紅細胞冷凝集對血常規結果的干擾及處理對策探討

張艷萍　邵玲俐

【摘要】 目的 探討紅細胞冷凝集對血常規檢測結果的影響和處理對策及與感染階段的關系。

方法 選取3例感染早、中、后期患者， 采集其空腹靜脈血， 制作紅細胞冷凝集標本， 并分別于37℃水浴0.5 h、37℃水浴1.0 h、血漿置換等處理后， 在Sysmex-xs1000i全自動血細胞分析儀上檢測。記錄并分析患者就診時血常規結果及不同處理方法血常規結果。結果 冷凝集標本處理前肉眼觀察可見采血管內壁血液標本呈紅色細沙樣顆粒。不同處理方案后復測發現發病初期， 37℃熱水浴0.5 h即可糾正冷凝集標本的血常規結果。發病時間長， 單純37℃熱水浴后， 紅細胞（RBC）和血小板計數（PLT）分布圖仍明顯異常并有相應的報警;RBC和紅細胞壓積（HCT）結果顯著減低， 紅細胞平均體積（MCV）、紅細胞平均血紅蛋白量（MCH）、紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）結果均顯著增高， 血紅蛋白（HGB）輕度增高， 白細胞（WBC）變化不大， PLT增高。對于37℃水浴1.0 h仍不能糾正標本， 采用血漿置換后復測， 血細胞分布圖和各參數的檢測結果均可糾正。結論 感染早期， 低滴度冷凝集標本可用熱水浴糾正， 而感染中后期， 血漿置換是糾正高滴度冷凝集標本的最優選擇。對懷疑為紅細胞冷凝集的標本應選擇快速有效的方法進行糾正， 為臨床提供正確有效的檢驗報告。

【關鍵詞】 紅細胞冷凝集;血漿置換;血常規

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.16.043

血常規是臨床最常用的檢測項目， 血常規結果的準確性直接關系到治療方案的選擇， 因此如何做好血常規的質量控制是檢驗工作中不斷探索的課題。紅細胞冷凝集是血常規檢驗工作中常見的現象。為了能夠及時發現和正確排除紅細胞冷凝集對血常規檢測結果的干擾， 作者對日常工作中發現的3例紅細胞冷凝集標本進行了一些研究試驗， 結果報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 病例1：患者， 女， 75歲， 因咳嗽伴低熱

1 d到本院就診， 予銀黃顆粒、清熱感冒顆粒口服治療2 d后未好轉， 入院后檢查：肝腎功正常， 紅細胞沉降率61 mm/h， 抗鏈球菌溶血素O和類風濕因子正常， 肺炎支原體免疫球蛋白M（IgM）陽性。結合胸片診斷為社區獲得性肺炎， 予莫西沙星400 mg， 1次/d， 抗感染治療10 d后好轉出院。

病例2：患者， 男， 73歲， 因上呼吸道感染， 間斷發熱

3 d來本院就診， 胸片顯示肺部有陰影， 收治入院， 肝腎功正常， 紅細胞沉降率35 mm/h， 抗鏈球菌溶血素O和類風濕因子正常， 肺炎支原體IgM陰性。診斷為社區獲得性肺炎， 予阿奇霉素250 mg， 1次/d， 配合左氧氟沙星500 mg， 1次/d， 治療5 d后好轉。

病例3：患者， 男， 87歲， 因低熱、咳嗽、咳痰5 d來本院就診， 血常規結果異常， 有慢性粒細胞白血病（慢粒）病史， WBC 16.25×109/L， 肝腎功能無明顯異常， 紅細胞沉降率41 mm/h， 抗鏈球菌溶血素O和類風濕因子正常， 肺炎支原體IgM陽性。初步診斷為社區獲得性肺炎， 予莫西沙星400 mg， 1次/d， 抗感染治療10 d后好轉出院。

1. 2 研究方法

1. 2. 1 標本采集 用EDTA-K2紫色真空采血管抽取患者空腹靜脈血2 ml。

1. 2. 2 儀器與試劑 日本Sysmex-xs1000i全自動血細胞分析儀及配套原裝試劑， 該儀器以細胞化學染色加光散射法檢測WBC， 電阻抗法檢測RBC和PLT。儀器使用前已校準， 每日測定配套質控物， 結果均在靶值允許范圍內。

1. 2. 3 實驗方法 按照《全國臨床檢驗操作規程》進行標本操作。將冷凝集標本采用下述不同方案進行處理：①37℃水浴0.5 h;②37℃水浴1 h;③血漿置換：記錄血量， 3000 r/min離心10 min， 用加樣槍插至上清液與血細胞交界面3 mm處， 緩緩將上層血漿吸出棄掉， 加入等量生理鹽水混勻， 反復洗滌3次， 最后一次棄掉上清后， 加入等量生理鹽水， 顛倒混勻后上機檢測。

1. 4 觀察指標 記錄并分析患者就診時血常規結果及不同處理方法血常規結果。

2 結果

冷凝集標本處理前肉眼觀察可見采血管內壁血液標本呈紅色細沙樣顆粒。不同處理方案后復測發現發病初期， 37℃熱水浴0.5 h即可糾正冷凝集標本的血常規結果。發病時間長， 單純37℃熱水浴后， RBC和PLT分布圖仍明顯異常并有相應的報警;RBC和HCT結果顯著減低， MCV、MCH、MCHC結果均顯著增高， HGB輕度增高， WBC變化不大， PLT增高。對于37℃水浴1.0 h仍不能糾正標本， 采用血漿置換后復測， 血細胞分布圖和各參數的檢測結果均可糾正。患者就診時血常規結果分析見表1。不同處理方法血常規結果分析見表2。

3 討論

冷凝集素是一種多克隆或單克隆自身抗體， 絕大多數單克隆冷凝集抗體發現于淋巴網狀細胞瘤患者， 而多克隆冷凝集抗體則多由感染引起， 特別是支原體肺炎或傳染性單核細胞增多癥[1-3]。冷凝集自身抗體主要是IgM完全抗體， 少數為免疫球蛋白G（IgG）或免疫球蛋白A（IgA）。IgM抗體對人紅細胞Ⅰ類抗原具有特異性， 與其抗原有10個結合位點， <30℃抗體可與多個RBC結合后迅速形成血凝塊， 造成RBC數量明顯假性減少， 溫度提高后凝集可消失。健康人體血清幾乎都有低滴度的冷凝集素存在， 當其效價<1︰16時對血常規的影響不明顯， 當其效價越高影響越明顯[4]。本例感染早期患者體內冷凝集素處于相對較低滴度， 通過熱水浴即可糾正血常規結果。感染中后期患者體內冷凝集素處于相對高滴度， 熱水浴并不能將其糾正， 血漿置換則可糾正， 其RBC參數和PLT與感染前檢測結果最吻合。末梢血稀釋法可糾正但效果欠佳， 稀釋雖降低了標本的凝集效價， 減少了細胞的聚集， 降低了冷凝集素的干擾， 但稀釋本身就存在誤差， 容易使結果有所偏差[5]。另外， 1例患者入院時肺炎支原體IgM陰性， 可能與患者處于感染早期及實驗方法學敏感性限制有關， 因本科目前尚未開展冷凝集檢測， 故未能提供患者體內可能存在冷凝集自身抗體的充分證據， 但通過檢測血液標本發現存在明確的冷凝集現象， 同時莫西沙星抗感染治療有效[6]， 似乎也從另一個角度驗證了患者體內可能出現了冷凝集自身抗體的判斷。

Sysmex-xs1000i全自動血細胞分析儀采用電阻抗法檢測RBC， 冷凝集素使紅細胞凝集， 導致RBC數減低， 盡管凝集的RBC體積大于單個RBC體積， 在通過血細胞分析儀微孔計數時得到的MCV增大， 但紅細胞凝集時以RBC減低為主要特征[7]。因此， HCT（HCT=RBC×MCV）結果仍然減低， 并由此造成MCH（MCH=HGB/RBC）、MCHC（MCHC=HGB/HCT）的計算值異常升高。冷凝集素除對RBC有作用外， 也可凝集淋巴細胞、中性粒細胞、單核細胞和PLT， 使WBC、PLT的結果也假性減低。本儀器采用的是細胞化學染色加光散射法檢測WBC， 可以較準確地區分WBC和未溶解的凝集RBC， 故對WBC影響不大。雖然RBC和PLT經同一通道進行檢測， 但由于PLT體積比RBC小， 理論上對PLT計數影響不大， 但本例患者冷凝集素造成PLT假性增高， 具體原因有待以后進一步探討。HGB是由SLS-HGB測定法（比色法）進行測定， 因此影響不大[8]。

綜上所述， 在日常工作中要對每份血細胞檢測結果仔細分析， 發現結果或細胞分布圖有異常時， 應查找原因， 排除干擾， 對懷疑為紅細胞冷凝集的標本， 低滴度冷凝集標本可用熱水浴糾正， 而高滴度標本則可選擇血漿置換來糾正， 通過選擇快速有效的糾正方法為臨床提供正確有效的檢驗報告是醫務工作者的職責所在。

參考文獻

[1] 樂家新， 馬峻龍， 許菡， 等. 紅細胞冷凝集對不同類型血細胞分析儀檢測結果的影響探討. 醫療衛生裝備， 2009， 30（2）：69-71.

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[8] 王勵， 黃瑞英. 生理鹽水置換等量血漿并溫育法可消除冷凝集素對血常規檢驗的影響. 臨床檢驗雜志， 2014， 32（8）：637.