尿液中肌氨酸、PCA3mRNA在前列腺癌早期診斷中的應用

王乾　孫賓　李殷南　沈儉

摘要：目的? 探討尿液中肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA在前列腺癌早期臨床診斷中的應用。方法? 收集2016年9月～2017年12月在我院收治的前列腺增生患者62例以及前列腺癌患者62例（病理確診）作為研究對象，前列腺癌患者為研究組，前列腺增生患者為對照組。以兩組患者進行前列腺按摩后的初始尿液為標本，采用實時熒光定量對肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA進行檢測，比較兩組患者肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA的差異并統計兩組患者的診斷準確度。結果? 研究組患者診斷準確度高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）;研究組患者尿肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA水平分別為（13.51±2.54）ng/ml、（6.09±0.56）ng/ml、（0.53±0.07）μmol/L，高于對照組的（7.60±0.27）ng/ml、（2.03±0.21）ng/ml、（0.36±0.04）μmol/L，差異具有統計學意義（P<0.05）。結論? 早期聯合監測尿液中的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平，可以提高前列腺癌的監測有效率，為患者提供更為便利的診斷手段。

關鍵詞：肌氨酸;PCA3mRNA;前列腺癌;早期診斷

中圖分類號：R737.25? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.14.059

文章編號：1006-1959（2019）14-0175-03

Abstract：Objective? To investigate the application of sarcosine， PCA3mRNA and serum PSA in the early diagnosis of prostate cancer. Methods? A total of 62 patients with benign prostatic hyperplasia and 62 patients with prostate cancer （pathological diagnosis） were enrolled in our hospital from September 2016 to December 2017. The patients with prostate cancer were the study group and the patients with benign prostatic hyperplasia were the control group. The initial urine of the two groups of patients after prostate massage was used as the specimen. Real-time fluorescence quantification was used to detect sarcosine， PCA3mRNA and serum PSA. The differences of serum PSA between serum and PCA3mRNA were compared and the diagnostic accuracy of the two groups were statistically analyzed.Results? The diagnostic accuracy of the study group was higher than that of the control group，the difference was statistically significant （P<0.05）. The urinary creatinine， PCA3mRNA and serum PSA levels in the study group were （13.51±2.54） ng/ml， （6.09± 0.56） ng/ml， （0.53±0.07） μmol/L， higher than the control group （7.60±0.27） ng/ml， （2.03±0.21） ng/ml， （0.36±0.04） μmol/L，the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion? Early monitoring of urinary creatinine， PCA3mRNA and serum PSA levels in urine can improve the efficiency of prostate cancer monitoring and provide a more convenient diagnostic tool for patients.

Key words：SarcoEsine;PCA3mRNA;Prostate cancer;Early diagnosis

目前腫瘤性疾病已成為社會日益關注的問題，因腫瘤帶來的社會問題日益突出，我國每年大概有2500萬腫瘤患者，美國前列腺癌的患者每年超過了100萬人。統計顯示前列腺癌患者的年齡化正逐漸降低，患者的人數不斷增加，據預測，10年后我國前列腺癌發病率在男性惡性腫瘤中的排行將晉升至前3位。目前臨床上最常用的前列腺癌腫瘤標志物是血清前列腺特異抗原（PSA），盡管血清PSA檢測可以發現早期前列腺癌，但該方法特異度不高，特別是PSA水平處于4～10 ng/ml這個檢測灰區的患者，活檢陽性率僅有20.4%[1]。有報道通過肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA等特異性檢測方法對前列腺癌進行診斷，結果顯示其具有無創、精確度高等多種優勢，成為了一種新起的檢測方法[2]。為此，本研究旨在觀察尿液中肌氨酸、PCA3mRNA、血清PSA水平在前列腺癌早期臨床診斷中的應用價值，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 收集2016年5月～2017年7月上海交通大學醫學院附屬新華醫院崇明分院泌尿外科收治的前列腺增生患者62例以及前列腺癌患者62例，前列腺癌患者設為研究組，前列腺增生患者為對照組。研究組年齡36～53歲，平均年齡（45.27±8.41）歲。對照組年齡35～55歲，平均年齡（46.53±9.56）歲。本研究經過醫院倫理委員會批準，患者均知情同意本研究并簽署知情同意書。兩組年齡等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法? 對兩組患者分別進行前列腺按摩后收集初始尿液標本20～30 ml，放入冰水中冷卻，離心10 min，分離上清液，將尿液殘渣置于冷凍管中，-70℃保存，取離心后殘渣，檢測肌氨酸，采用同位素稀釋液相色譜法（LC/MS）對肌氨酸含量進行檢測[4]。按Takara法對總RNA進行提取，采用微量分光光度計對RNA的濃度與純度進行測定，對離心后的尿沉渣中PCA含量進行測定，常規檢測兩組患者血清PSA水平。

1.3觀察指標? 比較兩組患者診斷的準確度，尿液中肌氨酸含量、PCA3mRNA含量及血清PSA水平。

1.4統計學方法? 本次實驗數據使用SPSS 13.0統計學軟件進行分析，計數資料采用（n）表示，行？字2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，行t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組診斷準確度比較? 研究組患者治療準確度高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2兩組肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平比較? 研究組患者的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平均高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05），見表2。

3討論

隨著人民生活水平的提高、生活節奏的逐漸增快，前列腺癌發病率近年來呈現上升的趨勢，目前已成為常見的泌尿科外科疾病，嚴重威脅患者的身心健康及生命[5]。提高早期前列腺的診斷準確性，一直是臨床上亟待解決的問題。前列腺癌早期無明顯癥狀，但隨著腫瘤的發展會出現急性精囊炎、輸精管炎、性功能障礙等多種并發癥[6]。本研究以肌氨酸氧化酶法檢測尿肌氨酸水平，不受丙氨酸的干擾，可有效解決其他檢測方法對肌氨酸檢測結果的影響。研究顯示，前列腺癌患者尿肌肌氨酸的檢測容易受到多種外在因素的影響，少部分前列腺患者的肌氨酸含量僅在正常范圍內產生波動，肌氨酸在能量代謝上具有重要的作用，肌氨酸的含量與前列腺癌臨床分期、區域性淋巴結轉移成正相關，與人類壽命成負相關[7，8]。

研究顯示，PCA3屬于前列腺癌的特異性標記產物，PCA3在正常前列腺細胞中表達率低，會在前列腺癌細胞中出現較高程度的表達，在其他組織細胞、癌細胞中均不會被表達，因此PCA3被認為是檢測前列腺癌的特異性基因，這為前列腺癌的診斷提供了新的方法，具有較高的臨床價值[9]。在患者尿液中，對PCA3的檢測可以采用轉錄介質的擴增檢測法（TMATM），在有逆轉錄酶與RNA聚合酶的和恒溫環境下，對RNA或DNA分子進行擴增，利用TMATM測定男性尿液中的PCA3評分，PCA3的評分標準化數值為兩種mRNA的比值，PCA3mRNA與PSA mRNA含量的測定采用含有兩種特殊分析成分的試劑，通過對純化的mRNA進行捕捉，將捕捉到的mRNA與包被有把特異性寡核苷酸和轉錄介質擴增的RNA序列的磁性粒子雜交，利用標記有吖啶酯染料的共價鍵做探針特異性檢測擴增產物，再用標準光度計定量檢測[8]。PCA3在前列腺癌的早期診斷、治療等環節都具有潛在的應用價值，且具有檢測方便、無創等優勢，在臨床上具有廣闊的發展空間。但PCA3檢測對實驗的條件、試驗環境要求較高，目前仍然存在一定的難度[10]。

前列腺癌屬于異質性疾病，需要經過多項指標共同檢測，隨著分子生物學的快速發展，mRNA也被運用在檢測當中，這提高了對前列腺癌早期檢測的準確性[10]。本研究中，研究組患者檢測準確度高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05），同時研究組患者的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平均高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05），說明聯合檢測肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA可有效提高前列腺癌的檢出率，但本研究存在樣本量小、研究方向局限等不足。

綜上所述，對患者前列腺的尿液進行監測分析，聯合檢測肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA三個指標，可以提高監測的準確度，為患者提供更為便利的診斷手段，有助于早期前列腺癌的臨床診斷。

參考文獻：

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[10]馬悅，陳弋生.前列腺癌精準診斷的新進展[J].中華男科學雜志，2016，22（11）：1030-1033.

收稿日期：2019-3-5;修回日期：2019-3-19

編輯/錢洪飛