王嬌嬌 高衛萍 丁寧 韋慶波
干眼是臨床常見的眼表疾病,以眼部干澀感、異物感、畏光、眼紅、刺痛,視力波動、視疲勞,甚至強烈的不適感等為主要臨床表現,嚴重影響人們的工作與生活。其發病率逐年上升,流行病學調查顯示[1],干眼發病率為6%~30%。研究表明,炎癥是干眼的主要發病機制,干眼會引起眼表面上皮細胞的非感染性炎癥反應,眼表炎癥反應與干眼患者癥狀的嚴重程度呈正相關[2]。JAK2/STAT3通路是近年來發現的神經免疫調節通路,能夠控制機體炎癥的發生與發展[3]。在JAK2/STAT3通路中,炎癥刺激信號通過傳入迷走神經傳輸到大腦,激活反射反應后經傳出迷走神經傳遞,迷走神經的分支副交感神經纖維末梢釋放乙酰膽堿(acetylcholine,ACh),ACh通過其受體α7nAChR發揮作用,可抑制細胞因子的釋放,從而達到減輕炎癥的作用[4]。本次我們擬通過檢測干眼模型兔淚腺JAK2/STAT3信號轉導通路中相關因子表達變化,探討針刺對干眼的抗炎作用以及與JAK2/STAT3信號轉導通路的關系。
1.1 實驗材料
1.1.1 儀器及試劑華佗牌一次性無菌針灸針(蘇州醫療器械廠生產,產品批號:140314);Schirmer試紙(天津晶明新技術開發有限公司,批號:20140505),兔α7nAChR、Ach ELISA試劑盒(南京金益柏生物技術有限公司),α-BGT(Sigma,批號:047K4034,規格5 mg),多功能酶標儀(美國Biotek公司,型號:ELX800),恒溫培育箱(上海一恒科學儀器有限公司,型號:GHP-9050N),熒光PCR儀(美國Life公司,型號:Quantsdudio7),氫溴酸東莨菪堿(成都普菲德生物技術有限公司),氟米龍滴眼液(參天制藥有限公司,批號:1FM4362)。
1.1.2 PCR引物合成引物序列依據Gen-Bank公布的序列進行……