA-β呈升高趨勢(shì),有效減少肝糖輸出,抑制胰島素抵抗,且HPM組與DC組相比顯著性升高(p<0.05)。

表5 各受試樣品對(duì)T2DM大鼠FINS、ISI和HOMA-β的影響(Mean±SD,n=10)Table 5 Effects of tested samples on FINS、ISI and HOMA-β of experimental rats(Mean±SD,n=10)

2.7 受試樣品對(duì)T2DM大鼠GSP的影響

GSP是一種由血漿中的葡萄糖與一些蛋白分子氮端非酶促結(jié)合形成的糖胺物質(zhì)。由于這種糖胺結(jié)構(gòu)有20 d左右半衰期,所以GSP水平可以評(píng)價(jià)患者在一段時(shí)間內(nèi)的平均血糖水平[17]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示。

圖3 受試樣品各組大鼠GSP含量的影響(Mean±SD,n=10)Fig.3 Effect of fermented beverage on GSP in T2DM rats(Mean±SD,n=10)

由圖3可知,DC組大鼠GSP含量與NC組相比極顯著性升高(p<0.01),受試樣品干預(yù)5周后,各劑量組大鼠GSP含量相對(duì)DC組極顯著性下降(p<0.01),HPM組大鼠GSP含量相較于DP組極顯著性降低(p<0.01)。

2.8 受試樣品對(duì)T2DM大鼠相關(guān)基因表達(dá)的影響

由圖4可知,與模型組相比,各劑量組ISI-1、ISI-2和AMPKα-2基因mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)(p<0.05),且高劑量組與D-松醇組相比極顯著性上調(diào)(p<0.01)。高劑量復(fù)配組AMPKα-1和GLUT4基因mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)(p<0.05),PGC-1α、PEPCK和G6Pase基因mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(p<0.05)。IRS-1和IRS-2是胰島素受體信號(hào)耦聯(lián)的重要轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白,當(dāng)胰島素與受體結(jié)合后,可激活I(lǐng)RS分子,而IRS表達(dá)水平的高低是胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)正常與否的基礎(chǔ),當(dāng)IRS的濃度下降到一定程度,胰島素信號(hào)的胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)就會(huì)受到阻滯[18-19]。AMPK對(duì)糖代謝具有廣泛的影響,在促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn),加強(qiáng)糖酵解以及抑制糖異生[20-21]等生化反應(yīng)中均發(fā)揮一定功能。促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)主要由GLUT4完成,AMPK可誘導(dǎo)GLUT4轉(zhuǎn)位,還可激活相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子,在基因水平增加GLUT4的表達(dá),最終達(dá)到促進(jìn)外周組織攝取葡萄糖的目的[22]。PGC-1α水平增加激活糖異生關(guān)鍵酶造成肝糖輸出的增加,維持空腹血糖穩(wěn)定,進(jìn)而阻止機(jī)體產(chǎn)生胰島素抵抗。G6Pase是催化6-磷酸葡萄糖水解為葡萄糖的關(guān)鍵酶,該反應(yīng)是糖原分解和糖異生的最后一步反應(yīng),它的過(guò)度表達(dá)與激活將導(dǎo)致機(jī)體血糖升高。而PEPCK作為催化糖異生反應(yīng)第一步的關(guān)鍵酶,其表達(dá)及活力變化對(duì)糖異生起到重要的調(diào)節(jié)作用[23-24]。

圖4 受試樣品對(duì)T2DM大鼠AMPK相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平的影響(Mean±SD,n=10)Fig.4 Effects of test samples on the expression level of AMPK related gene mRNA in T2DM rats(Mean±SD,n=10)

3 結(jié)論

D-松醇與半乳糖胺在Mn2+的螯合作用下以1∶1的摩爾分子量比例形成胰島素第二信使。與模型對(duì)照組相比,各劑量組均可顯著性降低T2DM大鼠空腹血糖值(p<0.05),而高劑量復(fù)配組血糖值極顯著降低(p<0.01)。結(jié)果表明D-松醇復(fù)配Mn2+對(duì)T2DM大鼠空腹血糖水平具有一定的調(diào)控能力,起到降低血糖的效果。通過(guò)OGTT實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)受試動(dòng)物急性降糖能力,結(jié)果表明,復(fù)配組優(yōu)于單一D-松醇組改善T2DM大鼠機(jī)體對(duì)葡萄糖的耐受能力,以及改善其對(duì)胰島素的敏感程度,進(jìn)而起到的胰島素促敏劑作用[25]。此外,與D-松醇組相比,高劑量復(fù)配組的FINS和GSP極顯著降低(p<0.01),表明D-松醇復(fù)配Mn2+比單一D-松醇更好的緩解了大鼠外周組織的胰島素抵抗,增加了受體對(duì)胰島素的結(jié)合能力[26]。與模型對(duì)照組相比,ISI-1、ISI-2和AMPKα-2基因mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)(p<0.05),且高劑量組與D-松醇組相比極顯著性上調(diào)(p<0.01)。高劑量復(fù)配組AMPKα-1和GLUT4基因mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)(p<0.05),PGC-1α、PEPCK和G6Pase基因mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(p<0.05)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為D-松醇復(fù)配Mn2+的降血糖作用提供科學(xué)依據(jù),但本次研究只局限于生理表層和基因表達(dá)方面,將來(lái)更需要通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)等實(shí)驗(yàn)進(jìn)行對(duì)降血糖機(jī)制進(jìn)一步評(píng)價(jià)分析,為D-松醇在食品工業(yè)中的研究開發(fā)提供進(jìn)一步的理論幫助。