2018年北京市艾滋病篩查試驗室室間比對結果分析

李佳 張琴 辛若雷 盧紅艷 孫偉東

艾滋病(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)感染引起的以人體CD4+T淋巴細胞減少為特征，繼發各種機會性感染、惡性腫瘤和中樞神經系統病變的綜合性疾患[1]。截至2017年10月31日，北京市累計報告艾滋病病毒感染者及病人共25 648例，現存活感染者及病人共17 476人[2]，疫情仍呈擴大趨勢。近些年北京市艾滋病檢測隊伍不斷擴大，室間比對作為評價檢測結果準確性的重要手段之一，可以反映實驗室的運行現狀。為了解目前北京市各級艾滋病篩查實驗室的檢測質量，現將2018年室間比對結果報道如下。

1 材料與方法

1.1考評對象 共有245家北京市衛生計生委所批復建立的艾滋病篩查實驗室，其中醫療機構實驗室數量最多，占86.5%(表1)。

1.2考評設計與實施

1.2.1樣本盤的設計與制備: 設計與制備5種不同抗原或抗體屬性的考評用樣本盤：陰性、抗原陽性、弱陽性、陽性、強陽性。每家實驗室10支樣本，每種屬性2支。均委托北京康徹思坦生物技術有限公司生產。

1.2.2隨機化處理: 使用WPS Office中的RAND函數實施隨機編號，用統一規格的凍存管分裝考核樣本。

表1 2018年北京市艾滋病篩查實驗室室間比對成績分布

1.2.3檢測策略和結果回報：參照《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準》(WS293-2008)[1]、《全國艾滋病檢測技術規范》檢測[3]，回報電子版及紙版結果。

1.3統計學方法 艾滋病確證中心負責收集各篩查實驗室的回報結果，使用SPSS 19.0匯總分析。

1.4評分標準和成績反饋 滿分100分，其中樣本檢測60分、原始記錄10分、臨界值5分、復檢化驗單5分、外部對照5分、質控圖5分、其他錯誤項10分。80分及以上判定合格。出現漏檢、誤檢問題的實驗室，補考通過可判為合格。

2 結果

2.1成績分布 室間比對的參加率為100%，總體合格率為100%，全市平均成績為96.1分，其中疾病預防控制機構的最高(98.7分)，第三方檢測機構的平均成績最低(94分)。滿分實驗室共有115家(46.9%)，其中疾病預防控制機構滿分率最高(62.5%)，第三方檢測機構滿分率最低(12.5%，表1)。

2.2評分標準得分分布 有15家(6.1%)篩查實驗室漏檢與誤檢25份樣本，復檢滿分率低于初篩且有1家低于21分(表2)。

2.3常見錯誤項

2.3.1樣本檢測：漏檢與誤檢的25份樣本中，13份(13/25)是弱陽性樣本，8份(8/25)是陽性樣本，3份(3/25)是抗原陽性樣本，有1份陰性樣本。不同檢測方法均有檢測出錯情況，包含3種酶聯免疫試劑、2種化學發光試劑、4種快速檢測試劑，其中快速檢測出錯率較高，在出錯的弱陽性及陽性樣本中有84.6%與50%都是快速檢測(表3)。對出現漏檢、誤檢的實驗室，聯合轄區篩查中心實驗室進行了專項督導，補考后沒有再次出現類似情況，成績合格。

2.3.2原始記錄：檢測依據為《艾滋病和艾滋病病毒診斷標準》(WS293-2008)，49家實驗室檢測依據缺失或引用錯誤；《全國艾滋病檢測技術規范》已更新為2015年版本，9家實驗室SOP文件未更新；1家實驗室儀器、試劑等信息不全。

2.3.3臨界值：計算錯誤及設定錯誤共包括5種酶聯免疫三代試劑及3種化學發光四代試劑，包括珠海麗珠三代(3家扣分)、上海科華(1家扣分)、北京華大吉比愛、廈門英科新創、北京萬泰三代(1家扣分)、德國羅氏(3家扣分)、美國雅培(4家扣分)、德國西門子(1家扣分)。

表2 2018年北京市艾滋病篩查實驗室室間比對評分標準得分分布

2.3.4復檢化驗單：扣分內容主要是項目填寫不規范或空項(59家扣分)，試劑信息中應標注屬于幾代試劑(24家扣分)，《全國艾滋病檢測技術規范》中快速檢測的結果由“陰/陽性”變更為“無/有反應性”(5家扣分)。

2.3.5質控圖：扣分集中在酶聯試劑，繪制質控圖時應使用S/CO值，2家用錯參數；3家圖中數據與原始結果中不能對應；有1家提供了其他檢測項目的質控圖。

2.3.6其他: 單位編號或樣本編碼填報錯誤(49家扣分)，450 nm/620 nm雙波長比色時不應設置空白對照(7家扣分)，初篩無反應的樣本無需進行復檢試驗(8家扣分)，篩查實驗室只能出具“HIV抗體陰性”的報告單(10家扣分)。

表3 2018年北京市艾滋病篩查實驗室室間比對中漏檢與誤檢情況

3 結論

3.1北京市艾滋病確證中心實驗室自2002年起組織開展篩查實驗室室間比對，2018年合格率、滿分率較高，較之前有明顯提高[4]。這表明目前的檢測質量基本滿足臨床診療。其中，疾病預防控制機構滿分率與平均成績最高，第三方檢測機構的最低，可能跟人員流動性偏大有關。初篩的檢測質量優于復檢，由于復檢中包含兩次檢測，且很多單位采用快速檢測作為第二試劑，而快速檢測是肉眼判讀，其扣分率比酶聯或發光都高，尤其在弱陽性樣本的檢測中，判讀時間、判讀光線、不同檢測者都可能影響判讀結果。

3.2督導中發現,部分實驗室日常工作中不常遇到復檢樣本，對第二試劑的說明書沒有仔細閱讀，在臨界值計算時忽視了陰性對照或陽性對照的設定條件。另外，個別有多年工作經驗的檢測者，由于盲目自信也出現沒有按照作業指導書中操作的情況。盡管培訓中對質控圖繪制、復檢化驗單填寫等都做了講述，但是多數培訓人員沒有對科內或院內進行二次培訓。與其他省市類似[5-8]，大多數醫療機構普遍采取輪轉方式，這點導致輪轉或新上崗的檢測者不能有效交接工作。今后要把樣本保存與運送、檢測流程、儀器設備的維護與檢定等作為重點督導項目，對于性質特殊的醫療機構，如社會福利院、精神病院等檢測需求少的實驗室仍需加強技術指導，減少因不規范操作造成的漏檢與誤檢。

此次研究顯示合格率及滿分率較高，但在督導中仍發現有的篩查實驗室在對待室間比對樣本時多次重復檢測或由高級職稱人員代替檢測，不能完全真實有效地反映日常檢測質量。另外，此次僅對2018年室間比對結果進行了分析，今后應結合歷年室間比對結果進行總結，更有利于發現檢測中存在的問題，提高檢測質量。