血清巨噬細胞遷移抑制因子和白細胞介素10水平與重癥膿毒癥患者生存時間的相關性

陳 琛,蘇 華,許玉環,馬琴琴

(河北北方學院附屬第一醫院:1.重癥醫學科;2.檢驗科，河北張家口 075000)

膿毒癥是指由感染引起的全身炎癥反應綜合征，是住院患者死亡的主要原因之一[1]。早期全身炎癥反應綜合征(SIRS)的特征在于促炎介質的表達，其后是發展代償性抗炎癥反應綜合征(CARS)[2-3]。研究表明，促炎介質的表達可能引發一系列早期反應從而導致早期死亡[4-5]。巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)是全身性炎性反應的一種重要調節因素，其過表達可能導致嚴重膿毒癥的早期死亡[6-8]。此外，小鼠模型實驗顯示白細胞介素-10(IL-10)在感染后12 h內達到峰值，表明早期IL-10水平升高也可能是造成機體炎性反應不足和控制感染失敗的原因[9]。本研究通過比較不同生存時間的兩組嚴重膿毒癥患者的血清MIF和IL-10水平，探討血清MIF和IL-10水平與嚴重膿毒癥患者生存時間的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 連續收集2015年7月至2017年7月于本院住院接受治療的135例重癥膿毒癥患者入組。入選標準：(1)根據膿毒癥國際診斷標準[10]，被確診為膿毒癥患者；(2)年齡大于18歲，精神狀況良好；(3)患者生存時間小于72 h或大于30 d。排除標準：(1)不愿參與本研究的患者；(2)不能進行正常交流的患者。本研究已獲得所有研究對象的知情同意，并獲得醫院倫理委員會批準。根據患者生存時間將其分為A、B兩組，A組生存時間小于72 h，B組生存時間大于30 d；其中A組15例，男8例，女7例，B組120例，男65例，女55例。記錄患者的性別、年齡和心血管功能障礙(收縮壓<90 mm Hg，平均動脈壓<65 mm Hg，或收縮壓降低> 40 mm Hg)、呼吸系統障礙(雙側肺部浸潤，動脈氧分壓與吸入氧分量之比<300 mm Hg)、腎功能損害[血清肌酐水平>2 mg/dL或尿量持續2 h<0.5 mL/(kg·h)]、肝功能損害(總血清膽紅素水平>2 mg/dL)、乳酸代謝障礙(血清乳酸水平>2 mmol/L)和血液功能障礙(血小板計數<100×109/L)等信息。

1.2方法 收集所有患者清晨空腹血樣，將血液收集在無菌試管中，離心并將血清分裝到Eppendorf管中并在-70 ℃儲存直至分析。血清MIF和IL-10水平采用酶聯免疫吸附(ELISA)試劑盒(MIF：RayBiotech，Norcross，GA，USA;IL-10：Biolegend，San Diego，CA，USA)測定。

2 結 果

2.1兩組一般資料對比 本研究兩組的一般資料見表1。兩組間性別、年齡、呼吸功能障礙和腎、肝功能損害情況差異無統計學意義(P>0.05)；而在心血管功能障礙、乳酸代謝障礙和血液功能障礙3方面差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 兩組一般資料對比

2.22組血清MIF和IL-10水平比較 A組血清MIF和IL-10水平分別為(7 633±658)和(883±312)pg/mL，B組血清MIF和IL-10水平分別為(2 598±764)和(583±276)pg/mL；A組的血清MIF和IL-10水平均顯著高于B組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組巨噬細胞遷移抑制因子和IL-10

2.3單因素分析 單因素分析顯示心血管功能、乳酸代謝和血液功能障礙，以及MIF和IL-10水平升高均為膿毒癥死亡風險因素(P<0.05)。見表3。

表3 膿毒癥死亡風險的單因素分析

2.4多因素分析 將單因素分析中顯著的變量納入多因素分析，結果顯示心血管功能、乳酸代謝和血液功能障礙，以及MIF和IL-10水平升高均為膿毒癥死亡風險因素(P<0.05)。

表4 膿毒癥死亡風險的多因素分析

3 討 論

一般來講，膿毒癥的兩階段模型由最初的促炎階段和隨后的抗炎階段組成。而本研究表明，在患有嚴重膿毒癥的患者中同時發生促炎細胞因子和抗炎細胞因子如MIF和IL-10水平升高的現象，這與TAMAYO等[11]和CHUANG等[12]的研究結果類似，表明嚴重膿毒癥的早期階段同時存在促炎和抗炎反應。早期研究報道IL-10與嚴重膿毒癥患者48、72 h、15、28 d病死率有顯著相關性[13]。而在最近發表的使用細胞因子多重分析的研究中，IL-10并不是48 h死亡率的預測因子，但它是28 d死亡率的顯著預測因子[14]。然而，本研究表明IL-10水平升高與72 h死亡風險顯著相關，與上述結果不同，推測可能有以下原因：(1)患者的來源不同，同時各項研究的方法以及質控標準不同；(2)采集血樣的時間不同，可能導致血清因子測定的水平差異；(3)測量細胞因子水平的方法不同。這些都可能導致不同研究間的差異性。

高MIF水平和腎上腺不良反應與嚴重膿毒癥患者的早期死亡有關[15-16]。本結果表明，MIF水平升高是嚴重膿毒癥患者死亡風險的獨立風險因素之一。結合以前的研究結果，表明膿毒癥兩階段模型中初始均會發生促炎階段。此外，在膿毒癥大鼠模型中腹膜內注射重組MIF會誘導彌散性血管內凝血(DIC)，而在DIC膿毒癥患者中也發現持續的MIF水平升高及可溶性纖維蛋白和低蛋白C活性增強[17]。因此，推測MIF和蛋白C活性水平之間存在顯著負相關，而該相關性可能參與膿毒癥患者快速死亡結局，但這仍需要在未來的工作中進一步探索。

IL-10是由多種類型細胞分泌的有效內源性免疫抑制劑細胞因子，包括T輔助(Th)2細胞、單核細胞、巨噬細胞、樹突細胞和上皮細胞。它抑制Th1促炎性細胞因子，包括干擾素γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、IL-1b、IL-8、IL-12和IL-21。MIF是全身炎性反應的關鍵介質，由垂體前葉和免疫細胞分泌，主要是T細胞。它刺激促炎細胞因子包括TNF-α、IFN-g、IL-1b、IL-6、IL-8和IL-22的表達和分泌。本研究結果證實，由于嚴重膿毒癥而在72 h內死亡的患者具有顯著的MIF和IL-10水平升高現象。下一步研究將聚焦于Th1細胞分泌的促炎性細胞因子是否在嚴重膿毒癥患者的高MIF和IL-10水平的雙重作用下產生。此外，筆者也將探討Th1/Th2細胞在嚴重膿毒癥患者中的差異表達譜。

4 結 論

本研究表明MIF和IL-10水平升高是重癥膿毒癥患者快速死亡的風險因素。而MIF和IL-10的自發表達是否影響嚴重膿毒癥患者中Th1/Th2相關細胞因子的表達，從而形成不同結局，值得進一步研究。