2013~2018年天津市津南區(qū)0~14歲兒童H3N2亞型流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)分析

鄭梅 李勝?gòu)?qiáng) 趙穎

摘要：目的? 分析天津市津南區(qū)2013～2018年H3N2亞型流感病毒流行特征，為流感防控策略的制定提供依據(jù)。方法? 采集天津市津南區(qū)唯一一家流感監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院（咸水沽醫(yī)院）的流感樣病例（ILI）咽拭子標(biāo)本，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，對(duì)H3N2亞型流感病毒檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果? 天津市津南區(qū)2013～2018年共檢測(cè)2972例ILI病例標(biāo)本，其中H3N2亞型流感病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性245例，總陽(yáng)性率是9.59%;5個(gè)監(jiān)測(cè)年度檢測(cè)的ILI樣本H3N2亞型流感核酸陽(yáng)性率分別是2.21%、17.80%、4.60%、16.41%和6.86%，各年度間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;不同性別人群的H3N2亞型流感陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;各年齡組的H3N2亞型流感陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但3～8歲兒童ILI監(jiān)測(cè)H3N2流感陽(yáng)性病例數(shù)最多。結(jié)論? 天津市津南區(qū)H3N2亞型流感病毒呈年度周期性流行，多發(fā)于冬春季，是近些年流感流行的主要型別，學(xué)齡兒童是H3N2亞型流感防控的重點(diǎn)人群，為更好防控流感，及時(shí)掌握流行趨勢(shì)，仍需加強(qiáng)監(jiān)測(cè)。

關(guān)鍵詞：流感病毒;H3N2亞型;流行特征

中圖分類(lèi)號(hào)：R511.7? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.11.043

文章編號(hào)：1006-1959（2019）11-0147-03

Abstract：Objective? To analyze the epidemiological characteristics of H3N2 subtype influenza virus in Jinnan District of Tianjin from 2013 to 2018， and to provide evidence for the development of influenza prevention and control strategies. Methods? The swine swab specimens of influenza-like cases （ILI） were collected from the only influenza surveillance sentinel hospital in Tianjin Jinnan District. The real-time quantitative PCR was performed to analyze the positive samples of H3N2 subtype influenza virus.Results? In the Jinnan District of Tianjin， a total of 2972 ILI cases were detected from 2013 to 2018， among which 245 were positive for H3N2 subtype influenza virus， and the total positive rate was 9.59%. The positive rate of H3N2 subtype influenza nucleic acid in the five monitoring years were 2.21%， 17.80%， 4.60%， 16.41%， and 6.86%， the differences were statistically significant （P<0.05）. There was no significant difference in the positive rate of H3N2 subtypes among different gender groups （P>0.05）. There was no significant difference in the positive rate of H3N2 subtype influenza in all age groups （P>0.05）， but the number of H3N2 influenza positive cases was the highest in children with 3 to 8 years old.Conclusion? The H3N2 subtype influenza virus in Jinnan District of Tianjin is an annual cyclical epidemic， which occurs mostly in winter and spring. It is the main type of influenza epidemic in recent years. School-age children are the key population of H3N2 subtype influenza prevention and control， for better prevention and control. Influenza， timely grasp of fashion trends， still needs to strengthen monitoring.

Key words：Influenza virus;H3N2 subtype;Epidemic characteristics

流行性感冒病毒由于其超強(qiáng)的傳染性和變異性成為第一個(gè)實(shí)行全球監(jiān)測(cè)的疾病。1968年，H3N2型流感病毒引發(fā)了全球的大流行，此后該病毒一直在人群中呈季節(jié)性的流行并不斷發(fā)生著變異，自1999～2016年，世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）公布的流感疫苗組分中H3N2亞型毒株更新了10次[1]，正是這種不斷突變、尋求更好途徑攻擊人類(lèi)的特點(diǎn)導(dǎo)致疫苗株與流行株不匹配，給防控策略的制定帶來(lái)了巨大的困擾。因此，分析H3N2病毒的流行特征，具有重要的意義。本研究通過(guò)對(duì)天津市津南區(qū)2013～2018年流感監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院的流感樣病例咽拭子標(biāo)本進(jìn)行流感病毒及其亞型監(jiān)測(cè)，分析H3N2亞型流感病毒的流行特點(diǎn)，為更好的防控流感病毒提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料? 根據(jù)《全國(guó)流感監(jiān)測(cè)方案（2010）》在津南區(qū)哨點(diǎn)醫(yī)院開(kāi)展流感樣病例（influenza-like illness，ILI）監(jiān)測(cè)。采集發(fā)熱（體溫≥38℃）3 d以?xún)?nèi)，且伴咳嗽或咽痛之一者的咽拭子。樣本為2013年4月1日～2018年3月31日采集的0～14歲兒童全部咽拭子，共計(jì)2972份。實(shí)驗(yàn)室操作按照《流感監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)操作規(guī)范》進(jìn)行，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法進(jìn)行流感病毒核酸檢測(cè)和亞型鑒定。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本的采集和運(yùn)送? 采集的鼻咽拭子放入含3～4 ml病毒采樣液中，并于2～8℃條件下48 h內(nèi)送至津南區(qū)流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室，收取標(biāo)本后置于-70℃以下保存。

1.2.2核酸提取? 使用病毒核酸提取試劑盒（RNeasy? ?Mini Kit），在QIAGEN全自動(dòng)核酸提取儀上嚴(yán)格按照儀器和試劑說(shuō)明書(shū)提取病毒RNA。

1.2.3核酸檢測(cè)提取的病毒RNA? 利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法在AB 7500FAST（ABI公司）儀器上進(jìn)行核酸檢測(cè)，其中擴(kuò)增程序的設(shè)定和結(jié)果判讀嚴(yán)格按照儀器和試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，且所有試劑均在有效期內(nèi)。

1.2.4核酸檢測(cè)? 嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)和擴(kuò)增曲線(xiàn)進(jìn)行正確判讀，檢測(cè)型別為H3N2亞型。

1.3統(tǒng)計(jì)分析? 以每年4月1日～次年3月31日為一個(gè)監(jiān)測(cè)年度進(jìn)行分析，使用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)整理與制圖，采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料以（%）表示，組間比較用？字2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 H3N2亞型流感病毒核酸檢測(cè)結(jié)果? 共采集ILI咽拭子標(biāo)本2972份，其中H3N2亞型流感陽(yáng)性標(biāo)本285份，總陽(yáng)性率9.59%;5個(gè)監(jiān)測(cè)年度檢測(cè)的ILI樣本H3N2亞型流感核酸陽(yáng)性率分別是2.21%、17.80%、4.60%、16.41%和6.86%，各年度間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（？字2=20.962，P<0.05）。

2.2 H3N2亞型流感性別分布? 5個(gè)監(jiān)測(cè)周期中，采集男童樣本數(shù)為1593例，其中陽(yáng)性病例數(shù)為141例，陽(yáng)性率為8.85%;采集女童樣本數(shù)為1379例，陽(yáng)性病例數(shù)為144例，陽(yáng)性率為10.44%;不同性別人群的H3N2亞型流感陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（？字2=0.131，P>0.05）。

2.3 H3N2亞型流感年齡分布? 本研究共分為5個(gè)年齡組，即0～2歲、3～5歲、6～8歲、9～11歲和12～14歲年齡組，各年齡組的H3N2亞型流感陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（？字2=2.759，P>0.05），見(jiàn)表1。

2.4 H3N2亞型流感時(shí)間分布? H3N2亞型流感流行期為冬春季節(jié)，其中各年的流行高峰不同。5個(gè)監(jiān)測(cè)年度出現(xiàn)兩個(gè)流行高峰，隔年出現(xiàn)，見(jiàn)圖1。

3討論

流感病毒屬于正黏病毒科，是有包膜的單股負(fù)鏈RNA病毒，流感病毒分甲、乙、丙3個(gè)型別。通過(guò)對(duì)病毒監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)感染人類(lèi)致病的有甲型H1N1和H3N2，乙型Victoria和Yamagata。流感暴發(fā)大流行都是抗原變異活躍的甲型流行株，乙型流感病毒會(huì)引起小范圍流行。世界各地氣候不同，流感流行株也不同，但每個(gè)地區(qū)根據(jù)季節(jié)、氣候和溫度等條件不同也都有一定的流行規(guī)律。

本研究顯示，天津市津南區(qū)5個(gè)監(jiān)測(cè)年度H3N2亞型流感出現(xiàn)兩個(gè)流行高峰，陽(yáng)性率最高峰為51.11%（46/90），出現(xiàn)在2014年12月;其次為2017年1月，陽(yáng)性率為40.79%（31/76）;隔年出現(xiàn)，這個(gè)特點(diǎn)與周邊地區(qū)相同[2]。檢出人群性別無(wú)差異，各年齡組陽(yáng)性率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但陽(yáng)性病例數(shù)量多集中在3～8歲兒童，這個(gè)年齡段的兒童處于幼兒園與小學(xué)階段，與人接觸更加頻繁，但抵抗力仍然較弱，容易感染多種呼吸道病毒或細(xì)菌，尤其小學(xué)生在流感流行季時(shí)高度集中，人與人之間接觸密切，且戶(hù)外活動(dòng)過(guò)少，加之自身的防控流感意識(shí)相對(duì)不足等原因，容易造成流感病毒的傳播流行，甚至局部暴發(fā)流行[3-5]。原因：①兒童免疫系統(tǒng)尚不完善，學(xué)校和幼兒園人群密集，易造成呼吸道病毒在兒童間的傳播;②兒童患病后就診的比例和及時(shí)性要高于其他人群[6，7]，因此兒童也被列為流感疫苗的優(yōu)先接種人群，監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，一般10月份H3N2流感就開(kāi)始流行，由于流感疫苗接種后2周才產(chǎn)生保護(hù)性抗體，因此建議于9月份接種流感疫苗。由于H3N2亞型流感病毒在人群中流行廣泛并發(fā)生了多位點(diǎn)變異[8]，近些年流感疫苗中H3N2亞型疫苗株與流行株抗原匹配度不高[9]，以致于流感疫苗對(duì)H3N2亞型流感病毒的防控效果不佳。

因此，關(guān)注H3N2感染人群的流行特點(diǎn)，有針對(duì)性的采取預(yù)防措施尤為重要。作為制定流感防治策略的重要依據(jù)，流感監(jiān)測(cè)仍需繼續(xù)加強(qiáng)，把握最佳采樣時(shí)機(jī)，選擇最具有代表性的監(jiān)測(cè)對(duì)象，提高監(jiān)測(cè)水平仍具有重要意義。

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收稿日期：2019-3-6;修回日期：2019-3-14

編輯/王海靜