穿透素-3在血流感染診斷中的價值

熊 沖，尹紀來

(1.海南省萬寧市人民醫院檢驗科,海南萬寧 571500；2.海南醫學院第一附屬醫院檢驗科,海南?？?570100)

當病原菌入侵機體血液系統，一部分病原菌通過在血液中生長、繁殖、崩解后產生大量毒素，從而導致內毒素血癥；有一部分病原菌通過血液循環到達合適的組織和(或)器官進行生長繁殖，從而導致感染的發生。這種由各種病原菌和(或)毒素入侵機體血液循環系統后導致的全身炎性反應和感染，甚至危及生命的感染性疾病，稱之為血流感染(BSI)。BSI起病較隱匿，臨床癥狀缺乏特異性表現，病情發展迅速，嚴重者給患者帶來生命威脅，因此血流感染的早期診斷具有十分重要的意義[1-2]。目前，臨床上診斷血流感染的“金標準”是血培養，但存在培養時間長、檢出率較低等缺點。故尋求靈敏度高、診斷迅速的血流感染診斷標志物已成為臨床的迫切需要。

穿透素-3(PTX-3)是由巨噬細胞、中性粒細胞和髓樣樹突狀細胞等組織細胞分泌合成的正五聚蛋白，屬于長穿透素家族中的一員，是人體先天性免疫系統的重要組成，常參與機體早期的抗感染反應及異物清除。已有研究發現，血清PTX-3水平在感染、炎癥等情況下會顯著升高[3]，而國內外關于PTX-3與血流感染相關性的報道甚少。目前，國內外用于血流感染的早期診斷和評估的主要感染性指標為降鈣素原(PCT)和超敏C-反應蛋白(hs-CRP)[4]，故本研究通過檢測血流感染患者體內血清PTX-3、PCT和hs-CRP水平的變化，以期為血流感染的早期診斷和判斷病情嚴重程度提供一些參考依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年2月至2017年6月本院收治的96例體溫≥38.5 ℃且結合臨床表現高度懷疑BSI者作為研究對象。根據血培養陽性結果，將最終確診的42例成人血流感染患者作為實驗組，其中，男22例，女20例，年齡18～92歲，中位年齡62歲。隨機選取血培養陰性患者42例作為對照組，其中男23例，女19例，年齡20～89歲，中位年齡56歲。實驗組和對照組在年齡、性別、基礎疾病等基線資料方面差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

實驗組納入標準：(1)入院72 h內血培養陽性確診為血流感染；(2)年齡≥18歲；(3)患者及家屬知情并簽署了知情同意書。排除標準：(1)入院時間<24 h者；(2)年齡<18歲者；(3)有急性冠脈綜合征、心力衰竭、心房顫動、高肌鈣蛋白血癥等心臟疾病者；(4)急、慢性傳染性疾病者；(5)有酒精性肝硬化、腎臟衰竭、惡性腫瘤、自身免疫病和血栓性疾病者；(6)血培養結果為凝固酶陰性葡萄球菌或非常見環境細菌者；(7)近期有服用影響PTX-3、PCT和hs-CRP檢測結果的藥物者。

1.2研究方法 血培養使用合肥恒星科技開發有限公司BC-60全自動血液細菌培養儀進行，若陽性報警，轉種培養皿，獲得純細菌菌落者入選實驗組進行研究，再采用法國梅里埃VITEK-2 COMPACT系統進行微生物鑒定，統計實驗組患者血培養病原菌結果。所有研究對象于入院后第1天、第4天和第7天(急性期)和入院第14天(恢復期)空腹采集靜脈血3 mL置真空采血管中，分離上清后置于-20 ℃冰箱凍存備用。hs-CRP檢測使用日本Olympus公司AU 5400全自動生化分析儀及配套試劑，PCT檢測使用德國羅氏公司Cobasd E60電化學發光分析儀及其配套試劑。PTX-3檢測使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA法)，試劑盒購自武漢優爾生科技公司。

PTX-3檢測操作步驟：先將抗PTX-3抗體包被在酶標板上，再加入待測血清與包被抗體發生結合反應，洗去游離成分后依次加入生物素化PTX-3抗體和HRP(辣根過氧化物酶)標記親和素，待形成免疫復合物后，洗去反應孔中的游離成分，加TMB顯色底物和終止液，酶標儀450 nm測OD值，通過繪制標準曲線得出PTX-3水平。

2 結 果

2.1實驗組患者血培養病原菌統計結果 42例血流感染患者培養出病原菌46株，其中革蘭陰性桿菌29株(63.04%)，以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌為主；革蘭陽性球菌17株(36.96%)，以金黃色葡萄球菌、糞腸球菌和屎腸球菌為主；革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2兩組患者血清PTX-3、PCT和hs-CRP水平的比較 研究結果顯示，在入院第1、4、7天，實驗組PTX-3、PCT和hs-CRP水平較對照組明顯增高，差異有統計學意義(P<0.05)，而入院第14天實驗組PTX-3、PCT和hs-CRP水平與對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。隨著入院時間的延長，實驗組患者PTX-3、PCT和hs-CRP水平呈逐漸降低，見圖1。

圖1 實驗組患者血清PTX-3、PCT和hs-CRP水平時間趨勢圖

表1 實驗組患者血培養病原菌統計結果

表2 兩組患者血清PTX-3水平的比較

2.2入院第1天和第4天PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染的診斷價值 為判斷通過PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染的早期診斷價值，繪制ROC曲線分析入院第1天和第4天PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染的早期診斷價值，在入院第1天，PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染診斷AUC值分別為0.928、0.876、0.828，靈敏度分別為88.10%、83.30%、76.20%，特異度分別為97.60%、90.05%、85.70%，cutoff值為12.58 ng/L、0.79 ng/mL、39.45 mg/L。在入院第4天，PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染診斷AUC值分別為0.920、0.909、0.796，靈敏度分別為90.5%、88.1%、85.0%，特異度分別為92.90%、85.00%、78.60%，cutoff值為6.65 ng/L、0.65 ng/mL、29.15 mg/L，見圖2。

圖2 入院第1天和第4天PTX-3、PCT和hs-CRP

3 討 論

隨著臨床各種免疫抑制劑、糖皮質激素、廣譜抗菌藥物的廣泛使用，心臟支架、靜脈置管、介入治療等侵入性治療技術的臨床開展，以及腫瘤患者中放化療方法的普遍應用等，血流感染發生率呈逐漸升高趨勢，因此，尋找積極有效的血流感染早期診斷、病情輕重評估及預后指標具有積極的臨床意義[5-6]。

本研究42例血流感染患者培養出病原菌46株，其中革蘭陰性桿菌29株(63.04%)，以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌為主；革蘭陽性球菌17株(36.96%)，以金黃色葡萄球菌、糞腸球菌和屎腸球菌為主；革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌比較，差異有統計學意義(P<0.05)。本研究血流感染患者病原菌構成與翟如波等[7]的報道相一致，表明在血流感染的致病菌中主要是革蘭陰性桿菌，其可通過分泌產生內毒素，從而干擾機體的各種代謝活動，導致高熱不退等臨床癥狀的發生。

已有大量研究表明，PCT和hs-CRP在血流感染患者體內水平升高，與疾病嚴重程度呈正相關，可用于血流感染的早期診斷和病情評估[8-9]。PTX-3是一種可參與急性炎性反應和免疫應答的可溶性模式識別受體，與PCT、CRP等同屬于急性時相蛋白。有不少文獻報道，PTX-3是機體受細菌、病原菌、損傷等刺激，由中性粒細胞、內皮細胞、巨噬細胞等細胞合成分泌的正五聚蛋白，是內分泌系統疾病、心血管系統疾病、惡性腫瘤、炎性反應和感染性疾病的重要生物標志物，對疾病的病情判斷和預后評估具有極其重要的作用[10-12]。YAMASAKI等[13]通過對上千名健康志愿者進行PTX-3檢測，發現健康人血清PTX-3水平<2 ng/L。HAMED等[14]發現在膿毒癥休克患者血清PTX-3水平與病情嚴重程度呈正相關。

本文檢測了本院42例血流感染患者體內PTX-3、PCT和hs-CRP水平，結果發現在入院第1、4、7天，實驗組PTX-3、PCT和hs-CRP水平較對照組明顯增高，而入院第14天實驗組PTX-3水平與對照組相比較，差異無統計學意義(P>0.05)。隨著入院時間的延長，實驗組患者PTX-3、PCT和hs-CRP水平呈逐漸降低。在入院第1天，PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染診斷AUC值分別為0.928、0.876、0.828，靈敏度分別為88.1%、83.3%、76.2%，特異度分別為97.6%、90.05%、85.7%，cutoff值為12.58 ng/L、0.79 ng/mL、39.45 mg/L。在入院第4天，PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染診斷AUC值分別為0.920、0.909、0.796，靈敏度分別為90.5%、88.1%、85.0%，特異度分別為92.9%、85.0%、78.6，cutoff值為6.65 ng/L、0.65 ng/mL、29.15 mg/L。這表明PTX-3、PCT和hs-CRP對血流感染的早期診斷具有較高價值，與血流感染的預后關系密切。這與國外HUTTUNEN等[15]的報道結果一致，血流感染患者體內PTX-3水平與病情嚴重度呈正比，隨著病情的好轉，血清PTX-3水平隨之降低。

4 結 論

PTX-3的檢測在血流感染的診斷中具有十分重要的價值，血清PTX-3水平與血流感染的嚴重程度呈正相關，可用于血流感染的早期診斷和病情評估及預后。臨床上可聯合檢測血清PTX-3和血培養，動態監測其水平的變化，有利于血流感染診斷準確性的提高，對指導臨床工作具有一定的應用價值。