癌胚抗原、糖類抗原、CA125、血管生成素、細胞角蛋白19片段及甲胎蛋白檢測在肺癌診斷中的臨床研究*

王 玲，申 鴻

1.西安大興醫院檢驗科(西安 710016)；2.西安交通大學醫院檢驗科(西安 710061)

肺癌發病率及病死率在我國均居惡性腫瘤之首，流行病學專家預測顯示，我國2025年肺癌患病人數將突破1千萬[1]。早發現、早診斷是提高患者治療效果，改善患者預后的關鍵。然肺癌早期臨床癥狀不明顯，加之肺部豐富的血運易造成腫瘤細胞轉移，因此絕大多數肺癌在發現時已處于晚期。伴隨分子生物學發展，血清腫瘤標志物檢測因取材方便、創傷性小和重復性較好等特點，使得其在腫瘤良惡性鑒別診斷和癌癥早期篩查、臨床療效評價、預后判斷等方面的價值越來越受關注[2-3]。癌胚抗原(Carcino-embryonic antigen， CEA)、糖類抗原199(Carbohydrate antigen，CA199)、CA125、血管生成素-2(Angiogenin-2， Ang-2)、細胞角蛋白19片段(Cytokeratin 19 fragment，CYFRA211)及甲胎蛋白(Alpha fetal protein，AFP)均是臨床報道的與惡性腫瘤發生發展存在相關性的標志物。本研究通過回顧性分析本院收治的96例肺癌患者臨床資料，并與同時期接受的肺部良性病變者和正常體檢者血清腫瘤標志物表達水平進行比較。旨在通過對比分析，總結上述6項腫瘤標志物在肺癌診斷中的靈敏度、特異度、診斷符合率及其與腫瘤細胞分化程度、腫瘤分期、肝轉移等病理特征的相關性。

資料與方法

1 一般資料 選取2013年1月至2017年12月本院初診為肺部病變的患者150例作為研究對象。入選病例均經病理學檢查確診，未接受任何方式的放化療和靶向藥物治療，且病歷資料記錄完整。其中包括74例肺癌患者(肺癌組)和76例良性病變者(良性組)，肺癌組男51例、女23例，年齡40～85歲，平均(57.12±5.68)歲；鱗癌37例、腺癌25例、小細胞癌12例；Ⅰ期7例、Ⅱ期21例、Ⅲ期32例、Ⅳ期14例。良性組男48例、女28例，年齡45～85歲，平均(57.35±5.64)歲；肺炎43例、支氣管擴張13例、肺結核11例、肺膿腫8例、炎性假瘤1例。同時采用分層抽簽方式從同期體檢人群中選擇70例健康人員作為對照組，男44例、女26例，年齡43～82歲，平均(57.28±5.69)歲。三組性別、均齡間對比差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 三組研究者均取清晨空腹肘靜脈血樣5ml，加入無抗凝劑的無菌試管中保存于-20℃冰箱，待析出血清后，離心，3000r/min，10min，所分離血清-20℃保存。選擇型號為DXI800的全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特公司生產)及其配套試劑等測定血清CEA；CA199、CA125、CYFRA211及AFP選擇型號為E601的電化學發光全自動分析儀及配套試劑進行測定；Ang-2采用酶聯免疫法檢測，選擇美國Bio-Kinet-ics公司提供的FL-312e全自動酶標儀及配套試劑。所有操作過程嚴格遵循說明書，質控符合要求。血清標志物正常參考范圍：CEA<3.4ng/ml、CA199<39U/ml、CA125<35U/ml、Ang-2<278.5ng/ml、CYFRA211<3.3ng/ml、AFP<20ng/ml。

3 統計學方法 數據處理選擇SPSS17.0統計學軟件，各項檢測指標水平以均值±標準差表示，不同組間計量資料比較行單因素ANOVA分析；陽性率間比較行卡方檢驗。檢驗水平為α=0.05。

結 果

1 三組研究對象血清腫瘤標志物檢測水平 見表1。三組血清腫瘤標志物CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測水平間差異具有統計學意義(P<0.05)，肺癌組6項指標檢測水平均明顯高于良性組和健康對照組(P<0.05)，但對照組和良性組各指標檢測水平間比較差異無統計學意義(P>0.05)。

2 不同癌變類型患者血清腫瘤標志物檢測水平比較 見表2。鱗癌、腺癌、小細胞癌不同病變類型患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測水平間比較差異均具有統計學意義(P<0.05)。腺癌患者血清CEA、CA199、CA125、AFP檢測水平均明顯高于鱗癌及小細胞癌患者(P<0.05)；小細胞癌患者血清Ang-2顯著低于鱗癌及腺癌患者，而鱗癌血清CYFRA211水平明顯高于腺癌和小細胞癌(P<0.05)。

3 不同TNM分期患者血清腫瘤標志物檢測水平比較 見表3。不同病理分期患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測水平間差異均具有統計學意義(P<0.05)。Ⅲ期患者標志物檢測水平明顯高于Ⅰ和Ⅱ期，Ⅳ期明顯高于Ⅲ期(P<0.05)。

表1 三組研究對象血清腫瘤標志物比較

注：與對照組比較,*P<0.05；良性組比較,#P<0.05

表2 不同癌變類型患者血清腫瘤標志物檢測水平比較

注：與鱗癌比較，*P<0.05；腺癌比較，#P<0.05

表3 不同TNM分期患者血清腫瘤標志物檢測水平比較

注：與Ⅰ和Ⅱ期比較，*P<0.05；與Ⅲ期比較，#P<0.05

4 血清腫瘤標志物檢測在肺癌診斷中敏感性、特異性和準確度 見表4。各指標單項檢測肺癌診斷敏感度和準確度均較低，CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211及CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211+AFP聯合檢測診斷肺癌診斷敏感性和準確度明顯高于單項檢測及CEA+CA199、CA125+CEA+CA199(P<0.05)，而6項指標聯合檢測敏感性和準確度顯著高于CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211聯合檢測(P<0.05)，但特異度未出現明顯下降(P>0.05)。

表4 血清腫瘤標志物檢測在肺癌診斷中敏感性、特異性和準確度

注：與其他各指標及聯合指標檢測比，*P<0.05

討 論

肺癌已成為全球性公共健康難題，為癌癥主要死亡病因之一，5年生存率很低。我國江蘇南通市2002-2014年肺癌5年生存率僅為12.40%[4]；珠海2003-2010年為15.70%[5];新疆2010-2014年則有相對較高生存率為19.42%[6]。肺癌早期診斷率低是患者預后不良及生存率低的主要因素。研究指出，早期肺癌臨床確診率不足15%，多數患者在確診時已處于晚期[7]。因此，早期篩查、早期確診、及早治療是改善肺癌患者預后，提高其生存率的關鍵途徑之一。CT等影像學檢查在胸部病變診斷中應用廣泛，可清晰顯示腫瘤的形態特征，操作者可直觀觀察到腫瘤大小、位置、形態及邊緣情況，甚至還可通過影像學重建方式觀察腫瘤周圍的大血管、心臟等，起到良好定位、分期等幫助[8]。但該診斷方式在肺癌早期篩查中的效果較差。腫瘤標志物是機體癌變發生發展過程中原癌基因及產物異常表達所產生的活性物質，其異常表達往往早于影像學可見的組織學表現[9]。腫瘤標志物主要存在于機體血液、體液和(或)組織間隙中，因此具有檢測簡單方便及可動態檢測等優點，所以可通過測定機體腫瘤標志物表達水平輔助惡性腫瘤的篩查診斷。

CEA是最早發現與結腸癌及胎兒腸組織中的酸性糖蛋白，存在于各類癌變組織中，其表達水平在肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌中均明顯升高，但糖尿病、吸煙、妊娠期等人群中15%～53%血清CEA也會升高，因此，其并非惡性腫瘤的特異性標志物，但在癌變篩查中具有輔助價值。國內外報道均顯示，肺癌患者血清CEA表達水平明顯高于良性病變者及健康人群[10-11]；且研究認為，CEA表達水平與癌變分期存在明確相關性，分期越晚，CEA濃度越高[12]。CYFRA211屬于上皮細胞支架蛋白，主要分布于單層上皮細胞，因此在來源于上皮組織的腫瘤組織中具有很高的表達量，是診斷肺小細胞癌的敏感標志物，尤其是對鱗癌診斷具有較高特異度。CA199和CA125是肺癌中研究相對較少的腫瘤標志物。CA199屬于酸化的乳-N-鹽藻戊糖Ⅱ，其異常表達在多種惡性腫瘤中均有表現。CA199敏感度低、但具有相對較高的特異性，需要同其他標志物聯合應用[13]。CA125屬于卵巢癌相關抗原，其表達升高多見于婦科腫瘤患者，近期研究發現肺癌患者血清中亦存在此物質升高現象，尤其是肺腺癌患者中更為明顯[14]。Ang-2屬于分泌性糖蛋白，正常組織中表達水平低，但腫瘤細胞中呈高表達。近年關于Ang-2對結直腸癌、胃癌及非小細胞肺癌腫瘤細胞侵襲、生長、轉移的研究日益增加，且結果顯示，其具有損傷腫瘤周邊原有正常血管，促進腫瘤細胞增殖、腫瘤血管形成，抑制腫瘤細胞分化等功效[15]。AFP是胎兒期即合成的糖蛋白，其在促生長、抗氧化、免疫調節及信號轉導等多方面均具有重要作用。在胚胎組織及多數腫瘤細胞，尤其是生長迅速的腫瘤細胞中均有AFP受體表達。雷程琳等[16]研究顯示，原發性肺癌患者血清AFP含量明顯高于良性病變者和健康對照者，但其在原發性肺癌診斷中靈敏性及特異性均較低，而其與CYFRA211和神經元特異性烯醇化酶聯合檢測的靈敏性、特異性及準確度均得到明顯提升。 本研究結果顯示，肺癌組患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測水平均明顯高于良性組和健康對照組，該結果與以往報道結果相吻合[12,17]。表明，本研究所選6項腫瘤標志物均在肺癌早期診斷中均具有一定應用價值。鱗癌、腺癌、小細胞癌不同病變類型患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測水平間比較差異均具有統計學意義。腺癌患者血清CEA、CA199、CA125、AFP檢測水平均明顯高于鱗癌及小細胞癌患者；小細胞癌患者血清Ang-2顯著低于鱗癌及腺癌患者，而鱗癌血清CYFRA211水平明顯高于腺癌和小細胞癌；不同病理分期患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測水平間比較差異均具有統計學意義。Ⅲ期患者各項標志物檢測水平明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期，Ⅳ期明顯高于Ⅲ期。提示，本研究所選6項標志物可用于腺癌、鱗癌及小細胞癌的癌變類型，同時也是判斷癌變分期，判斷患者預后的良好指標。而在肺癌早期診斷敏感性和準確性方面，6項指標聯合檢測效果均明顯優于CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211聯合檢測及各項指標單項檢測，但特異度未出現明顯下降。提示，CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211+Ang-2+AFP聯合檢測具有很好的敏感度及準確性，但并不影響其診斷的特異性。

腺癌血清CEA、CA199、CA125、AFP水平明顯高于鱗癌及小細胞癌；鱗癌血清CYFRA211水平明顯高于腺癌和小細胞癌；小細胞癌血清Ang-2顯著低于鱗癌及腺癌，且各項標志物表達水平與患者病理分析呈一定相關性。然而6項標志物在肺癌診斷中的敏感性及準確性均較低，而多種聯合檢測能顯著提高對肺癌的敏感性及診斷準確性，有利于患者的早發現、早治療，在肺癌診斷方面具有重要價值。