分析動物試驗中多重比較方法的選擇

榮 譽

（遼寧中醫(yī)藥大學實驗動物中心 遼寧 沈陽 110032）

在動物試驗指標確定中，當面臨綜合性的特征時，應(yīng)該改變以往單一性的比較方法，通過多種比較方法的構(gòu)建，實現(xiàn)動物試驗指標確定的有效性，有效提高檢測的整體質(zhì)量。在以往動物試驗中，人們通常會采用一元協(xié)方差分析方法，通過不同方法的使用以及處理效果的確定，提高試驗分析以及處理的差異性，從而實現(xiàn)多種比較方案檢測的有效性，實現(xiàn)動物檢測結(jié)果的整體價值，但是，若在單一指標分析中，如果沒有考慮到各個指標之間的問題，會形成不正確性的統(tǒng)計結(jié)果。因此，在動物試驗中，為改變以往單一性的試驗限制，應(yīng)該通過多重比較方法的使用及選擇，提高動物試驗的有效性，為動物試驗方法的確定提供參考。

1.多重比較方法

1.1 所謂多重比較法，通常運用在變異數(shù)據(jù)分析之后，當發(fā)現(xiàn)平均數(shù)存在顯著差異時，應(yīng)該通過試驗水準中檢視方法的確定，實現(xiàn)平均數(shù)間差異的分析。對于一項試驗內(nèi)容，通過多種比較方法的使用，可以結(jié)合正確的、無效的假設(shè)內(nèi)容，進行不正確數(shù)據(jù)以及假設(shè)的分析，有效提高數(shù)據(jù)分析、處理的有效性。而且，數(shù)據(jù)檢測以及多重比較方法運用中，應(yīng)該結(jié)合動物試驗的檢測方法，進行數(shù)據(jù)的處理，以提高動物試驗多重比較確定的有效性[1]。

1.2 多重比較方法原則。

在動物試驗檢測中，應(yīng)該結(jié)合多重比較的方法，進行動物試驗方案的確定。首先，在試驗方案擬定中，應(yīng)該結(jié)合動物試驗的特點，進行統(tǒng)一試驗的整合，第一，在單因素試驗方案中，應(yīng)該通過整個試驗進行一個試驗因素不同水平的確定，保證單因素試驗方案設(shè)計的有效性。第二，多因素試驗方案。結(jié)合多試驗方案特點，應(yīng)該將同一試驗中的兩個及兩個以上的試驗因素進行分析。其次，試驗設(shè)計的基本原則。第一，在試驗代表性原則確定中，通過生物代表性的分析，應(yīng)該將研究對象的品種作為重點，通過代表性、環(huán)境性的分析，實現(xiàn)試驗環(huán)境的的有效創(chuàng)設(shè)。第二，試驗的正確性。在試驗中應(yīng)該通過各項試驗的分析，進行非試驗因素的低水平確定，有效避免誤差的出現(xiàn)，提高動物試驗檢測的正確性、準確性。第三，試驗的重復(fù)性。通過對重復(fù)性指標的確定，應(yīng)該在相同條件下進行同一試驗的重復(fù)使用，通過重復(fù)試驗保證動物試驗的測試的準確性。

1.3 方差分析中的多種比較。

通道對方差分析技術(shù)的分析，應(yīng)該通過F 檢驗討論組間編譯的分析，應(yīng)該在總變異作用下通過兩組以上平均差的顯著性檢驗，得到整體結(jié)果。如果在檢測技術(shù)確定中F 檢驗不顯著，以為著試驗中存在著自變量對因變量沒有顯著影響的問題，因此檢驗結(jié)束。若F 檢驗結(jié)果顯著，應(yīng)該通過多組平均數(shù)的對比，確定專門分析技術(shù)，以實現(xiàn)方差分析多重比較[2]。

2.影響動物試驗多重比較的因素

2.1 溫度因素

在動物試驗中，常用的試驗動物為恒溫動物，在一定范圍應(yīng)該保持體溫的穩(wěn)定性以及生理調(diào)節(jié)功能，當動物試驗檢測中，出現(xiàn)溫度變化過急或是過快的問題，動物會產(chǎn)生行為以及生理的不良反應(yīng)，無法實現(xiàn)動物試驗檢測結(jié)果的有效性。例如，在動物試驗檢測中，當出現(xiàn)溫度過高的問題，會造成雌性動物周期的紊亂，嚴重的會導(dǎo)致動物的抵抗力下降，造成動物死亡。

2.2 濕度因素

結(jié)合動物試驗檢測方案，動物體一般會通過皮膚蒸發(fā)進行散熱，在濕度以及動物溫度調(diào)節(jié)的狀況下，當出現(xiàn)濕度過高以及濕度過低的現(xiàn)象，會導(dǎo)致動物皮膚蒸發(fā)紊亂，嚴重降低動物的抵抗能力。而且，在高溫原病影響下，會影響動物的健康，無法提高試驗結(jié)果的有效性。

2.3 照度的影響因素

通過對動物試驗試驗的分析，光照對動物的生理活動有著一定的調(diào)節(jié)作用，光對動物的生殖會產(chǎn)生一定的影響。但是，在不同種類以及不同品系動物敏感的狀況下，需要適當?shù)墓庹者M行調(diào)節(jié)，并在不破壞動物生理功能影響的狀況下，調(diào)節(jié)動物的周期，通常狀況下，在光照試驗中，光照與動物的距離需要控制在0.8～1.0m 的狀態(tài)，以有效提高動物試驗的穩(wěn)定性。

2.4 生物因素的影響

結(jié)合動物試驗狀況，生物因素主要是在動物生存空間下，為生物對動物會產(chǎn)生一定的影響，而且，在同種動物之間、異種動物之間存在著相互影響的問題。動物試驗中病原微生物會對動物造成影響，嚴重的會出現(xiàn)動物發(fā)病、死亡的現(xiàn)象。同時，在異種動物之間存在著相互影響的因素，在這種狀況下，動物的生長發(fā)育、生長繁殖會對動物的試驗結(jié)果造成影響。

3.淺析動物試驗中多重比較方法的選擇

3.1 LSD檢測方法

在LSD 檢測方法使用中，作為最早的多重比較方法，應(yīng)該通過LSD以及獨立樣本t 檢驗方法的確定，在LSD 法最小顯著差異法分析中，公式如（1）

公式（1）中的t 作為簡單的監(jiān)測技術(shù)，應(yīng)該通過對檢驗水準技術(shù)的校準，實現(xiàn)對標準誤差計算的統(tǒng)一，充分展現(xiàn)樣本信息使用的有效性，保證標準誤差確定的科學性。可以在LSD 使用中滿足試驗的檢測需求，試驗中將F 檢驗作為重點，實現(xiàn)合并方差的處理。由于LSD 法計算方法的簡單性，應(yīng)該通過檢驗功率以及技術(shù)使用方案的分析，進行多種模擬試驗方法的確定，充分展現(xiàn)LSD 檢測技術(shù)的有效性。但是，在LSD 檢測方法使用中，存在著一定的限制性問題，具體問題如下：第一，在該種技術(shù)檢測中通常涉及到比較均勻的數(shù)對；第二，在該種計算方法使用中存在著誤差概率較多的問題；第三，在技術(shù)使用中應(yīng)該將多重比較方法的使用作為重點。因此，在LSD 技術(shù)使用中存在著相對獨立的技術(shù)內(nèi)容，通過相鄰排序以及均數(shù)間的比較，實現(xiàn)多種技術(shù)試驗的有效性。數(shù)據(jù)檢測以及多重比較方法運用中，應(yīng)該結(jié)合動物試驗的檢測方法，進行數(shù)據(jù)的處理，以提高動物試驗多重比較確定的有效性。在該種檢測方法使用中，Bonferroni 不等式確定中，由于該種方法相對保守，檢驗結(jié)果存在著更小的檢驗功效，與之相反的，在自由統(tǒng)計學分析中存在著拒絕無效假設(shè)的問題，因此，檢驗技術(shù)的功效相對較高，Bonferroni 通常被運用在比較多次的重復(fù)數(shù)據(jù)之中。在Waller Duncan檢驗中，這種就還內(nèi)側(cè)方法與LSD 方法相似，應(yīng)該確定相似技術(shù)的使用，實現(xiàn)動物檢測技術(shù)的有效性。

3.2 q檢驗技術(shù)。

在多個平均數(shù)之間顯著差異就檢測中，應(yīng)該通過統(tǒng)一臨界值的確定，進行最大以及最小平均數(shù)的差異性確定，在錯誤概率中，q 的檢驗針對不同均數(shù)單位，在Ⅰ型錯誤發(fā)生后，主要是假陽性錯誤，錯誤發(fā)生的概率相對較大，因此，在q 檢驗中，應(yīng)該針對不同的均數(shù)進行數(shù)據(jù)控制方案的確定，在排序之后兩個平均數(shù)之間包括均數(shù)的個數(shù)，r 作為不同的臨界值，有效降低假陽性錯誤的出現(xiàn)。在相鄰平均數(shù)比價中，當q=t 時，檢測的結(jié)果相同，當r ＞2時，q 的臨界值比t 的檢驗值大，因此，在q 檢驗以及t 檢驗的過程中，應(yīng)該結(jié)合q 檢驗方案的卻額定，記性臨界值的確定，提高動物檢測的價值。在SNK 法使用中，，核心目標是處理不通過均數(shù)的子集，這些子集內(nèi)部同質(zhì)，但是，在不同子集之間存在著差異性，因此，在SNK 檢測中，又被稱之為分層檢驗，其公式如（1）。

通過不同檢測范圍的確定，應(yīng)該結(jié)合不同比哦啊花尊進行顯著判定方案的確定。如，在4個平均數(shù)確定中，當＞＞＞時，其臨界值比價結(jié)果為q1＞q2＞q3＞q4。在SNK 法使用中，應(yīng)該通過不同范圍r 均數(shù)差以及同臨界值比較的確定，實現(xiàn)對檢測結(jié)果的確定。在Tukey HSD 技術(shù)使用中，可以將錯誤率控制在陰性范圍內(nèi)，但是數(shù)據(jù)檢測中存在著一定的錯誤較低的問題，SNK 方法使用中，可以增加動物試驗檢測的有效性，充分保障數(shù)據(jù)檢測的 價值。在Tukey HSD 檢測中，其方法如（3），公式（3）中的不是所有的臨界值都在顯著水平上，因此，在數(shù)據(jù)檢測中應(yīng)該將檢測項目控制在合理范圍之中，實現(xiàn)動物試驗檢測的有效性。

3.3 二項分布變量的檢測技術(shù)。

在二項分布變量技術(shù)的運用，結(jié)合比率或是百分數(shù)形式進行表示，在試驗中，通過動物試驗檢測可以確定百分百率，通過這類計算資料的確定分析，可以實現(xiàn)對二項分布變量的計算，起計算方法如（4），公式（4）中，檢驗功效（1-β），顯著性水平為（a），效應(yīng)量為（d），結(jié)合二項分布變量的樣本，對數(shù)據(jù)計算結(jié)果進行分析，計算結(jié)果如表一所示。

表1 特定和1-的C值表

結(jié)合應(yīng)用公式的計算方法，應(yīng)該通過公式計算方法，進行公式估計樣本含量的設(shè)計，也就是說，在試驗前應(yīng)該結(jié)合假設(shè)效應(yīng)記性增加處理，但是，試驗結(jié)果顯著建撒后，而且，在離散型資料使用中，應(yīng)該按照連續(xù)性資料的確定，進行連續(xù)校正問題的確定，實現(xiàn)對連續(xù)校正計算成本的確定。

4.連續(xù)性變量試驗

（1）2組均數(shù)比較。

在動物試驗檢測中，為了計算連續(xù)性變量的試驗樣本含量，應(yīng)該通過變量標準差、檢驗功效以及顯著水平的分析，進行計算方法的確定。在該種計算方法運用中，所計算的結(jié)果相對可靠。在正態(tài)分布的計算狀況下不會影響對檢測結(jié)果的假設(shè)，但是，應(yīng)該注意極端偏態(tài)分布的問題，通過對變量方法的確定，進行正態(tài)分布因素的確定，之后利用公式進行樣本含量的計算。

（2）配對試驗。

通過對配對試驗的分析，在一組動物處理前后之后，應(yīng)該通過某指標測量變化的分析，進行初始條件的兩兩配對，配對試驗中的每組含量如（5）所示。

（3）單樣本試驗

通過對試驗?zāi)康牡姆治觯瑧?yīng)該將檢測數(shù)據(jù)的確定作為重點，通過對檢測樣本含量的分析，進行單樣本試驗的確定，以實現(xiàn)動物試驗檢測技術(shù)的有效性，為動物試驗檢測方案的構(gòu)建提供支持。

5.其他多重比較方法。

在對照組以及試驗組數(shù)據(jù)比較中，應(yīng)該選擇適宜性的檢驗方法，例如，通過Dunnett’s 檢驗中其檢測結(jié)果相對較高。結(jié)合動物試驗數(shù)據(jù)的檢測特定，通過Scheffe 檢驗中，需要將臨界值大數(shù)據(jù)確定作為重點，通過非均衡性項目的設(shè)計，存在著檢驗較低的問題，因此，在多種比較方法確定中，應(yīng)該結(jié)合多種動物試驗的檢驗方案，提高數(shù)據(jù)檢測的有效性。

總而言之，在現(xiàn)階段動物試驗檢測中，為了提高動物檢測結(jié)果的有效性，應(yīng)將動物的檢測作為重點，認識到影響動物試驗的影響因素，通過限制因素的分析，進行試驗方案的構(gòu)建，以保證動物試驗檢測的有效性，提高試驗檢測的整體質(zhì)量。一般情況下，在動物試驗檢測中，應(yīng)該通過LSD 檢測方法、 q 檢驗技術(shù)、二項分布變量檢測法等技術(shù)的綜合分析，合理選擇試驗方案，通過對試驗檢測方法的分析，進行多種計算方法的確定，以提高動物試驗檢測的有效性，為動物檢測技術(shù)方案的完善提供支持。