腎綜合征出血熱患者血清同型半胱氨酸、胱抑素C水平檢測及臨床意義*

宋紅波

西安市第八醫(yī)院(西安 710061)

腎綜合征出血熱(Hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS) 又稱流行性出血熱，是一種自然疫源性疾病，因感染漢坦病毒引起，鼠類為其主要傳染源，因該疾病嚴(yán)重危害人類健康，已成為全球范圍內(nèi)重大公共衛(wèi)生問題之一[1]。我國HFRS發(fā)病率較高，發(fā)病人數(shù)約超過世界發(fā)病總數(shù)80%，多數(shù)患者臨床表現(xiàn)為出血、充血、發(fā)熱、低血壓休克及腎臟損害，重癥患者可導(dǎo)致死亡[2]。關(guān)于HFRS發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確，運(yùn)用恰當(dāng)?shù)姆椒ǎx擇合理的臨床檢測指標(biāo)，對HFRS患者的診治和預(yù)后具有重要的臨床意義。近年來，醫(yī)學(xué)檢測技術(shù)快速發(fā)展，臨床檢驗(yàn)人員對HFRS的研究亦不斷深入，通過檢測血清中某些異常變化的指標(biāo)水平，并將上述異常指標(biāo)作為HFRS的診斷性標(biāo)志物，可有效提升對HFRS病情的判斷和制定合理的診治方案。本文通過檢測HFRS患者血清同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)水平，同時測定胱抑素C(Cystatin C，Cys-C)水平，經(jīng)過與正常對照組健康體驗(yàn)者上述指標(biāo)的對比研究，探討血清Hcy、Cys-C水平變化與HFRS病情嚴(yán)重程度的關(guān)系，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下，以期為HFRS臨床診治提供參考依據(jù)。

資料與方法

1 一般資料 選擇2014年7月至2018年2月我院收治的105例HFRS患者為研究對象，均參照《腎綜合征出血熱診斷與治療》[3]和《腎綜合征出血熱及并發(fā)癥防治》[4]中HFRS的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷：患者血清流行性出血熱免疫球蛋白M(IgM)抗體均呈陽性。其中男56例，女49例，年齡25～68歲，平均年齡(44.5±4.7)歲，將其根據(jù)患者病情特點(diǎn)分為輕型21例、中型27例、重型30例及危重型27例。另設(shè)正常對照組40例，均為同期在我院接受健康體檢者，其中男25例，女15例；年齡25～66歲，平均年齡(43.6±4.5)歲。所有受試對象均排除合并糖尿病、高血壓、心臟病、腦卒中、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤等慢性病史，且受試對象近期均未服用過能夠影響血清Hcy、Cys-C水平的藥物。HFRS組患者與正常對照組受試者在性別、年齡方面經(jīng)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究已通過我院倫理委員會批準(zhǔn)。

2 研究方法

2.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本處理： 所有HFRS患者均分別于發(fā)熱期、少尿期、恢復(fù)期采集晨起空腹外周靜脈血，正常對照組受試者于體檢當(dāng)日晨空腹采集外周靜脈血，所有受試者采血量均為4 ml，常規(guī)方法(3000r/min離心10min)分離血清，置-80℃冰箱保存，用于測定血清Hcy、Cys-C指標(biāo)水平。

2.2 試劑與方法：采用免疫比濁法檢測血清中Hcy、Cys-C水平，測試儀器為全自動生化分析儀(日立7600型)，Hcy、Cys-C試劑盒購自上海研謹(jǐn)生物科技有限公司，檢測過程由操作人員按照試劑盒說明書和儀器使用規(guī)程進(jìn)行。

結(jié) 果

1 HFRS組與正常對照組受試者血清Hcy、Cys-C水平比較 HFRS組患者血清Hcy、Cys-C水平在發(fā)熱期、少尿期、恢復(fù)期等各病程階段均顯著升高，尤以少尿期最高，與正常對照組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 HFRS組各病程階段患者與正常對照組受試者血清Hcy、Cys-C水平比較

注:與對照組比較，*P<0.05

2 HFRS組少尿期患者與正常對照組受試者血清Hcy、Cys-C水平比較 HFRS組各病情狀態(tài)患者在輕型、中型、重型、危重型等病情狀態(tài)血清Hcy、Cys-C水平在少尿期階段均顯著升高，尤以危重型最高，均顯著高于正常對照組，比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表2 HFRS組少尿期患者與正常對照組受試者血清Hcy、Cys-C水平比較

注:與對照組比較，*P<0.05

3 HFRS組少尿期患者血清Hcy與Cys-C水平的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析處理表明，HFRS組少尿期患者血清Hcy與Cys-C呈顯著正相關(guān)(r=0.62，P<0.05)，見表3。

表3 HFRS組少尿期患者血清Hcy與Cys-C指標(biāo)相關(guān)性分析(n=105)

討 論

HFRS是由漢坦病毒感染引起的自然疫源性疾病，患者以腎臟損害多見，同時伴有全身廣泛臟器損傷[5]。該病發(fā)病機(jī)制目前尚不十分明確，有學(xué)者認(rèn)為是病毒直接作用，亦由學(xué)者認(rèn)為是免疫病理損害[6-7]，目前學(xué)術(shù)界趨向于認(rèn)同免疫發(fā)病機(jī)制[8]，認(rèn)為漢坦病毒侵入機(jī)體后，可激活免疫細(xì)胞并釋放細(xì)胞因子，細(xì)胞因子通過級聯(lián)反應(yīng)造成多器官免疫病理損傷[9]，諸如廣泛的毛細(xì)血管彌漫性損傷，繼而引起血漿外滲，血容量降低引起血壓值偏低，腎小球?yàn)V過率降低，急性腎功能衰竭發(fā)生。目前臨床多以尿素、肌酐等為腎功能檢測指標(biāo)作輔助診斷HFRS[10]，但易受腎內(nèi)外多種因素的影響，而影響檢測的應(yīng)用。

Hcy是一種含硫氨基酸，可損傷血管，是蛋氨酸、半胱氨酸等脫甲基后的代謝產(chǎn)物，是人體內(nèi)非必需氨基酸[11]，其在體內(nèi)產(chǎn)生后隨即被分解代謝，因此，正常人血中Hcy水平較低。肝臟和腎臟是Hcy主要代謝器官，因此腎臟病變將導(dǎo)致血清Hcy水平的升高[12]。現(xiàn)有研究表明[13]，腎臟疾病患者隨著病情進(jìn)展，其血清Hcy水平明顯提升，Hcy可使自由基活性增加，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞損傷，降低腎小球基底膜細(xì)胞功能，改變腎小球過濾功能，增高腎小球內(nèi)壓，從而導(dǎo)致或加重腎臟疾病。

Cys-C屬堿性非糖化蛋白質(zhì)，也稱為γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，在各種組織的有核細(xì)胞和體液中廣泛存在，其分子量為13.3kD，是一種由122個氨基酸殘基組成的堿性蛋白質(zhì)，可顯著抑制組織蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶活性。有研究報道[14]，機(jī)體內(nèi)各種組織的有核細(xì)胞均可持續(xù)產(chǎn)生帶正電荷的Cys-C，后者可被腎小管上皮細(xì)胞完全重吸收并降解Cys-C，能被其在血中保持穩(wěn)定的水平，且不受性別、年齡、飲食、炎癥、感染、腫瘤等因素的干擾，血中Cys-C主要經(jīng)腎小球?yàn)V過而被清除。另有研究表明[15]，Cys-C是一種較為理想的內(nèi)源性腎小球?yàn)V過率的內(nèi)源性標(biāo)志物，可敏感地反映腎功能輕度損傷血清水平，當(dāng)腎臟輕微損傷時，血清Cys-C水平隨即升高，并與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

本研究選擇血清Hcy、Cys-C為檢測指標(biāo)，對105例HFRS患者血清Hcy、Cys-C水平進(jìn)行測定，并參照40例健康受試者檢測結(jié)果，進(jìn)行了對照型的研究。研究結(jié)果表明，HFRS患者血清Hcy、Cys-C水平在發(fā)熱期、少尿期、恢復(fù)期等各病程階段均顯著升高，尤以少尿期最高；HFRS患者隨著病情狀態(tài)不同，患者血清Hcy、Cys-C水平亦有所區(qū)別，在少尿期階段患者血清Hcy、Cys-C水平均顯著升高，尤以危重型上述指標(biāo)升高明顯。以上研究結(jié)果表明，血清Hcy、Cys-C等檢測指標(biāo)對診治HFRS及探討其發(fā)病機(jī)制具有重要的臨床意義。