EDTA抗凝法檢驗診斷與假性血小板減少癥患者的診斷價值

程金琳　劉祝波

【摘 要】目的：分析EDTA抗凝法檢測同假性血小板減少癥診斷之間的關聯性。方法：以36例（2018年4月～9月）血常規檢查者為例，分別收集枸緣酸鈉抗凝血、EDTA抗凝血，分析血小板計數，并制作血涂片，進行鏡檢，以手工方式檢測血小板計數情況，進行對照分析。結果：與手工法、枸緣酸鈉抗凝相比，EDTA抗凝法獲得的血小板計數明顯更少，而白細胞計數更多（P<0.05）。結論：EDTA抗凝檢測法可能引起受檢者假性血小板減少癥的發生，在此基礎上，會導致誤診、漏診等情況發生。

【關鍵詞】EDTA抗凝法;假性血小板減少癥;檢驗診斷

【中圖分類號】R72【文獻標識碼】A【文章編號】1672-3783（2019）12-03--01

前言：以EDTA作為抗凝劑實施全血細胞檢驗，一定程度上會誘發假性血小板計數減少情況，可能會使臨床檢查結果的準確性受到影響，從而降低整體診斷結果的準確率，為了避免、減少這種影響，在行DETA抗凝檢測時，應對相關輔助檢查措施積極使用，使結果診斷準確性得以保證[1]。本文選取了我院接收的血常規檢查者，實施EDTA 抗凝法、手工法、枸緣酸鈉法對血小板計數、白細胞計數進行檢測，探究對臨床診斷的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

研究時間：2018年4月～9月，所選對象：進行血常規檢查者，共36例，男女比例19：17，年齡18～75（平均46.58±9.56）歲。本次研究，是在征得患者知情同意后方開始實施，且將患有嚴重意識障礙、精神疾病，無法臨床檢查診斷配合者排除在外。

1.2 方法

1.2.1 檢驗儀器及相應試劑

檢測儀器：貝克曼DxH800血細胞分析儀（貝克曼庫爾特公司）。其他物品：溶血劑、瑞氏染液、全自動顯微鏡、1%濃度草酸銨稀釋液、蒸餾水、EDTA-K2抗凝管、血細胞計數板、緣酸鈉真空抗凝管、白細胞稀釋液等。

1.2.2 檢查方法

手工檢驗法：以《全國臨床檢驗操作規范》為標準實施檢查操作，首先，醫護人員要對患者進行手指末梢血采集（20μl），當做血液標本，然后融入草酸銨血小板（體積為0.38ml）中稀釋、搖勻，當完成徹底溶血過程后，充分震蕩，滴加血小板懸液（1滴），室溫放置15min，后用顯微鏡對其中的血小板計數進行檢測。白細胞計數測量方法與上述同。

儀器檢驗法：應用全血模式，EDTA-K2真空抗凝管、枸緣酸鈉真空抗凝管分別收集研究對象靜脈血，將其混勻，對其中的白細胞、血小板進行全自動細胞分析儀檢測，所有操作流程均嚴格按照操作規范實施;稀釋血液模式設置，對患者手指末梢血進行10ml采集，于標準量稀釋液中融入并混勻，室溫放置15min，統計白細胞、血小板計數。

血涂片染色：枸緣酸鈉抗凝血、EDTA-K2抗凝血各取1滴，制作血涂片，予以瑞氏染色，實施鏡檢，應用顯微鏡觀察，分析血小板形態，統計數量。

1.3 觀察指標

觀察所有檢查患者的假性血小板減少癥發生、不同檢驗方法致血小板減少情況，收集所有數據并整理，完成后詳細臨床記錄。

1.4 統計學方法

應用SPSS24.0軟件統計、整理數據，（）表示計量資料，t檢驗。當P<0.05時，數據間對比有差異性。

結果

2.1 假性血小板減少癥發生情況

7例因EDTA抗凝法引起假性血小板減少癥，發生率19.44%。

2.2 三種檢測法的檢測結果比較

與其他兩種方法比，EDTA抗凝法差異顯著（P<0.05），血小板計數更少、白細胞計數更多

討論

通常情況下，EDTA并不會影響人體血液中血小板形態、血小板分布，會在血細胞數量檢驗中被廣泛應用。本研究結果顯示，EDTA依賴性假性血小板減少癥受檢者占總受檢者的19.44%，說明部分受檢者體內的血小板分布情況，會受到EDTA一定影響，致血小板數量減少情況發生。臨床上對該情況的發生要相當重視，及時使用其他方法檢測血小板，使漏診、誤診率降低，檢查診斷準確性提高。臨床進行血細胞分析時，EDTA作為一種抗凝劑具有較多的使用優勢，但同時也會使血小板凝聚作用被削弱，減少血小板計數[2]。較之枸緣酸鈉抗凝法、手工檢測法，EDTA 抗凝法檢測結果存在顯著差異，白細胞計數多達（25.23±10.19）×109/L，而血小板計數低至（44.31±21.01）×109/L。此種現象發生原因諸多：其一，與EDTA-K2可作用于血液引發免疫介導、形成血小板抗體有關，可引發凝集;其二，EDTA-K2可作用于血小板，并發揮活化作用，改變血小板膜層表面抗原結構，血小板、血漿抗體結合，在多種作用下激活血小板纖維蛋白受體，引發血小板衛星現象。所以測量出的血小板計數便出現了偏低現象。若血小板體積增大，已逐漸同白細胞相近，檢測時便有可能被誤認成白細胞，進而產生血小板假性減少、白細胞假性增多現象。目前臨床上將手工計數法作為檢驗準確性評價金標準，主要應用于血小板計數異常的復檢工作中，但是存在著精密度差、準確性低的劣勢。為保證血小板檢驗準確性，對于依賴性假性血小板減少癥可疑的血液標本，染色涂片處理便顯得尤為關鍵，完成后再觀察其血小板分布情況，一旦有血小板大量聚集情況產生，要實施復檢處理。若用枸緣酸鈉抗凝劑對血小板計數復查，應在得出復查結果后，同手工檢測結果相比較，若差異性較大，還應深入臨床檢測。

綜上所述，EDTA 抗凝法、假性血小板減少癥關系密切，應用EDTA抗凝法行血常規檢測，具有一定的假性血小板減少發生幾率，檢測結果受其影響，進而提升誤診或漏診率，可同時給予相關輔助檢測法。

參考文獻：

李建.EDTA抗凝法檢驗診斷與假性血小板減少癥患者的診斷[J].中國民康醫學，2016，28（6）：59-60.

查有艷.EDTA依賴性假性血小板減少癥及檢測方法研究[J].中外女性健康研究，2017（4）：135-135.