老年類風濕關節(jié)炎患者血清CXCL-9及CXCL-10表達及臨床意義

韓葉光 符生苗 符克英 王茹 張培

(海南省人民醫(yī)院中心實驗室，海南 海口 570311)

類風濕關節(jié)炎(RA)是一種以對稱性多關節(jié)受累的滑膜炎和關節(jié)破壞為主要特征的自身免疫性疾病，是造成人類喪失勞動力和致殘的重要原因之一〔1〕。近年研究發(fā)現(xiàn)，CXC趨化因子配體(CXCL)-9及CXCL-10在自身免疫性疾病中異常表達，通過固有免疫和獲得性免疫過程參與自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展，有望作為自身免疫性疾病的生物學標志物〔2,3〕。本研究通過檢測老年RA患者血清CXCL-9及CXCL-10表達水平，分析其與RA活動度的相關性，旨在為RA的早期診斷及早期治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月至2018年3月海南省人民醫(yī)院收治的老年RA患者108例，男36例，女72例，年齡60～83〔平均(68.50±9.26)〕歲。RA診斷參考1987年美國風濕病學會(ACR)修訂的RA診斷標準和分類標準。另選取同期在院體檢健康者50例作為對照組，男18例，女32例，年齡60～78〔平均(67.25±8.40)〕歲。選取的研究對象均排除合并其他自身免疫性疾病、感染、惡性腫瘤和重要器官系統(tǒng)疾病。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會批準及患者知情同意。

1.2 研究方法 按照患者28個關節(jié)疾病活動性評分(DAS28)來區(qū)分RA活動度，DAS28<5.0分為低活動，DAS28≥5.0分為高活動，108例老年RA患者中低活動組41例，高活動組67例。采用Sharp評分法評估患者骨侵蝕和骨破壞的程度，Sharp評分越高表明結構性改變越嚴重。108例RA患者中非骨侵蝕組48例，骨侵蝕組60例。

1.3 觀察指標 所有研究對象于清晨空腹抽取靜脈血5 ml置于未加抗凝劑的離心管中，3 500 r/min，離心10 min分離血清于EP管，-70℃低溫冰箱保存待測。類風濕因子(RF)及抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測，試劑盒由上海科新生物技術股份有限公司提供。CXCL-9及CXCL-10采用CXCL-9及CXCL-10鼠抗人單克隆抗體ELISA檢測試劑盒(R&D Systems，美國)檢測血清CXCL-9及CXCL-10含量。嚴格按照試劑盒說明書及操作步驟進行。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0軟件進行t及χ2檢驗。繪制受試者工作特征(ROC)曲線分析各實驗室指標對RA的診斷價值，曲線下面積(AUC)比較采用Z檢驗。相關性分析采用Pearson相關分析。

2 結 果

2.1 RA組和對照組臨床一般資料比較 RA組與對照組性別、年齡、體重指數(shù)(BMI)、收縮壓、舒張壓、家族史、糖尿病史、高血壓史、飲酒史及吸煙史等情況比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2 RA組和對照組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平比較 RA組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表2。

表1 RA組和對照組臨床一般資料比較

表2 RA組和對照組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平比較

2.3 高活動組和低活動組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平比較 高活動組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平均明顯高于低活動組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表3。

表3 高活動組和低活動組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平比較

2.4 骨侵蝕組和非骨侵蝕組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平比較 骨侵蝕組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平均明顯高于非骨侵蝕組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表4。

表4 骨侵蝕組和非骨侵蝕組血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平比較

2.5 CXCL-9、CXCL-10、RF、抗CCP抗體及四項聯(lián)合診斷RA的價值 CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體診斷RA的臨界值分別為104.36 pg/ml、25.40 pg/ml、9.53 IU/ml、54.80 RU/ml。四項聯(lián)合診斷RA的AUC(95%CI)為0.920(0.862～0.975)明顯高于單項CXCL-9〔0.796(0.730～0.863)〕、CXCL-10〔0.828(0.771～0.884)〕、RF〔0.770(0.710～0.832)〕及抗CCP抗體〔0.752(0.690～0.814)〕，差異有統(tǒng)計學意義(Z=5.824、5.207、6.253、6.610，P<0.05)，其敏感度和特異度為93.0%和86.4%。見表5。

2.6 CXCL-9及CXCL-10與RF、抗CCP抗體及DAS28評分的相關性 Pearson相關分析顯示，RA患者血清CXCL-9與RF、抗CCP抗體及DAS28評分呈顯著正相關(r=0.546、0.458、0.362，均P<0.01)，CXCL-10與RF、抗CCP抗體及DAS28評分呈顯著正相關(r=0.638、0.517、0.435，均P<0.01)。

表5 CXCL-9、CXCL-10、RF、抗CCP抗體及四項聯(lián)合診斷RA的價值

3 討 論

RA呈全球分布，全世界的發(fā)病率平均為1%，在我國的發(fā)病率為0.2%～0.5%〔4〕，約一半的患者在2年內可發(fā)生關節(jié)破壞，大多數(shù)患者出現(xiàn)不同程度的功能受損和關節(jié)畸形，致使RA患者的生活質量嚴重降低，給社會和家庭帶來沉重的負擔〔5〕。RA的具體發(fā)病機制目前尚未明確，多數(shù)學者認為，基因及環(huán)境因素、細菌和病毒感染及機體自身的免疫系統(tǒng)功能紊亂與RA的發(fā)生有關。CXCL-9屬于趨化因子CXC亞家族，其通過與效應細胞上特異性受體CXCR3的結合，活化各類白細胞并趨化至病灶處，在機體的免疫防御中發(fā)揮作用。有研究表明，CXCL-9通過與相應受體相互作用調節(jié)免疫細胞的遷移，在炎癥性疾病的發(fā)病過程中起著關鍵性作用〔6〕。CXCL-10是α趨化因子家族的一員，對于T細胞的發(fā)育、遷移、黏附起著重要作用，還能夠活化單核細胞及自然殺傷細胞，參與多種自身免疫疾病的發(fā)生發(fā)展過程〔7〕。RF是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體，是臨床上常用來作為RA早期診斷和預后判斷的檢測指標〔8〕。抗CCP抗體以IgG型抗體為主，70% RA患者血清中可檢測到抗CCP抗體，同時抗CCP抗體陽性也可以用來預測RA骨關節(jié)的破壞程度〔9〕。

本研究結果顯示，血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平在RA患者中異常高表達，其可能通過調控促炎細胞因子的分泌，參與RA的發(fā)生發(fā)展。在RA發(fā)病過程中，機體在損傷因子刺激下，大量分泌趨化因子CXCL-9及CXCL-10，使效應性T淋巴細胞大量定向遷移，從而參與了與RA的病情發(fā)展〔10〕。本研究結果顯示CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗體水平與RA的活動度和骨侵蝕程度相關，可能參與RA的發(fā)生發(fā)展。Kuan等〔11〕研究發(fā)現(xiàn)，血清CXCL-9及CXCL-10水平變化與RA疾病活動性密切相關，可作為RA判斷病情及疾病活動的敏感生物標志物。Pandya等〔12〕研究表明，CXCL-10與RA活動度呈正相關，可作為RA嚴重程度惡和預測關節(jié)損害的生物學指標。張瓊等〔13〕研究認為，RF表達水平與RA病情進展相關，RF表達水平越高提示患者的預后越差。另有研究顯示，RF及抗CCP抗體陽性是RA患者發(fā)生骨破壞的可能危險因素，RF及抗CCP抗體水平越高及其與RA密切相關的共同表位越多，關節(jié)損害就越嚴重〔14〕。DAS28評分是評估RA患者疾病活動度的有效指標〔15〕。本研究結果說明CXCL-9、CXCL-10與RF、抗CCP抗體共同參與了老年RA的病理過程，CXCL-9、CXCL-10水平升高可能導致病情活動，促進疾病發(fā)展，從而加重關節(jié)滑膜局部微環(huán)境炎癥作用。安樂美等〔16〕研究也顯示，趨化因子與RA患者的DAS28評分呈正相關，可作為評價RA疾病活動度的指標。四項聯(lián)合診斷RA的AUC明顯高于單項，其敏感度和特異度最好。李傳利等〔17〕研究表明，趨化因子可作為RA診斷、病情判斷及疾病活動的生物學指標，與RF及抗CCP抗體聯(lián)合檢測更有助于老年RA的診斷。張園等〔18〕研究證實，單一的自身抗體檢測容易造成臨床上對RA的誤診或者是漏診，故一般需要結合多項聯(lián)合檢測以確診老年RA。本研究發(fā)現(xiàn)，單獨檢測其中一項對RA的診斷均有一定的局限，四項聯(lián)合檢測有助于提高老年RA診斷的準確性。

綜上所述，血清CXCL-9及CXCL-10在老年RA患者中異常高表達，且與老年RA活動度和骨侵蝕程度相關，其與RF及抗CCP抗體四項聯(lián)合檢測有助于提高老年RA診斷的敏感度和特異度。將CXCL-9及CXCL-10作為治療靶點進行阻斷，可能會減輕老年RA的炎性反應及減緩病情進展，但老年RA具體的發(fā)病機制尚未明確，未來還需要更多實驗研究來證實CXCL-9及CXCL-10在老年RA發(fā)病中具體的作用。