人感染H7N9禽流感病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室生物安全管理方法初探

秦曙

【摘 要】H7N9是當(dāng)前較為常見的一種禽流感病毒，為進(jìn)一步對H7N9禽流感病毒進(jìn)行規(guī)范，強(qiáng)化生物安全管理，本文結(jié)合《病原微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理?xiàng)l例》進(jìn)行結(jié)合，展開了分析，目的在于更好的在今后的過程中避免內(nèi)部感染以及交叉感染情況的出現(xiàn)。本文結(jié)合當(dāng)前的實(shí)際情況、實(shí)驗(yàn)室的布局以及樣品處理的方法展開探究，探究內(nèi)容如下文所示，以提供參考。

【關(guān)鍵詞】H7N9禽流感病毒;核酸檢測;實(shí)驗(yàn)室生物安全管理方法;感染

【中圖分類號】R181.3【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-3783（2019）12-03--02

H7N9禽流感病毒是一種亞型甲型流感病毒，該病毒對人產(chǎn)生的作用十分明顯，感染的初期會引發(fā)人類急性呼吸道疾病的出現(xiàn)，待病情發(fā)展至后期會引發(fā)多種疾病，從而給人們帶來危險，并且降低生活的綜合質(zhì)量[1]。當(dāng)前H7N9禽流感病毒的傳染源尚不明確，但通過攜帶H7N9禽流感病毒的禽類的分泌物以及排泄物可進(jìn)行傳播，通過呼吸道以及禽類分泌物進(jìn)行傳播，當(dāng)前大多為禽類傳播至人的情況，但不排除人與人之間傳播的可能性[2]。我國第一例患有該疾病的患者出現(xiàn)于3013年3月，該疾病至今死亡人數(shù)已經(jīng)達(dá)到400多例，患病后的死亡率高達(dá)40%以上，由于該疾病的傳染源尚不明確，因此本文結(jié)合這一疾病展開探究，更好的開展實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部感染以及交叉感染的控制，提升實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理方法。

1 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理內(nèi)容

1.1 危害評估 在開展H7N9禽流感病毒檢測過程中首先應(yīng)該進(jìn)行危險評估，對標(biāo)本中可能存在的致病生物因子、感染性、致病性、對化學(xué)因子的敏感性以及人體劑量反應(yīng)進(jìn)行初步的評估，并且制定出具體的操作方法，更好的對防護(hù)級別進(jìn)行確定。

1.2 生物安全管理綜合措施 在檢測過程中應(yīng)該加強(qiáng)相應(yīng)管理，制定生物安全管理制度，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的安保和準(zhǔn)入情況，讓檢測人員嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化流程進(jìn)行操作，操作過程中加強(qiáng)對使用過的儀器的回收，應(yīng)單獨(dú)存放，并且進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)。陽性標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行合理的保存以及處理，一旦出現(xiàn)意外事件及時報告，并且需要增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員的定期安全檢查。

1.3 生物安全設(shè)施和防護(hù) 開展H7N9禽流感病毒檢測的功能區(qū)，并且對設(shè)備進(jìn)行配備，加強(qiáng)檢測人員的著裝要求，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度進(jìn)行操作。

2 實(shí)驗(yàn)室生物安全級別

疑似H7N9禽流感病毒應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜內(nèi)進(jìn)行分裝，滅活，待以上步驟完成后進(jìn)行核酸提取，從而達(dá)到個人防護(hù)措施的相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，對感染H7N9禽流感病毒的禽類則應(yīng)該在生物安全三級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行開展，與病人提取出的H7N9禽流感病毒實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行區(qū)分。

3 實(shí)驗(yàn)室布局

3.1 實(shí)驗(yàn)室主要布局 實(shí)驗(yàn)室可以分為三個區(qū)域，分別為試劑的儲藏區(qū)以及準(zhǔn)備區(qū)、樣品的提取區(qū)以及基因擴(kuò)展和分析區(qū)。每個區(qū)域應(yīng)該有明確的界限劃分，并且貼有警示標(biāo)識，專門的地方進(jìn)行專門的使用，避免較差使用造成交叉污染。

3.2 實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)備 試劑的儲藏區(qū)以及準(zhǔn)備區(qū)應(yīng)配備零下70℃的低溫冰箱以保存樣本用，配備混勻器并且安裝紫外線消毒燈。樣品提取區(qū)應(yīng)配備低溫高速離心機(jī)、安全柜、零下70℃的低溫冰箱、高溫滅菌器、混勻器并且安全紫外線消毒燈。基因擴(kuò)增和分析區(qū)則需要配備全自動熒光定量PCR儀并安裝紫外線消毒燈。并且三個區(qū)域都應(yīng)有備用電源以應(yīng)急使用。

4 標(biāo)本采集、包裝運(yùn)輸和保存

標(biāo)本采集過程中應(yīng)從患者的支氣管進(jìn)行痰液的采取，操作人員在這一過程中應(yīng)按照規(guī)范操作，以保證樣本的質(zhì)量，并且避免較差感染，采集過后將應(yīng)用的壓舌板以及棉球等醫(yī)療廢物進(jìn)行統(tǒng)一處理，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行蒸汽消毒處理。檢測到的感染性物質(zhì)則需要通過三層包裝系統(tǒng)進(jìn)行包裝，完善運(yùn)輸?shù)氖掷m(xù)，并由專門的車輛進(jìn)行運(yùn)送。樣本接受之后應(yīng)有相關(guān)人員穿戴防護(hù)裝備后在二級生物安全柜內(nèi)開啟，對表面進(jìn)行清潔后將其打開，若打開過程中出現(xiàn)溢出的情況，則應(yīng)立刻進(jìn)行事故處理。檢測過程中應(yīng)讓具備技能操作培訓(xùn)合格人員操作，操作過程中應(yīng)動作輕緩，減少氣泡的出現(xiàn)，通過傳遞窗送至基因擴(kuò)展分析區(qū)，在操作過后需要應(yīng)用10%氯化鈉進(jìn)行擦拭，剩余的樣本則放回冰箱內(nèi)，雙人上鎖進(jìn)行統(tǒng)一管理。

5 實(shí)驗(yàn)室的安保和準(zhǔn)入

實(shí)驗(yàn)室的安保應(yīng)落實(shí)到位，對門禁卡進(jìn)行應(yīng)用，讓有權(quán)限的員工入內(nèi)，特殊情況下需要由負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)，進(jìn)入的員工必須有體檢健康證明，并且獲得相應(yīng)的資格證書。

6 儀器的使用和維護(hù)

每次使用儀器后應(yīng)將使用者的姓名以及使用情況進(jìn)行登記，制定相關(guān)儀器的維護(hù)流程，儀器出現(xiàn)異常后應(yīng)及時聯(lián)系廠家進(jìn)行維修，維修過程中需要告知維修人員潛在風(fēng)險，并且讓其穿戴防護(hù)服進(jìn)入。

7 生物安全事故處理

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該制定生物安全事故的處理辦法，每天都應(yīng)保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有充足劑量的消毒劑，若出現(xiàn)生物安全事故后應(yīng)及時向上級匯報，并啟用應(yīng)急管理措施來縮小影響的范圍。H7N9禽流感病毒屬于流行性疾病，若不開展有效的管控會對人們的生活產(chǎn)生叫大的影響，因此需要在這一過程中加強(qiáng)對生物安全問題的關(guān)注，進(jìn)一步結(jié)合當(dāng)前的實(shí)際情況制定安全管理體系[3-4]。創(chuàng)建實(shí)驗(yàn)室的安全管理體系是十分必要的，這一過程中應(yīng)首先明確自身目標(biāo)，保證環(huán)境安全，合理的處理具有傳染性的樣品，再圍繞目標(biāo)構(gòu)建起相應(yīng)的框架，從而更好的在今后的過程中對生物安全管理方法進(jìn)行完善，提升檢測過程中的安全性。

參考文獻(xiàn)

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