經(jīng)頸外靜脈置管制作SD大鼠CRT模型不同導(dǎo)管固定方法的對(duì)比

韋艷　甘曉　趙慧函　應(yīng)燕萍

摘要：目的? 比較大鼠頸外靜脈置管術(shù)后兩種不同導(dǎo)管固定方法的優(yōu)缺點(diǎn)。方法? 將30只清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為A、B兩組，每組15只。A組：暴露、切開右頸外靜脈，置入大鼠頸靜脈硅膠導(dǎo)管，導(dǎo)管末端予堵頭封管，取適宜長(zhǎng)度埋于手術(shù)切口皮下，縫合固定。B組：置管、封管方法同A組，將導(dǎo)管從頸背部皮下隧道引出，固定于頸背部。觀察兩組大鼠術(shù)中出血量、手術(shù)時(shí)長(zhǎng)、麻醉藥物用量、麻醉蘇醒時(shí)長(zhǎng)及術(shù)后7 d大鼠導(dǎo)管脫出情況。結(jié)果? A組術(shù)中出血量少于B組[（0.42±0.15）ml vs （1.08±0.31）ml]，手術(shù)時(shí)長(zhǎng)短于B組[（30.40±3.48）min vs （46.20±5.16）min]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;A組10%水合氯醛劑量少于B組[（0.73±0.05）ml vs （0.85±0.11）ml]，麻醉蘇醒時(shí)長(zhǎng)短于B組[（52.27±4.06）min vs （61.27±7.36）min]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。A組術(shù)后7 d均無(wú)導(dǎo)管脫出，B組術(shù)后7 d有3只大鼠出現(xiàn)導(dǎo)管脫出。結(jié)論? 將大鼠頸靜脈硅膠導(dǎo)管固定于手術(shù)切口皮下的方法較將導(dǎo)管經(jīng)皮下引出，固定于頸背部的固定方法更簡(jiǎn)便、易行，術(shù)中出血量少，手術(shù)時(shí)間短，麻醉藥物用量小，蘇醒快。導(dǎo)管埋入皮下，不易脫出，但不利于經(jīng)靜脈導(dǎo)管給藥。后者雖有不足，但具有近似模擬臨床中心靜脈血管通路，還可通過(guò)靜脈導(dǎo)管給藥，進(jìn)行不同的試驗(yàn)干預(yù)等優(yōu)點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：頸靜脈;置管術(shù);固定;大鼠

中圖分類號(hào)：R472? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.14.021

文章編號(hào)：1006-1959（2019）14-0065-04ina）

Abstract：Objective? To compare the advantages and disadvantages of two different catheter fixation methods after external jugular vein catheterization in rats. Methods? 30 clean SD rats were randomly divided into two groups， A and B， with 15 rats in each group. Group A： Exposure， incision of the right external jugular vein， placement of the rat jugular vein silicone catheter， the end of the catheter was blocked by a plug， and the appropriate length was buried under the skin of the surgical incision and sutured. Group B： The method of catheterization and sealing was the same as that of group A. The catheter was taken out from the subcutaneous tunnel of the neck and back and fixed to the back of the neck. The amount of intraoperative blood loss， duration of surgery， amount of anesthetic drug， length of anesthesia recovery， and catheter eluence at 7 days after surgery were observed.Results? The amount of intraoperative blood loss in group A was less than that in group B [（0.42±0.15） ml vs （1.08±0.31） ml]， and the length of operation was shorter than that in group B [（30.40±3.48） min vs （46.20±5.16） min]， the difference was statistically significant （P<0.05）; the dose of 10% chloral hydrate in group A was lower than that in group B [（0.73±0.05） ml vs （0.85±0.11） ml]， and the length of anesthesia was shorter than that in group B [（52.27±） 4.06） min vs （61.27±7.36） min]， the difference was statistically significant （P<0.05）. There was no catheter eruption at 7 d after operation in group A， and catheter degeneration occurred in 3 rats at 7 d after operation.Conclusion? The method of fixing the rat jugular vein silicone catheter under the skin of the surgical incision is better than that of the catheter. The fixation method fixed on the neck and back is simpler and easier. The intraoperative blood loss is small， the operation time is short， and the amount of anesthetic is small. Wake up quickly. The catheter is buried under the skin and is not easy to escape， but it is not suitable for intravenous catheter administration. Although the latter is insufficient， it has the advantage of approximating the clinical central venous vascular access， and can also be administered through intravenous catheters for different experimental interventions.

Key words：Jugular vein;Catheterization;Fixation;Rat

隨著中心靜脈血管通路裝置（central venous access device，CVAD）在臨床上的廣泛應(yīng)用，越來(lái)越多的學(xué)者開始重視CVAD的并發(fā)癥。有的并發(fā)癥如導(dǎo)管相關(guān)性血栓（catheter-related thrombosis，CRT）可以引起深靜脈血栓形成、肺栓塞，從而危及患者生命。因此，有效制作CRT動(dòng)物模型，并進(jìn)行相應(yīng)的試驗(yàn)干預(yù)，為臨床CRT患者提供有價(jià)值的研究，勢(shì)在必行。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠頸外靜脈置管制作導(dǎo)管相關(guān)性血栓模型，術(shù)后用兩種不同的方法固定靜脈導(dǎo)管，觀察兩種固定方式的優(yōu)缺點(diǎn)，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物? 清潔級(jí)健康Sprague-Dawley（SD）大鼠30只，雄性，體重180～240 g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SYXK桂2014-0002，實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性分籠飼養(yǎng)1周，均給標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，自由飲水。采用隨機(jī)數(shù)表法將SD大鼠隨機(jī)分為A組（n=15）和B組（n=15）。

1.1.2實(shí)驗(yàn)材料? 小鼠頸靜脈插管（硅膠）1#（思科諾生物科技<北京>有限公司）、不銹鋼堵頭（思科諾生物科技<北京>有限公司）、顯微血管手術(shù)器械（廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供）、一次性使用無(wú)菌注射器：1 ml（浙江靈洋醫(yī)療器械有限公司）、縫合針（上海信成醫(yī)療器械有限公司）、4-0非吸收性外科縫線（江蘇信邁縫合材料有限公司）、水合氯醛（天津市大茂化學(xué)試劑廠）、0.9%氯化鈉注射液：100 ml（石家莊四藥有限公司）、注射用青霉素鈉：80萬(wàn)單位（華北制藥股份有限公司）、碘伏（廣西北侖河醫(yī)科工業(yè)集團(tuán)有限公司）、棉簽（廣西北侖河醫(yī)科工業(yè)集團(tuán)有限公司）、外科紗布敷料（穩(wěn)健醫(yī)療用品股份有限公司）、一次性使用手術(shù)單（南昌市通達(dá)醫(yī)療器械有限公司）、BL-1000-X電子天平（廈門佰倫斯電子科教有限公司）、大鼠固定臺(tái)（自制）。

1.2方法

1.2.1頸外靜脈置管? 隨機(jī)分組、編號(hào)后取SD大鼠稱重。A、B組均參照國(guó)內(nèi)外一些置管手術(shù)方法[1-4]進(jìn)行適當(dāng)修訂，以10%水合氯醛（按0.35 ml/100g計(jì)算）行大鼠腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻醉，待麻醉滿意后，將大鼠仰臥位固定于操作臺(tái)，備皮、消毒，沿頸中線偏右側(cè)作一縱行切口，長(zhǎng)約2 cm，依層切開皮膚，皮下組織，用顯微鑷于皮下作鈍性分離，顯露右頸外靜脈，完全游離血管，長(zhǎng)約1～1.5 cm，在血管下穿過(guò)并擺放2根4-0號(hào)線，一根結(jié)扎右頸外靜脈遠(yuǎn)心端，另一根放置于近心端備用，用顯微鑷提起右頸外靜脈血管外膜，眼科剪在靜脈管壁上全層剪一個(gè)“V”形小口，約占靜脈周長(zhǎng)的1/3～1/2，術(shù)者右手用1 ml注射器針頭改裝成的“魚鉤樣”針頭，針頭尖端于靜脈切口處將血管輕輕向上勾起形成一個(gè)開口，左手持血管鑷輔助將開口撐大，此時(shí)由助手將末端連接有1 ml注射器的大鼠頸靜脈硅膠導(dǎo)管置入2～2.5 cm，推抽與導(dǎo)管末端連接的注射器，可見有血液回流且推注順暢后（圖1），立即予青霉素4萬(wàn)單位抗感染，并予生理鹽水沖管后，導(dǎo)管末端用不銹鋼堵頭封管。于導(dǎo)管上第一個(gè)小凸起處（距管尖約2 cm），以4-0號(hào)線結(jié)扎固定近心端導(dǎo)管;在導(dǎo)管第二個(gè)小凸起處（距管尖約2.5 cm）再次結(jié)扎固定導(dǎo)管遠(yuǎn)心端，松緊適宜并將導(dǎo)管連同附近的少許肌肉縫合固定2～3針。

1.2.2導(dǎo)管固定? 在完成上述置管步驟后，A組：將導(dǎo)管遠(yuǎn)心端（末端）取適宜長(zhǎng)度埋于手術(shù)切口皮下（圖2），縫合切口進(jìn)行固定。B組：大鼠取俯臥位，在頸背部剪一約2 cm的切口，用直血管鉗自頸部手術(shù)切口處向上于頸背部皮下穿出造皮下隧道，鉗夾硅膠管在頸背部引出，皮膚外預(yù)留2～2.5 cm，于頸背部將導(dǎo)管用4-0絲線縫合3～4針固定（圖3）。術(shù)后手術(shù)傷口均予碘伏消毒。

1.2.3術(shù)后護(hù)理? 所有實(shí)驗(yàn)大鼠術(shù)后予電暖器復(fù)溫、保暖，保持環(huán)境溫度在24℃左右。待麻醉清醒后，A組給予正常群居飼養(yǎng)，B組則單只單籠飼養(yǎng)。術(shù)后7 d，碘伏消毒手術(shù)切口，1次/d，并觀察大鼠導(dǎo)管脫出情況。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

A組術(shù)中出血量、10%水合氯醛劑量均少于B組，手術(shù)時(shí)長(zhǎng)、麻醉蘇醒時(shí)長(zhǎng)均短于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。A組術(shù)后7 d均無(wú)導(dǎo)管脫出，B組術(shù)后7 d有3只大鼠出現(xiàn)導(dǎo)管脫出。

3討論

CVAD目前已廣泛應(yīng)用于重癥監(jiān)護(hù)病房和慢性疾病人群，尤其是腫瘤患者[5，6]。美國(guó)每年約有600萬(wàn)根中心靜脈導(dǎo)管置入，而我國(guó)單統(tǒng)計(jì)PICC導(dǎo)管的年使用量約為50萬(wàn)根[7]。盡管CVADS具有很多優(yōu)點(diǎn)，但隨著CVAD使用的日益增多，其所帶來(lái)的并發(fā)癥越來(lái)越引起人們的重視。CRT是最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一[8-10]，其中血栓阻塞可致導(dǎo)管失用，延長(zhǎng)患者住院周期，增加其診療費(fèi)用[11];更為嚴(yán)重的是它可引起肺栓塞[12]，再發(fā)性深靜脈血栓[13]、血栓后綜合征和敗血癥等，危及患者生命[14]。出于倫理等因素考慮，研究者很難獲得CRT患者的靜脈組織或血栓進(jìn)行研究，因此，制作CRT動(dòng)物模型是研究CRT發(fā)病機(jī)制必要的替代方法。

有文獻(xiàn)報(bào)道[15]，大約有18種動(dòng)物可用來(lái)制備實(shí)驗(yàn)性靜脈血栓形成模型，常用的動(dòng)物有犬、兔、大小鼠等。由于大鼠具有手術(shù)耐受性強(qiáng)、可操作性高、術(shù)后恢復(fù)和培養(yǎng)繁殖快、價(jià)格低等特點(diǎn)，是一種較理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)性靜脈血栓動(dòng)物模型的建立方法很多，有機(jī)械損傷法、靜脈異物法、靜脈結(jié)扎法、光化療法、血栓誘導(dǎo)藥物致栓法等[16]。目前，國(guó)內(nèi)已有研究報(bào)道[17，18]，經(jīng)兔頸外靜脈置管構(gòu)建CRT模型，但用深靜脈導(dǎo)管構(gòu)建大鼠CRT模型的報(bào)道很少，因此本實(shí)驗(yàn)選用SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取其右頸外靜脈進(jìn)行置管，制作大鼠CRT模型，用兩種不同的方式固定頸外靜脈導(dǎo)管，觀察兩種不同的固定方式各自的優(yōu)缺點(diǎn)。

本次研究發(fā)現(xiàn)，A組靜脈導(dǎo)管固定方法相對(duì)于B組，具有簡(jiǎn)便易行、術(shù)中出血量少、手術(shù)時(shí)間短、對(duì)大鼠的刺激小、術(shù)中無(wú)需再次追加麻藥、麻醉藥物用量少、大鼠術(shù)后蘇醒快等優(yōu)點(diǎn)，兩組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而且，因大鼠生性好動(dòng)，善于撕咬，將導(dǎo)管末端直接埋于手術(shù)切口皮下，可以避免大鼠撕咬，降低導(dǎo)管脫出率，還可以群居飼養(yǎng)，節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。但A組導(dǎo)管固定方式也有其缺點(diǎn)，由于導(dǎo)管埋入大鼠切口皮下，不能經(jīng)過(guò)靜脈導(dǎo)管給藥，在大鼠CRT造模成功后不能通過(guò)導(dǎo)管進(jìn)行有效的試驗(yàn)干預(yù)。B組固定方式將導(dǎo)管從手術(shù)切口周圍經(jīng)皮下隧道引出，于頸背部進(jìn)行固定，此方法雖然較A組復(fù)雜，手術(shù)時(shí)間延長(zhǎng)，術(shù)中出血量增加，并且在構(gòu)建皮下隧道時(shí)，往往因?qū)Υ笫蟠碳?qiáng)度加大，大鼠疼痛易躁動(dòng)，需再次追加首次計(jì)量1/4麻藥，致使術(shù)后麻醉蘇醒時(shí)間延長(zhǎng)。但該方法有以下一些優(yōu)點(diǎn)：①近似模擬臨床CVAD的置入，使大鼠CRT模型更符合臨床患者CRT的病理生理學(xué)特點(diǎn)。②此固定方法可以從固定在體外的靜脈導(dǎo)管給藥，便于在CRT模型制作成功后，通過(guò)靜脈給藥，進(jìn)行不同的試驗(yàn)干預(yù)，為臨床CRT患者提供有借鑒意義的預(yù)防和治療方法。這些優(yōu)點(diǎn)是A組固定方法所不能提供的。

綜上所述，將大鼠頸靜脈硅膠導(dǎo)管固定于手術(shù)切口皮下和將導(dǎo)管經(jīng)皮下引出固定于頸背部這兩種方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)，研究者可以根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的固定方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]Smith MA，Schmidt KT，Iordanou JC，et al.Aerobic exercise decreases the positive-reinforcing effects of cocaine[J].Drug Alcohol Depend，2008，98（1-2）：129-135.

[2]蔡清香，雷洪伊，王冬梅，等.大鼠頸靜脈通道置管術(shù)的技術(shù)改進(jìn)[J].江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，49（9）：24-25，63.

[3]湯海濤，邢雪，張大偉.大鼠頸外靜脈置管方法的改進(jìn)[J].臨床普外科電子雜志，2014，2（1）：29-31.

[4]王曉英，王娟，李敬來(lái)，等.大鼠頸靜脈置管模型在咪達(dá)唑侖新制劑自身交叉實(shí)驗(yàn)藥代動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)中的應(yīng)用[J].國(guó)際藥學(xué)研究雜志，2015，42（3）：394-397.

[5]Gavin NC，Webster J，Chan RJ，et al.Frequency of dressing changes for central venous access devices on catheter-related infections[J].Cochrane Database Syst Rev，2016（2）：CD009213.

[6]Broadhurst D，Moureau N，Ullman AJ.Central venous access devices site care practices：an international survey of 34countries[J].J Vasc Access，2016，17（1）：78-86.

[7]李俊英.外周中心靜脈導(dǎo)管技術(shù)的臨床應(yīng)用[M].北京：科學(xué)出版社，2013：5.

[8]Cotogni P，Barbero C，Garrino C，et al.Peripherally inserted central catheters in non-hospitalized cancer patients：5-year results of a prospective study[J].Support Care，2015，23（2）：403-409.

[9]Chopra V，Ratz D，Kuhn L，et al.Peripherally inserted central catheter-related deep vein thrombosis：contemporary patterns and predictors[J].J Thromb Haemost，2014，12（6）：847-854.

[10]Chopra V，Montoya A，Joshi D，et al.Peripherally inserted central catheter use in skilled nursing facilities：a pilot study[J].J Am Geriatr Soc，2015，63（9）：1894-1899.

[11]Evans RS，Sharp JH，Linford? LH，et al.Reduction of peripherally inserted central catheter-associated CVT[J].Chest，2013，143（3）：627-633.

[12]Colombo R，Gallipoli P，Castelli R.Thrombosis and hemostatic abnormalities in hematological malignancies[J].Clin Lymphoma Myeloma Leuk，2014，14（6）：441-450.

[13]邢雷，孔令泉，厲紅元，等.乳腺癌患者攜帶PICC化療并發(fā)PICC相關(guān)性上肢深靜脈血栓形成的診治探討[J].中國(guó)腫瘤臨床，2011，38（19）：1223-1226.

[14]Grant JD，Stevens SM，Woller SC，et al.Diagnosis and management of upper extremity deep-vein thrombosis in adults[J].Thromb Haemost，2012，108（6）：1097-1108.

[15]Levi M，D？觟rffle-Melly J，Johnson GJ，et al.Usefulness and Limitation of Animal Models of? Venous Thrombosis[J].Thromb Haemost，2001，86（5）：1331-1333.

[16]劉政，張玥，侯玉芬.深靜脈血栓形成動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28（1）：57-59.

[17]艾煕，陳勁，馮麗娟，等.低分子肝素聯(lián)用地塞米松抑制家兔導(dǎo)管相關(guān)性血栓形成[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，44（4）：452-454，459.

[18]沈嬌，趙曉勇，王曉，等.經(jīng)皮穿刺法構(gòu)建新西蘭兔中心靜脈置管模型及評(píng)價(jià)[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2018，35（1）：35-38.

收稿日期：2019-2-1;修回日期：2019-4-30

編輯/楊倩